细胞培养基的几点讨论
培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷......阅读全文
特殊培养基
选择性培养基 选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。 酵母菌富集培养基 葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1
真菌培养基
一、沙保罗琼脂培养基 [用途] 供真菌及酵母样真菌的分离培养用. [配法] 麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g,蒸馏水1L. 将上述成分溶于水,加热溶解,调pH至6.0±0.2,分装三角瓶或试管中,118℃灭菌15min,倾注平板或置斜面,无菌试验后备用.
选择培养基和鉴别培养基的区别
鉴别培养基:利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。选择培养基:在培养基中加入抑制
液体培养基的控制培养基的条件介绍
(1) 控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。各大类微生物要求的适宜生长pH范围不同。如霉菌与酵母菌一般为5.0-6.0, 细菌为6.5-7.5.放线菌为7.5-8.5.培养基的pH与其C/N有极大关系。C/N高的培养基,例如培养各种真菌的培养基,经培养后其pH明显下降;相反
酿酒酵母培养基的制备实验——SC培养基
试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或
衣原体培养基-鸡胚培养基的配制
[用途]培养增殖和分离鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿和沙眼等衣原体。 [配法] 7日龄鸡胚3~5只。 精选产后10天内并10℃左右保存的受精鸡卵孵育,置38~39℃、相对湿度40%~60%的孵卵箱中孵育,4天后用检卵灯检视发育情况,挑出未受精及死亡者。生活鸡胚检视时可见清晰血管小团或花纹,其中有
合成培养基配制实验——无血清培养基的制备
实验材料ECM试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材滤膜实验步骤1. 选择适宜的培养基质(ECM),先制备成贮存干液;2. 使用前,贮存干液用高纯度的蒸馏水稀释成0.1 mg/ml 浓度的使用液;3. 使用液用0.22 μm 孔径的微孔滤膜过滤除菌;4. 用吸管吸取使用液,均匀涂于消毒灭菌的细胞培养器
使用适应性培养基或条件培养基制备
(1)培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。(2)离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。(3)滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2分培养基混合使用。
天然培养基与合成培养基的区别在哪?
天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培
简介烟草培养基愈伤组织诱导培养基制备
以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NA
改良Y培养基
成分 蛋白胨 15.0g 氯化钠 5.0g 乳糖 10.0g 草酸钠 2.0g 去氧胆酸钠 6.0g 三号胆盐 5.0g 丙酮酸钠 2.0g 孟加拉红 40mg
培养基的概述
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。 培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌
培养基的简介
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。 培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌
什么是培养基
采用化学成分未知或不全知的天然有机营养物质配制而成的培养基。常用的天然有机营养物质有马铃薯、小麦、大豆粉、高粱粉、薯类、胡萝卜、米糠、麸皮、各种秸秆、木屑、甘蔗渣、棉籽壳、豆腐渣、酒糟、禽畜粪等。天然培养基营养齐全,取材容易,价格低廉,配制方便,是培养菌种和栽培生产理想的培养基。但是由于同一天然物质
如何选用培养基?
选择培养基没有一定标准,有几点建议可供参考: 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅文献,或在购买细胞株时咨询。本单位惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选1640;进行细胞杂交、基因转移实验,可选择I
如何选用培养基?
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养,各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。
培养基的概念
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分
甘氨酸培养基
成分 布氏(Brucella)肉汤 1000mL 琼脂 1.6g 甘氨酸(glycine)(又称氨基乙酸aminoacetic acid) 10.0g制法 将以上成分混合,加热溶解,校正pH7.0±0.2,分装13mm×100
培养基的鉴别
一、EMB培养基:常用于鉴别E.coli 蛋白胨10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氢二钾2g 伊红Y 0.4g 美蓝0.065g 蒸馏水1000g pH7.2二、2216E培养基配方: 分离海洋微生物的培养基配方 ,蛋白胨 5g 酵母膏1g 磷酸高铁 0.01g 琼脂15~20g 陈海水 1000m
卵黄琼脂培养基
成分 1 基础培养基 肉浸液 1000mL 蛋白胨 15g 氯化钠 5g 琼脂 25~30g pH7.5 2 50%葡萄糖水溶液。 3 50%卵黄盐水悬液。制法 制备基础培养基,分装每瓶100mL。121℃高压灭菌15min
培养基的制备
目的要求 1.掌握一般培养基制备的原则和要求。 2.熟悉一般培养基制备的过程。 操作步骤 一、培养基的制备原则和要求 培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择
培养基的鉴别
一、EMB培养基:常用于鉴别E.coli 蛋白胨10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氢二钾2g 伊红Y 0.4g 美蓝0.065g 蒸馏水1000g pH7.2二、2216E培养基配方: 分离海洋微生物的培养基配方 ,蛋白胨 5g 酵母膏1g 磷酸高铁 0.01g 琼脂15~20g 陈海水 1000m
什么是培养基?
培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
培养基配制方法
配制培养基有两种方法可以选择:一是购买培养基中所有化学药品,按照需要自己配制;二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂,如MS、B5等。
外周血培养基配制
一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HC
庖肉培养基
成分 牛肉浸液 1000mL 蛋白胨 30g 酵母膏 5g 磷酸二氢钠 5g 葡萄糖 3g 可溶性淀粉 2g 碎肉渣适量 pH7.8制法 1 称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g,加蒸馏水1000mL和1mo
培养基如何配制
1.牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,氯化钠0.5g,琼脂 1.5g,水 100ml在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调
培养基优化定义
培养基优化,是指面对特定的微生物,通过实验手段配比和筛选找到一种最适合其生长及发酵的培养基,在原来的基础上提高发酵产物的产量,以期达到生产最大发酵产物的目的。发酵培养基的优化在微生物产业化生产中举足轻重,是从实验室到工业生产的必要环节。能否设计出一个好的发酵培养基,是一个发酵产品工业化成功中非常
大米粉培养基
制法 将不含荧光物质的籼米挑去杂质和变质米粒,磨成粗粉,分装后121℃高压灭菌20min。用途 霉菌产毒用。
察氏培养基
成分 硝酸钠 3g 磷酸氢二钾 1g 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.5g 氯化钾 0.5g 硫酸亚铁 0.01g 蔗糖 30g 琼脂 20g