培养基的概述

培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。 培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。......阅读全文

培养基的概述

  培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。  培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌

液体培养基的概述

  培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。  液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养

无血清培养基的概述

  无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。  无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分。 用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘

关于高层培养基的概述

  固体培养基solid culture medium 的一种形式;制作时应趁热定量分装在试管内,直立凝固而制成的称为高层培养基,  高层培养基:这样接入菌种后虽然发育的面小了一点,但培养基的厚度增大,营养丰富,时间长些也不容易干燥、开裂。常用于保存菌种。  与高层培养基相对和并列的概念是:斜面培养

细胞培养基本技术概述(一)

无菌操作基本技术  1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或

细胞培养基本技术概述(二)

培养基  1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱,避免光照,实验进行前放在37 oC 水槽中温热。 2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月,期间glutamine 可能会分解,若细胞生长不佳,可以再添加适量glutamine。  3. 粉末培养基配制(以1 升为例):  3.1. 细胞培

细胞培养基本技术概述(四)

细胞传代培养  1. 细胞生长至高密度时,即须分殖至新的培养瓶中,一般稀释比例为1:3 至1:6,依细胞种类而异。  2. 材料:  2.1. 无菌磷酸生理缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL

细胞培养基本技术概述(三)

血清  1. 血清必须贮存于–20 ~ -70 oC,若存放于4 oC,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10 %,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。  2. 一般厂商提供之血清为无菌,不需再

细胞培养基本技术概述(七)

冷冻细胞活化 1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒温水槽 3.2 新鲜培养基 3.3 无菌吸管/

细胞培养基本技术概述(六)

抗生素 1. 细胞库之细胞培养基不加抗生素 1.1. 培养自ATCC 引进之细胞株,培养基中不加抗生素。 1.2. 培养自其它实验室引进之细胞株,制作token freeze 前培养基须添加抗生素,待token freeze 通过污染测试后,大量培养时则不加抗生素。 2. 寄送活细胞时,须将培养液充

细胞培养基本技术概述(五)

实验用品 1. 种类︰ 1.1. 细胞培养实验用品均为无菌,除了玻璃容器与pasteur pipet 外,其它均为塑料无菌 制品。 1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附,培养容器种类有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等,依

概述无血清培养基的使用方法

  血清仍是动物细胞培养中最基本的的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液。细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞

液体培养基的控制培养基的条件介绍

  (1) 控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。各大类微生物要求的适宜生长pH范围不同。如霉菌与酵母菌一般为5.0-6.0, 细菌为6.5-7.5.放线菌为7.5-8.5.培养基的pH与其C/N有极大关系。C/N高的培养基,例如培养各种真菌的培养基,经培养后其pH明显下降;相反

关于固体培养基的形式—制作斜面培养基和平板培养基的介绍

  培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。  (1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。  (2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台

关于固体培养基的形式—快速制作斜面培养基和平板培养基的介绍

  有一种简捷快速制备斜面培养基的方法,现介绍如下:  制作培养基斜面,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。  1、将胶合板截成长18厘米(与试管长度相等或略短)、宽9厘米(比并排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。  

lb培养基是什么培养基?

培养基(Medium)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。那么LB培养基是什么培养基?LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。LB

液体培养基—石蕊牛乳培养基

[用途]观察细菌对牛乳的凝固及发酵作用。[配法]新鲜脱脂牛乳1L,20g/L石蕊水溶液10ml(16g/L溴甲酚紫乙醇溶液 1ml)(pH6.8)。将新鲜牛乳隔水煮沸30min,冷却后置4℃冰箱内过夜。用吸管吸出下层乳汁,注入另一烧瓶内,弃去上层乳脂。加入石蕊溶液,分装试管,灭菌113℃15min(

酿酒酵母培养基的制备实验——SC培养基

试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或

选择培养基和鉴别培养基的区别

鉴别培养基:利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。选择培养基:在培养基中加入抑制

关于固体培养基形式—平板培养基的简介

  培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。  平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定

衣原体培养基-鸡胚培养基的配制

[用途]培养增殖和分离鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿和沙眼等衣原体。 [配法] 7日龄鸡胚3~5只。 精选产后10天内并10℃左右保存的受精鸡卵孵育,置38~39℃、相对湿度40%~60%的孵卵箱中孵育,4天后用检卵灯检视发育情况,挑出未受精及死亡者。生活鸡胚检视时可见清晰血管小团或花纹,其中有

细菌在固体培养基、液体培养基和半固体培养基上的生...

细菌在固体培养基、液体培养基和半固体培养基上的生长特性 1.固体培养基 标本或液体培养物划线接种到固体培养基表面后,单个细菌经分裂繁殖可形成一个肉眼可见的细菌集团,称为菌落(colony)。 (1)菌落的形态特征: 大小、形状(露滴状、圆形、菜花样、不规则等)、突起或扁平、凹陷、边缘

146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基](四)

70、MG/L 蛋白胨 5.0g 甘露醇 5.0g 谷氨酸钠 1.15g 生物素 0.0001g K2HPO4 0.25g NaCl 0.1g MgSO4.7H2O 0.1g 酵母膏 2.5g 琼脂 20.0g 蒸馏水 1000ml 氯霉素(终浓度) 50μg/ml pH 7.071、Eclb Br

45种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)-(一)

THE COMPOSITION OF MEDIA     培养基及成分     1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)     Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g     CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g    

45种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)-(二)

  10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂)     Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g     Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g     Distilled water (蒸馏水) 1000ml  11. Glu

146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基](五)

97、 固氮螺菌培养基 (ATCC 838) K2HPO4 0.1g KH2PO4 0.4g MgSO4.7H2O 0.2g NaCl 0.1g CaCl2 0.02g FeCl3 0.01g NaMoO4.2H2O 0.002g 苹果酸钠(Na malate) 5.0g 酵母膏 0.05g 蒸馏水

45种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)-(三)

19. Filter Paper Medium (滤纸培养基)   (NH4)2SO4 1g KH2PO4 1g   MgSO4.7H2O  0.7g NaCl 0.5g   Distilled water (蒸馏水) 1000ml A strip of filter paper (滤纸条) 6ⅹ1

146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基](二)

22、Pine Block or Pine Sowdust Medium (松木条或松木屑培养基)(1)、Cut 1021 cm pine biocks and immerse them in 1-2% sucrose solution . Alow the biocks fully abs

45种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)-(四)

28. Yeast Extract Peptone (酵母膏、蛋白胨琼脂)   Yeast extract (酵母膏) 1g Multi-peptone(多蛋白胨) 2g   Beef extract (牛肉膏) 1g Glucose (葡萄糖) 10g   Agar (琼脂) 20g Distil

146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基](六)

121、营养肉汤和葡萄糖培养基 (AS 100) 牛肉膏 10.0g 蛋白胨 10.0g 葡萄糖 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 15.0-20.0g 蒸馏水 1000ml pH 7.0122、(Trypticase Soya Agar) 胰蛋白胨 17.0g 大豆胨 3.0g 葡萄糖 2.5