C18反相液相色谱柱的特点和操作步骤

C18反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成,被广泛用于多个领域中。在c18反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。C18反相液相色谱柱特点:1.超纯硅胶确保了出色的分离效果和的重现性。2.完全封端处理,消取了硅醇基残留的影响。3.碳含量适中,载量大,适合于各种有机物质的分析以及制备放大。4.独特的键合技术,保证了色谱柱高稳定性和长寿命。5.每根色谱柱单独检验,确保了产品质量。6.普遍应用于化药、中药、环境和食品安全检测领域。C18反相液相色谱柱操作步骤:a.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间......阅读全文

液相色谱柱堵塞判断

  1、色谱柱“堵”的表现  “堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。  2、色谱柱“堵”的原因分析  原因1:配制流动相时细菌污染  首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接

如何选择液相色谱柱

由于篇幅的原因色谱柱相关能查阅到的基础理论本文就不予介绍,本文阐述的内容主要是本人在分析实际工作中选择液相色谱柱的心得体会,个人之见,难免偏颇,如有不足,敬请指正。一、色谱柱参数及其意义选择色谱柱时应考虑不同色谱柱参数的影响,以下内容对色谱柱的参数进行分析。1、色谱柱尺寸较长的色谱柱组分保留较强,运

液相色谱柱怎么换

先用95%乙腈+5%水冲洗旧柱子(冲去柱子中残留的缓冲盐和之前难以洗脱的组分),关掉流速,待流速降至0后,把柱子两边的PEAK头拧下来,用配套的塞子将换下的柱子两头堵上,密封保存更换新的色谱柱时,应先将需换上的柱子两边的塞子旋开。确定好柱子标示的方向后,先接柱子入口端,并使柱子出口端略高于入口端,这

液相色谱柱的保养

液相色谱柱的保养:色谱柱在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。

液相色谱柱的再生

  因为,色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说是柱效的下降。  1.反向柱的再生:  依次采用20~30倍的色谱柱体积的甲醇:水=10:90(V/V),乙腈,异丙醇作为流动相冲洗色谱柱,完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。  2.正相柱的再生

液相色谱柱压升高

造成柱压升高的原因很多。一般是由于柱床内产生了异常的占位性物体,造成流体阻力加大所引起的。例如,缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内,或样品污染沉积。针对第一种情况,处理时应先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲

液相色谱柱的保存

1.反相色谱柱每天实验后的保养: 使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。2.长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于

液相色谱柱的填装

   液相色谱柱、特别是高效液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是,只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。当然,目前大多数实验室多是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。但是在一些有特殊需要的情况

液相色谱柱的保存

  1.反相色谱柱每天实验后的保养:    使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。   2.长期保存色谱柱:   如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的

液相色谱柱选择方法

一、液相色谱柱选择方法|液相色谱柱选择的简单思路   1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操纵本钱等等。   2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。   3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。   

液相色谱柱的选择

1.HPLC色谱分离模式的选择在建立化合物的HPLC方法时,可以首先根据化合物的分子量大小,极性大小及PKa,选择合适的分离模式,在适当的分离模式下去再去优化同类的色谱柱及流动相。化合物分子量2000Da的分离模式2.反相键合相色谱柱性能影响因素对于大部分小分子化合物来说都可以选择键合相的反相色谱,

液相色谱柱色谱柱,预柱和保护柱是什么?

液相色谱柱色谱柱,预柱和保护柱是什么?预柱和保护柱是不一样的。保护柱位置在柱前进样阀后主要是做样是过滤一下样品的污染物。预柱的位置是在泵后,主要做样是饱和流动相和过滤流动相的做样,现在很少使用预柱。保护柱的损坏有几个方面一、造成样品峰型变坏,这基本是冲洗不好的。二、造成柱效下降,一般造成下降30%,

液相色谱柱色谱柱,预柱和保护柱是什么

预柱和保护柱是不一样的。保护柱位置在柱前进样阀后主要是做样是过滤一下样品的污染物。预柱的位置是在泵后,主要做样是饱和流动相和过滤流动相的做样,现在很少使用预柱。保护柱的损坏有几个方面一、造成样品峰型变坏,这基本是冲洗不好的。二、造成柱效下降,一般造成下降30%,保护柱就可以报废了。至于色谱柱的冲洗,

液相色谱柱色谱柱,预柱和保护柱是什么

预柱和保护柱是不一样的。保护柱位置在柱前进样阀后主要是做样是过滤一下样品的污染物。预柱的位置是在泵后,主要做样是饱和流动相和过滤流动相的做样,现在很少使用预柱。保护柱的损坏有几个方面一、造成样品峰型变坏,这基本是冲洗不好的。二、造成柱效下降,一般造成下降30%,保护柱就可以报废了。至于色谱柱的冲洗,

反相液相色谱与正相液相色谱分析时,出锋顺序如何

常见物质官能团的极性顺序:烷基〈卤素〈(F〈 Cl〈 Br〈 I )〈醚〈硝基〈睛〈叔胺〈酯〈酮〈醛〈醇〈酚〈伯胺〈酰胺〈羧酸〈磺酸。在反相液相色谱法中,物质极性强的先出峰,极性弱的后出峰,在正相色谱中相反,物质极性强的后出峰,极性弱的先出峰。

液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。    在检测

液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水-冲柱子吗

C18柱子不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,

C18液相色谱柱使用过程中的注意事项

C18柱 是一种常用的反相色谱柱,它以十八烷基硅烷键合硅胶为填料,因此有较高的碳含量和更好的疏水性,对各种类型的生物大分子有更强的适应能力,适用范围较广,是液相色谱仪 分析中的色谱柱类型。  在使用液相色谱C18仪柱过程中,须注意以下事项  1、新C18柱在使用前,须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积

色谱柱在液相色谱中发挥重要作用

  色谱柱采用反相流动相体系,而按照正相顺序出峰。通过亲水性相互作用,可有效的分离反相色谱柱中因保留能力弱而难分离的强极性化合物。是一种分离机理,而具备这种分离机理的键合相种类非常多。   色谱柱是高效液相分离系统的中重要的环节,业内常把色谱柱比喻为液相色谱的心脏。液相色谱柱根据极性分为正相柱和反相

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:满足不同的分离要求。由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形良好:满足定量精度、灵敏度和分离度要求。

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

  反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:        满足不同的分离要求。        由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形

C18色谱柱及琛航C18色谱柱选柱技巧

液相色谱中使用C18柱的反相色谱法以生物体相关物质为分析对象,能够满足主要研究领域的需要,使用钗惴骸U饫锝允谐∩掀放品倍嗟?lt;/SPAN>C18柱和本公司的C18柱作下简单介绍,以及选柱的一些小技巧。如下图所示,这是C18柱总体的键合思路。将具有烷基链的硅烷化剂与硅胶表面的硅醇基反应,因为使

高效液相色谱柱的分类与应用特点(一)

高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱 以C18为代表的高效反相液相色谱柱一直被描述为药物发现、开发、方法验证(validation)的心脏! 高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全

反相色谱柱的平衡方法

聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的碱性pH下仍然可以使用。  

反相色谱柱的影响因素

  液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料

反相色谱柱的平衡方法

反相色谱柱的平衡方法    聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的

如何减小高效液相色谱中色谱柱柱污染

增加预柱(保护柱)。改善样品前处理。如果使用过于频繁,应该多冲洗。

液相色谱色谱柱柱压突然升高的原因

 液相色谱仪的色谱柱压过高是zui常碰到的问题,其原因有多方面,并且有时不是色谱柱本身的问题。当遇到色谱柱压突然增高时,可按以下步骤检查:    1 拆去保护柱,看柱压是否还高,若柱压仍高,再检查。    2 把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,若不降则是管路堵塞,需清洗;若压力下降,再检查。 

提高液相色谱柱柱效的方法

  要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。  (1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。  (2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。  (3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。  (4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。  (5

制备型液相色谱柱测柱效

一:液相色谱进样量不可能1mL的,都有个定量环,定量环多大体积,就有多少体积进入系统,你注入再多,它也是先进到定量环,再由定量环进到系统。你平时注1mL不是真正的进样量,你的定量环体积才是真正的进样量。二:分析纯没有色谱纯级别高,它里面的杂志和细微颗粒都高于色谱纯,而杂志和细微颗粒有可能会降低色谱柱