FCM对外周白细胞的免疫荧光分析(一)

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更多、更准确的信息,这无疑对警觉临床和科研有很大帮助。本节 主要讨论有关外周血的白细胞的免疫荧光标记技术、数据分析及临床应用等方面的问题。一、白细胞的免疫荧光标记技术1.白细胞抗原下面给出世界卫生组织对白细胞抗原的统一命名,以及它们的分子量、对应的单克隆抗体及反应阳性的细胞(见表10-2)。表10-2 WHO对白细胞分化抗原的命名抗原分子量单克隆抗体反应阳性细胞CD 1P45/12Leu 6 ,T 6 ,OKT 6胸腺细胞、朗格罕细胞CD 2P50Leu 5 B,T 11 ,OKT 11E玫瑰花受体、T和NK细胞CD 3P19-29Le......阅读全文

荧光免疫分析

免疫分析是基于蛋白抗原和抗体之间、或者小分子半抗原与抗体之间的特异反应的分析方法,是生物分析化学的重要内容之一。其中,用荧光物质作为标记的免疫分析即为荧光免疫分析。作为荧光标记物,应具有高的荧光强度,其发射的荧光与背景荧光有明显区别;它与抗原或抗体的结合不破坏其免疫活性,标记过程要简单、快速;水溶性

荧光免疫分析原理

  荧光免疫检测技术具有专一性强、灵敏度高、实用性好等优点,因此它被用于测量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白质(酶、接受体、抗体)、激素(甾族化合物、甲状腺激素、酞激素)、药物及微生物等  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原

自动化荧光免疫分析系统—荧光偏振免疫分析仪

  荧光偏振免疫分析仪  荧光偏振免疫测定(FPIA)为一种均相荧光免疫测定方法,荧光强度与荧光标志物质在溶液中旋转的速度与分子大小成反比,分子大,转动速度慢,荧光强度大;分子小,转动速度快,荧光强度小。常采用抗原抗体竞争反应原理,适用于小分子半抗原(如药物浓度)的检测。  第四节  自动化酶联免疫

荧光免疫分析的原理

  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原理是基于未标记的抗原(Ag)和标记抗原(Ag-L)竞争结合有限的抗体(Ab)而实现的免疫分析法。检测时,Ab和Ag-L的浓度是固定的。当未标记的Ag加到Ab和Ag-L的免疫混合物中后,Ag

荧光免疫分析的原理

  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原理是基于未标记的抗原(Ag)和标记抗原(Ag-L)竞争结合有限的抗体(Ab)而实现的免疫分析法。检测时,Ab和Ag-L的浓度是固定的。当未标记的Ag加到Ab和Ag-L的免疫混合物中后,Ag

什么是荧光免疫分析

  荧光免疫检测技术具有专一性强、灵敏度高、实用性好等优点,因此它被用于测量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白质(酶、接受体、抗体)、激素(甾族化合物、甲状腺激素、酞激素)、药物及微生物等 。

荧光免疫分析法

  荧光免疫分析法是将免疫学反应的特异性和荧光技术的敏感性结合起来的一种方法。荧光免疫分析在医学的基础研究及临床诊断中占有重要地位,而性能优良的标记探针的开发则是发展这一技术的决定性因素。近年来,半导体荧光纳米晶由于其特殊的物理、化学性质,吸引了人们的广泛关注,并已作为新一代荧光标记物开始被广泛应用

自动化荧光免疫分析系统—时间分辨荧光免疫分析仪

  时间分辨荧光免疫分析仪  (一)原理  属于非均相荧光免疫测定,镧系元素属于三价稀土离子,包括铕(Eu3+),钐(Sm3+),铽(Tb3+),钕(Nd3+)和镝(Dys+)等,它们的荧光寿命较长,尤其是Eu3+和Tb3+的荧光寿命特别长且荧光强。因此,时间分辨荧光免疫测定中多用Eu3+和Tb3+

时间分辨荧光免疫分析分析原理

  在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础

荧光免疫分析器相关

  是一种用于测量含量很低的生物活性化合物的仪器。  免疫荧光技术简介:  是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所

关于荧光免疫分析的简介

  荧光免疫检测技术具有专一性强、灵敏度高、实用性好等优点,因此它被用于测量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白质(酶、接受体、抗体)、激素(甾族化合物、甲状腺激素、酞激素)、药物及微生物等 。

时间分辨荧光免疫分析简述

  时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

荧光免疫分析—悬浮芯片系

  悬浮芯片系采用荧光编码微球结合流式细胞检测技术建立起来的一种多组分同时检测技术,该系统以不同荧光比例的高分子微球作为免疫分析的固相,流式细胞仪可以识别所有这些微球。不同的抗体的标记在特定荧光比例的微球上,和样品中的抗原反应后,再与荧光标记抗体结合,荧光标记抗体上的荧光标记物采用同一种,但与高分子

芯片上的荧光免疫分析

  蛋白质芯片作为生物芯片的一种,已经成为研究蛋白质的重要工具。蛋白芯片的检测原理同免疫检测,也可以称为芯片免疫分析。蛋白芯片大致分为三种类型,第一类是由蛋白质微阵列构成的芯片,第二类是以各种微结构为基础的微流控型芯片,第三类是结合微球编码和流式检测的悬浮芯片。这三种类型中,利用免疫原理并采用荧光检

时间分辨荧光免疫分析应用

  1.激素:甲状腺激素、甾体类激素。  2.病毒性肝炎标志物。  3.肿瘤相关抗原、胃蛋白酶原(PG)医学教|育网搜集整理。  4.药物。  5.多肽类。

荧光偏振免疫分析的作用

荧光偏振免疫分析,是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization

荧光偏振免疫分析的作用

荧光偏振免疫分析,是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization

芯片上的荧光免疫分析

  蛋白质芯片作为生物芯片的一种,已经成为研究蛋白质的重要工具。蛋白芯片的检测原理同免疫检测,也可以称为芯片免疫分析。蛋白芯片大致分为三种类型,第一类是由蛋白质微阵列构成的芯片,第二类是以各种微结构为基础的微流控型芯片,第三类是结合微球编码和流式检测的悬浮芯片。这三种类型中,利用免疫原理并采用荧光检

时间分辨荧光免疫分析的分析原理

共有三个原理如下时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。分析原理在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本

荧光免疫分析微流控免疫芯片改善

  微流控免疫芯片是在20世纪90年代出现的芯片集成毛细管电泳技术基础上发展起来的,随后微流控芯片技术在很多领域得到了迅速发展。这一被称为“芯片上实验室”的微分析系统具有高效性、设计容易、用样量少、可以进行批量分析以及小型化和自动化等特点。尽管这一技术仍处于初步发展阶段,但它已经推动传统的分析化学发

概述芯片上的荧光免疫分析

  蛋白质芯片作为生物芯片的一种,已经成为研究蛋白质的重要工具。蛋白芯片的检测原理同免疫检测,也可以称为芯片免疫分析。蛋白芯片大致分为三种类型,第一类是由蛋白质微阵列构成的芯片,第二类是以各种微结构为基础的微流控型芯片,第三类是结合微球编码和流式检测的悬浮芯片。这三种类型中,利用免疫原理并采用荧光检

荧光免疫分析技术的优缺点

操作简单,现象直观,可视化示踪观察,特异性强。缺点是能应用的范围有限,限制抗体,抗原反应

时间分辨荧光免疫分析增强原理

  解离增强镧系元素荧光免疫分析(DELFIA)是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕(Eu)连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu

荧光免疫分析的原理是什么

  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原理是基于未标记的抗原(Ag)和标记抗原(Ag-L)竞争结合有限的抗体(Ab)而实现的免疫分析法。检测时,Ab和Ag-L的浓度是固定的。当未标记的Ag加到Ab和Ag-L的免疫混合物中后,Ag

时间分辨荧光免疫分析原理(图)

荧光法是一种非常有用的工具,各种各样的分析领域都在利用它。由于它具有高灵敏度、好的选择性以及可提供多参数信息(如,荧光强度、荧光寿命、荧光各向异性)等特点,所以被广泛用于生物制药研究、临床诊断、宇宙空间环境监测、免疫分析中分子间作用原理研究、DNA序列分析、荧光原位杂交以及细胞成分分析等。镧系系复合

时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)

一、前言近百年来,“特效试剂”一直是分析化学家追求的目标。所谓“特效试剂”,就是指的是只与一种待测物质反应的试剂。事实上,目前使用的所谓的“铜试剂”、“铁试剂”、“硝酸试剂”等等,都是“盛名之下,其实难副”的。20世纪40-50年代追求合成特效试剂的狂热,早已降温。正在分析化学家心灰意冷之际,人们从

时间分辨荧光免疫分析信号原理

  普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射

荧光免疫定量分析仪和荧光免疫定量分析仪的区别

可体外定量检测人血清、血浆、全血或尿液中心肌肌钙蛋白 I、N-端脑利钠肽前体、超敏 C反应蛋白、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶、D-二聚体、降钙素原、微量白蛋白的含量,检测结果用于临床辅助诊断。

时间分辨荧光免疫分析法的分析原理

普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性。镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射光谱

荧光染料在免疫分析方面的应用

荧光标记的单克隆抗体技术为流式细胞仪在研究细胞膜和细胞内各种功能性抗原、肿瘤基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记最常用的染料有异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)、藻红蛋白(PE)以及Ale