依赖核酸序列的扩增技术简述
该技术的检测反应有赖于AMV逆转录酶、噬菌体T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、两种特别设计的特异性寡核苷酸引物和分子信标探针共同协作而完成。 NASBA全称是nucleic acid sequence-based amplification，即依赖核酸序列的扩增技术。 依赖核酸序列的扩增技术，是一种扩增RNA的新技术,是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异核苷酸序列等温扩增的酶促反应过程。反应在42℃进行,可以在2h左右将模板RNA扩增约10^9～12倍,不需特殊的仪器。NASBA已经广泛应用于细菌、病毒等多种病原微生物的检测。 该技术是由一对特异的引物介导的、三种酶催化的以单链RNA 为模板的恒温扩增技术，具有操作简单、特异性强、灵敏度高、不易被污染等优点，已广泛应用于病毒、细菌、霉菌、寄生虫和细胞因子等的检测，特别是用于艾滋病病毒、丙肝肝炎病毒等RNA 病毒的检测当中。在动物疫病预防控制方面， NASBA 方法已成为......阅读全文
核酸扩增—多重PCR
多重PCR是在单一PCR基础上改进和发展起来的新技术，是在同一PCR体系中加入多对特异性引物，一次扩增多个DNA片断，实现多个基因序列或多种病原体的同时检出。多重PCR降低了检测成本，减少了工作量，提高了检测效率，并且可以解决淋球菌、衣原体等混合感染者临床症状不明显，检出率低等问题。淋病患者往往
PCR技术（十七）：用PCR扩增cDNA库中的特异序列
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库，然后用抗体或 DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因，但建立和筛 选CDNA库是一项非常耗时．费力的工作，而且用寡聚核苷酸作探针进行筛选需大量蛋 白质序列结构的资料。聚合酶链的反应（PCR）方法可使一种特异DNA扩增
什么是标准核酸序列？
标准核酸序列系指供药品标准中要求的种属源性鉴别或鉴定的核酸序列,其具有确定的碱基排列顺序,是实施核酸检测的基础,用于药品检验、药品质量控制中涉及的动物、植物、微生物以及重组生物制品的种属鉴别或鉴定。
转录依赖的扩增系统的主要特点
TAS的主要特点是扩增效率高，因为其RNA拷贝数呈10的指数方式增加，只需6个循环靶序列的拷贝数就能达到2×106。它的另一个特点是特异性高，由于TAS只能进行6次温度循环，错掺率低，加之用葡聚糖珠夹心杂交，因而特异性也高。虽然本法有较高的特异性和敏感性，但其循环过程复杂，需重复加入逆转录酶和T7R
多国批准尿液样本核酸扩增检测技术上市
沙眼衣原体（CT）和淋球菌（NG）被认为是全球引起生殖道感染性传播疾病的主要病原体，男女均可感染。传统的细胞培养等检测方法存在对样本采集保存条件要求高，检测周期长，敏感性低等不足。近年来多个国际研究显示，在CT和NG的检测中，核酸扩增检测（NAAT）技术具有90%～97%高敏感性和99%～100%的
多国批准尿液样本核酸扩增检测技术上市
沙眼衣原体（ct）和淋球菌（ng）被认为是全球引起生殖道感染性传播疾病的主要病原体，男女均可感染。传统的细胞培养等检测方法存在对样本采集保存条件要求高，检测周期长，敏感性低等不足。 近年来多个国际研究显示，在ct和ng的检测中，核酸扩增检测（naat）技术具有90%～97%高敏感性和99%～1
关于PCR特异扩增ITS序列的简介
这是目前鉴定物种和做分子分类研究的最主流的方法.原理是：ITS序列是中度重复序列，广泛分布于基因组并且是同步进化的，而且不同物种间进化差异很大，它的碱基序列同源性的程度决定生物之间的亲源关系远近，并可以以此来作为分类依据划分物种.另外对于未知物种，可以通过与GENEBANK提供的序列比对来确定该
核酸扩增荧光定量检测
如果怀疑有乙肝的情况，那么需要到医院进行专业的检查，比如做核酸扩增荧光定量检测之类的，当然核酸扩增荧光定量检测还可以测量其他方面的情况，比如测解脲脲原体，接下来我们来了解一下核酸扩增荧光定量检测的相关情况吧。核酸扩增荧光定量检测检查什么核酸方面的检查有核酸扩增荧光定量检测检查，那么核酸扩增荧光定量检
核酸扩增—实时荧光PCR
实时荧光PCR，即在常规PCR扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时，探针结合在DNA任意一条单链上；PCR扩增时，Taq酶的5'-3'端外切
标准核酸序列的使用和维护
标准核酸序列的使用 将按DNA测序技术指导原则测定得到的供试品DNA序列与标准核酸序列进行计算比对，进而结合判定标准进行种属鉴别或鉴定。判定标准的制定应考虑不同物种的变异范围，并在相应通则或品种项下予以明确。核酸序列比对方法一般建议根据样品特点从以下三种方法中选择采用。 1.BLAST法
什么是荧光定量核酸扩增仪？技术指标是？
荧光定量核酸扩增仪是一种用于基础医学、预防医学与公共卫生学、药学、中医学与中药学领域的分析仪器，于2017年12月8日启用。 技术指标 温控模块：采用银质半导体温控模块（半导体元件＋Therma-Base气液平衡层导热技术） 模块设计：所有样本对应的温控模块一体化成型，不由独立的多个小型模块
简述基因扩增技术的基本原理
PCR扩增DNA的原理是：先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链，然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物，即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段，一般需20-30个碱基对，过少则难保持与D
用PCR扩增cDNA库中的特异序列
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库，然后用抗体或 DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因，但建立和筛 选CDNA库是一项非常耗时．费力的工作，而且用寡聚核苷酸作探针进行筛选需大量蛋 白质序列结构的资料。聚合酶链的反应（PCR）方法可使一种特
PCR扩增CDNA库中的特异序列策略
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库，然后用抗体或 DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因，但建立和筛 选CDNA库是一项非常耗时．费力的工作，而且用寡聚核苷酸作探针进行筛选需大量蛋 白质序列结构的资料。聚合酶链的反应（PCR）方法可使一种特异D
核酸扩增引物设计的原则
引物设计的必要条件是与引物互补的靶DNA序列必须是已知的，两引物之间的序列未必清楚，这两段已知序列一般为15～20个碱基，可以用DNA合成仪合成与其对应互补的两条引物。除此之外，引物设计一般遵循的原则包括： 一、引物长度根据统计学计算，长约17个碱基的寡核苷酸序列在人的基因组中可能出现的几率为1
核酸扩增引物设计的要求
1、避免重复碱基，尤其是G。 2、引物退火温度Tm控制在58～60℃。 3、G+C为30%～80%。 4、3'端最后5个碱基内不能有多于2个的G或C。 5、正向引物与探针离得越近越好，但不能重叠。 6、扩增产物长度不能太大，一般在80～250 bp，80～150bp最为合适。
最杰出的等温扩增方法之一——解旋酶依赖性扩增HDA
解旋酶依赖性扩增技术（helicase-dependent amplification，HDA）于2004年发明，是模拟动物体内DNA的复制机制的一种体外恒温基因扩增技术。随着技术的发展，在反应速度、特异性和灵敏度上也不断被提升，至少有三代HAD技术，整个系统比较简单，高效。 系统核心组成：解旋酶，
核酸序列的一般分析流程
核酸序列的一般分析流程1.1 核酸序列的检索http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide 1.2 核酸序列的同源性分析 1.2.1 基于NCBI/Blast软件的核酸序列同源性分析 http://www.nc
遴选标准核酸序列的工作流程
遴选标准核酸序列的工作流程包括：品种的确定、候选品种核酸物质原料的选择、候选标准核酸序列的建立和审核批准。 1.品种的确定 除另有规定外，根据药品标准制修订中拟采用待测物核酸序列进行质量控制的需要，确定需制备的品种。药品标准中采用核酸序列进行鉴定的品种，都应建立标准核酸序列。 2.候选品种
核酸序列分析的一般流程
1.1 核酸序列的检索 http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide 1.2 核酸序列的同源性分析 1.2.1 基于NCBI/Blast软件的核酸序列同源性分析 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/b
核酸序列的一般分析流程
1.1 核酸序列的检索 http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide 1.2 核酸序列的同源性分析 1.2.1 基于NCBI/Blast软件的核酸序列同源性分析 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/b
简述回文序列的释义
如果一个（单链）核苷酸的序列和它的反向互补链的序列一样，那么这个核苷酸序列就是回文序列。回文序列结构不仅在DNA中存在，在RNA中也常因碱基的互补而常出现类似的结构，有利于稳定RNA的结构和行使功能。回文序列也经常出现在组成蛋白质的肽序列中，但它们在蛋白质功能中的作用尚不清楚。 短的回文结构可
简述SD序列的作用
SD序列的作用是与16S rRNA的3'端上一段富含嘧啶的序列结合,小亚基16S rRNA的3'端的这个小片段就被称为反SD序列。当mRNA中的SD序列于16S rRNA上的反SD序列结合后,就指示了下游的AUG,即是蛋白质合成的起始密码子。
DNA和RNA靶序列的原位PCR扩增实验
实验材料 样品试剂、试剂盒 双氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl仪器、耗材 加湿盒热循环仪实验步骤 1. 将载有固定样品的载玻片置105℃加热块上5~120 s。 2. 载玻片放入含0.3%H2O2中，于37℃或室温温育过夜，以灭活内源性过氧化物酶活性，然后以
DNA和RNA靶序列的原位PCR扩增实验
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术，就是在组织细胞里进行PCR反应，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点，是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。实验材料样品试剂、试剂盒双氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl仪
荧光定量核酸扩增仪相关的功能
荧光定量是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。 主要功能： 高灵敏度：可检测单拷贝基因； 动力学范围广：可检测10E0——10E8 拷贝； 高重复性：CV0.3% 高分辨率：轻松区
核酸扩增检测仪临床应用
1．聚合酶链反应 可用于检测由基因点突变、获得启动子、基因易位、重排、扩增等导致的癌基因的异常激活、抑癌基因的失活及检测外源性肿瘤病毒。此外，检测致癌基因的表达水平对选择化疗方案也具有一定的指导意义。 2．聚合酶链反应直接测序 从最直观的核酸序列水平研究癌基因突变，为肿瘤的早期诊断及基因治
核酸扩增—连接酶链反应
LCR由基因扩增技术和连接酶方法结合而成，是继PCR之后的快速DNA扩增方法。与PCR不同的是，LCR采用2对寡核苷酸探针，每对寡核苷酸探针与变性正负靶链杂交时处于相邻的位置，两者之间形成一个缺口，只有当它们与靶DNA碱基配对且3'与5'端相邻位置均正确时，DNA连接酶才能将其连
多酶恒温核酸快速扩增技术MIRPA的引物与探针设计指导
近期,顶级学术期刊连发两篇顶级论文，上半年引爆生物圈的华人科学家张锋教授团队又有新动作!这次,他在一月内,分别在《Nature》、《Science》连发两篇论文!他将CRISPR-Cas13a改造成了灵敏度达到了阿摩尔级(aM,10的负18次方摩尔每升),可以检测单分子的SHERLOCK技术。而这其
多酶恒温核酸快速扩增技术MIRPA的引物与探针设计指导
近期,顶级学术期刊连发两篇顶级论文，上半年引爆生物圈的华人科学家张锋教授团队又有新动作!这次,他在一月内,分别在《Nature》、《Science》连发两篇论文!他将CRISPR-Cas13a改造成了灵敏度达到了阿摩尔级(aM,10的负18次方摩尔每升),可以检测单分子的SHERLOCK技术。而