常用培养基的制备、灭菌与消毒
一、实验目的 了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生......阅读全文
影响消毒灭菌效果的因素
影响消毒灭菌效果的因素是检验主管技师考试辅导的部分内容，以下是医学教育网对这块内容的整理，希望对考生有所帮助： 1.消毒剂的性质、浓度和作用时间。一般浓度越高杀菌作用越强，时间越长，消毒效果越好。 2.微生物的种类和数量。 3.温度和酸碱度：升高温度可提高消毒剂的效果。pH对消毒的效果影响
移液器如何彻底消毒灭菌？
1. 消毒剂擦拭后，再在生物安全柜内紫外照射10-15 min。2. 121°C，15 min，高温高压灭菌（有些品牌的移液器可以整支灭菌，但考虑到灭菌的后续校准问题，以及移液器上半部分可耐受的灭菌循环次数，瑞宁XLS+ 和PL+系列的移液器为下半支可灭菌）。常规移液器上的DNA、RNA等干扰PCR
常用试剂的性质与制备纯化
常用试剂的性质与制备纯化有机化学实验经常用到大量的试剂，包括无机试剂和有机试剂，市售的试剂有分析纯（A.R）、化学纯（C.P）、工业级（T.P）等级别，其中分析纯的纯度较高，工业级则带有较多的杂质。在某些有机反应中，对试剂或溶剂的要求较高，即使微量的杂质或水分的存在，也会对反应的速率、产率和产品纯度
培养基灭菌前、后的不同要求与规则
大家都知道，培养基是一定需要灭菌的，在购置回来之前就开始查看了不少相关的储存、要求等等。但是还是有很多实验新手不知道培养基在灭菌前、后它的要求和规则是不同的，今天，上海劲马就为大家讲解培养基灭菌前、后的不同要求和规则： 1、商品化的应根据使用说明书上的要求进行储存。标
培养基的湿热灭菌
灭菌原理培养基在制备后的24h内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸气不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。注意完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，
培养基的灭菌流程
原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定
实验室灭菌技术化学消毒灭菌法
利用化学药物渗透细菌的体内,使菌体蛋白凝固变性,干忧细菌酶的活性,抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构,改变其渗透性,破坏其生理功能等,从而起到消毒灭菌作用。所用的药物称化学消毒剂。有的药物杀灭微生物的能力较强,可以达到灭菌,又称为灭菌剂。凡不适于物理消毒灭菌而耐潮湿的物品,如锐利的金属、刀、剪、缝
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则
培养基灭菌方法
1.灼烧灭菌将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌。此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。2.干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在160～170℃加热1～2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要
细胞培养室的灭菌与消毒了解一下！
1、甲醛熏蒸甲醛是一种高效能化学灭菌剂。不易燃、不爆炸、不腐蚀金属。它能与蛋白质中的氨基酸结合而使蛋白变性，使酶的活性消失。故有强大的杀菌作用。一般称作为“大消”，用来对细胞间进行彻底的消毒杀菌。但是甲醛是一种对人体有害的物质，并且细胞培养实验室一般空气流通都很差，甲醛的排出也很慢，至少要一周以上。
高压蒸汽灭菌器是消毒灭菌的最佳选择
1.消毒物品的初步处理 所有医疗器械、床单、衣服等。接触过病原微生物的，应当先用化学消毒剂消毒，然后再照常清洗。特别是传染病房使用的各种物品要严格控制，严格消毒后再进行清洗消毒。日常清洁时，用洗涤剂浸泡擦洗，去除物品上的油渍、血渍等污垢，然后用自来水冲洗。带有轴接头、齿槽和间隙的仪器和其他物
培养箱消毒灭菌的方法
HEPA过滤器由于受到过滤膜孔径的影响，无法去除病毒和一些微小细菌，也有其局限性；相比较而言，高温消毒是目前比较有效消毒灭菌的方法，高温消毒又分为两类，一是传统的高温干热消毒，另一种是先进的高温湿热灭菌。
移液器的消毒和灭菌方法介绍
对于移液器而言，移液器的消毒和灭菌这两个概念经常被大家混为一谈。而事实上，两者是有一定区别的：消毒只是要求使移液器上的活菌控制在一定范围内，达到无害化水平即可；而灭菌则更严格些，要求消灭所有活菌。因此，灭菌的处理要求要高于消毒。 一、移液器消毒：1、化学消毒。简单说来，就是用酒精等擦拭移液器的外表面
移液器是如何灭菌和消毒的
分子生物技术的基础工具移液器的使用中，消毒与灭菌的概念常常是被混用的。两者差别在于：消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内，达到无害化水平，而灭菌则要求消灭所有活菌。灭菌的处理要求高于消毒。 1.化学消毒。简单说来，就是用酒精等擦拭移液器的外表面，然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都
灭菌和消毒的基本知识
一、物理方法 1、温度 利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。 1）干热灭菌法： a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以
移液器是如何灭菌和消毒的
在分子生物技术的基础工具移液器的使用中，消毒与灭菌的概念常常是被混用的。两者差别在于：消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内，达到无害化水平，而灭菌则要求消灭所有活菌。灭菌的处理要求高于消毒。 1．化学消毒。简单说来，就是用酒精等擦拭移液器的外表面，然后晾干即可。这对于所有移液器品
灭菌和消毒的基本方法介绍
一、物理方法 1、温度 利用温度进行灭菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活,从而起灭菌作用,低温通常起抑菌作用。 1)干热灭菌法: a.灼烧灭菌法:利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠,灭菌迅速,但易焚毁物品,所以使用范围有限,只
常用的灭菌方法介绍
常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类：即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料
影响消毒灭菌效果因素
1.消毒剂的性质、浓度和作用时间。一般浓度越高杀菌作用越强，时间越长，消毒效果越好。2.微生物的种类和数量。3.温度和酸碱度：升高温度可提高消毒剂的效果。pH对消毒的效果影响很大，各种不同消毒剂所需最适pH与消毒剂性质有关。4.环境中的有机物及拮抗物质：物体表面或环境中的有机物与化学消毒剂的活性基团
戊二醛消毒灭菌时间
用戊二醛消毒需要浸泡10个小时以上，这样才能达到消毒灭菌的效果。戊二醛不需要频繁使用，每周使用一次就可以，戊二醛消毒有刺激性，会给眼睛以及喉咙带来危害性，在使用过程中，记得戴上口罩和眼镜。在使用戊二醛杀毒的过程中，只有浸泡这一种方法，戊二醛的用量不需要太多，倒入2%的戊二醛即可，然后将需要杀菌的物品
如何为移液器消毒和灭菌？
移液器的消毒和灭菌，两者是有必定区别的：消毒只是要求使移液器上的活菌控制在必定范围内，到达无害化水平即可；而灭菌则更严格些，要求消除一切活菌。因此，灭菌的处理要求要高于消毒。一、移液器消毒1、化学消毒。用酒精等擦拭移液器的外表，然后吹干即可。2、紫外线消毒。用紫外线照射移液器的外表，通过损坏细胞的D
移液器是如何灭菌和消毒？
在分子生物技术的基础工具移液器的使用中，消毒与灭菌的概念常常是被混用的。两者差别在于：消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内，达到无害化水平，而灭菌则要求消灭所有活菌。灭菌的处理要求高于消毒。 1、化学消毒。 简单说来，就是用酒精等擦拭移液器的外表面，然后晾干即可。这对于所有移液
实验室消毒灭菌技术
严格的消毒灭菌对细胞与胚胎工程研究与应用工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。(一)消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法（消毒剂、抗生素）两大类。1．干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120 ºC～150 ºC的高热，并保
实验常用试剂的制备与储藏（一）
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（amm
实验常用试剂的制备与储藏（三）
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 电泳缓冲液 50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液 5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液 染料 1％溴酚蓝（bromophenol blue） 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1％二甲苯青FF（xylene
实验常用试剂的制备与储藏（四）
三.常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 用水补足体积到1L。分成100
实验常用试剂的制备与储藏（二）
100×Denhardt试剂（Denhardt's regent） 依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。 10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） 将配制好的缓冲
常用试剂的性质与制备纯化（三）
17．高碘酸商品的高碘酸一般有95%和50%两种规格。高碘酸可对相邻碳原子上有两个羟基或一个羟基和一个氨基的化合物进行选择性氧化。即：C－C键断裂。RCH（OH）CH（OH）R'+ HIO4 → RCHO + R'CHO + HIO3 + H2ORCH（OH）CH（NH2）R'
常用试剂的性质与制备纯化（四）
21．钾在处理钾时必须非常小心，要在装有石油醚的研钵中切金属钾，不要用易碎的烧杯或培养皿。切开外面的氧化层，然后用镊子将碎屑放入另一装有石油醚的研钵中。用镊子将刚切的钾夹到滤纸上，快速吸干，然后加到已知质量的装有石油醚的烧杯中，称量。将称量后的钾加到反应物中。钾碎屑不应久置，应立即分解掉，可将装有钾