常用培养基的制备、灭菌与消毒

一、实验目的 了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生......阅读全文

常用试剂的性质与制备纯化(二)

9.N,N-二甲基甲酰胺(DMF)  沸点149~156℃,密度d=0.9487,折光率n 20D =1. 4305,无色液体,能与多数有机溶剂和水互溶,是优良的有机溶剂。市售的DMF含有少量水、胺和甲醛等杂质。在常压蒸馏时有些分解,产生二甲胺与一氧化碳,若有酸或碱存在时,分解加快,在加入固体氢氧化

培养基与培养皿实验前后的灭菌方法

  培养皿灭菌方法有干热灭菌和湿热灭菌,干热灭菌方法:包在铁质容器内,进行高温烘烤.湿热用牛皮纸包起来放在高压锅中进行高压灭菌.  培养基灭菌方法有湿热灭菌、煮沸灭菌和过滤除菌,煮沸灭菌在电磁炉或者微波炉内进行煮沸即可,过滤除菌适用于不能高温处理的培养.

消毒灭菌最优选择——高压蒸汽灭菌器

  消毒灭菌最优选择——高压蒸汽灭菌器  1. 消毒物品的初步处理  凡接触过病原微生物的医疗器械、被单、衣物等均应先用化学消毒剂进行消毒,然后按常规清洗。特别是传染病房用后的各类物品要严格把关,先严密消毒后,再清洗、消毒。常规清洗时,先用洗涤剂溶液浸泡擦洗,去除物品上的油污、血垢等污物,然后用流水

灭菌锅培养基灭菌不彻底的原因分析

培养基灭菌不彻底的原因判断(1)如果发生污染的菌种是耐热菌,说明灭菌时因灭菌强度不够而导致发生污染, 如果是接种操作、菌袋破损或封口问题,则应该是耐热和不耐热菌均有。(2)如果发生污染的时间较早,通常是培养基灭菌不彻底或接种所带来的污染。

关于培养基的灭菌处理

  要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使

常用培养基

LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1

血清培养基如何灭菌

1、未加血清的培养基叫做"基础培养基",先把基础培养基灭菌,凉至45-50度(可以放在水浴锅内,温度可以按培养基的说明掌握),备用。2、你所加的血清要保证是无菌的,如果你是直接购买成品血清那一般不会有问题,如果是自己找来的血清需要滤过除菌,或者采血及分离血清全程严格的无菌操作,不过这些操作都太麻烦了

培养基灭菌技术应用

培养基灭菌技术应用1、种子罐、发酵罐、计量罐、补料罐等的空罐灭菌及管道灭菌从有关管道通入蒸汽,使罐内蒸汽压力达0.147 MPa,维持45 min,灭菌过程中,羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒从所有液位以上的阀门、边阀排出空气,并使蒸汽通过这些阀门以防止出现死角。灭菌完毕后,关闭蒸汽,待罐内

培养基制备方法与注意事项

1、培养基配方选择同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2、培养基制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pH

常用的灭菌方法的原理

(1)加热灭菌法利用高温来杀死微生物(超过最高生长温度)的方法。加热灭菌的原理:当高温作用于微生物时,首先引起细胞内生理生化反应速率加快,机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等,随着温度的增高而遭受不可逆的破坏,尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏,从而使细胞失去了生活机能上的协调,停止了生长

常用的灭菌方法的原理

(1)加热灭菌法利用高温来杀死微生物(超过最高生长温度)的方法。加热灭菌的原理:当高温作用于微生物时,首先引起细胞内生理生化反应速率加快,机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等,随着温度的增高而遭受不可逆的破坏,尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏,从而使细胞失去了生活机能上的协调,停止了生长

常用消毒剂的分类

一、通过与菌体的蛋白质结合,使蛋白质变性、沉淀而达到抑菌或杀菌作用的有:来苏尔、乙醇、福尔马林、红汞、苯酚等。1.来苏尔,即煤酚皂溶液(含煤酚47%~53%,其余是肥皂和水;煤酚是邻、间、对甲酚的混合物)。将来苏尔用水稀释成5%~10%的水溶液,用作病人用具、排泄物及环境消毒。2.乙醇,俗称酒精。主

培养基的制备

目的要求  1.掌握一般培养基制备的原则和要求。  2.熟悉一般培养基制备的过程。  操作步骤  一、培养基的制备原则和要求  培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择

分析移液器是如何灭菌和消毒的

  分子生物技术的基础工具移液器的使用中,消毒与灭菌的概念常常是被混用的。两者差别在于:消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内,达到无害化水平,而灭菌则要求消灭所有活菌。灭菌的处理要求高于消毒。1.化学消毒。简单说来,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都应该是

分析移液器是如何灭菌和消毒的

     分子生物技术的基础工具移液器的使用中,消毒与灭菌的概念常常是被混用的。两者差别在于:消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内,达到无害化水平,而灭菌则要求消灭所有活菌。灭菌的处理要求高于消毒。1.化学消毒。简单说来,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都

菌种保存和微生物常识

菌种保存和微生物常识1、常用培养基的制备、灭菌与消毒 营养:从外部环境摄取其生命活动所必需的能量和物质,满足生长和繁殖需要的一种生理过程。是生命活动的物质基础,是生命活动的起点。 营养物:具有营养功能的物质。也包括光能。提供生物的结构物质、能量、代谢调节物质和良好的生理环境。 营养要素:碳源、氮源、

菌种保存和微生物常识

菌种保存和微生物常识1、常用培养基的制备、灭菌与消毒 营养:从外部环境摄取其生命活动所必需的能量和物质,满足生长和繁殖需要的一种生理过程。是生命活动的物质基础,是生命活动的起点。 营养物:具有营养功能的物质。也包括光能。提供生物的结构物质、能量、代谢调节物质和良好的生理环境。 营养要素:碳源、氮源、

溴化物——常用消毒剂

溴一般单独使用或与其它化合物混合使用,常用于水处理,很少作为加工设备和工具的杀菌剂。在弱酸性至中性pH环境下,有机氯化物破坏芽孢(如蜡状芽孢杆菌)的效果优于溴化物。但是,氯与溴的混合物受碱性pH(pH≥7.5)的影响较小,因此,将溴添加到氯化物溶液中可以协同提高溴和氯的杀菌效果。

臭氧——常用消毒剂

 臭氧分子是由三个氧原子组成的,在自然界中存在于地球大气层顶部。它作为氧化剂和杀菌剂,可用于控制微生物和化学毒物。臭氧常见的副产物是酸、醛和酮。  臭氧可作为卤素的替代物。与二氧化氯一样,臭氧也不稳定,需要在使用现场制备。因其氧化作用迅速,所以对环境的影响较小。

酿酒酵母培养基的制备实验——YPAD培养基的制备

试剂、试剂盒酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g,蛋白胨 12.0 g,葡萄糖 12.0 g,偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg,琼脂 10.0 g,加水到 6

培养基处理消毒的详细方法

培养基的种类繁多,市场中的商品更是参差不齐,价格不一。而在产品的使用中,灭菌消毒是一个重要步骤,而方法更是多种多样,那么给培养基处理消毒的详细方法您会操作吗?1.通常采用高压湿热灭菌法121℃灭菌15分钟,特殊培养基按使用者的特殊要求进行灭菌。2.部分培养基,只能煮沸灭菌。3.对热敏感的培养基或添加

灭菌常用的方法有哪些?

灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。可根据不同的需求,采用不同的方法,如培养基灭菌一般采用湿热灭菌,空气则采用过滤除菌。热灭菌法热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。干热灭菌火焰灼烧法或烘箱内

几种常用的灭菌方法汇总

物理灭菌法(一)加热灭菌法加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸,导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时,有水分存在,蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿,湿热的穿透力比干热大。干热灭菌法  常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法

实验常用试剂的几种制备与储藏方法

一.常用贮液与溶液    1mol/L亚精胺(Spermidine):溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。    1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。    10mol/L乙酸

移液器如何进行消毒灭菌处理?

移液器虽小,但是作为实验室常规仪器之一,对我们的实验结果的准确性和精确性还是起着不小的作用,因此为了提高我们的实验效果,莱贝在本文要说说移液器的消毒灭菌处理。对于移液器而言,移液器的消毒和灭菌这两个概念经常被大家混为一谈。而事实上,两者是有一定区别的:消毒只是要求使移液器上的活菌控制在一定范围内,达

细胞培养箱消毒灭菌

 细胞培养箱是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备,细胞培养箱广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养,常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精(IVF)、干细胞、组织工程、药物筛选等

微生物培养基配置与灭菌方法及步骤

微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一

微生物培养基配制与灭菌方法及步骤

 微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、

微生物培养基配制与灭菌方法及步骤

微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一

培养基的制备与微生物接种技术

培养基的制备 一、实验目的 1、了解人工培养基的主要成分及一般制备原则。 2、掌握基础培养基的制造方法和过程。 二、实验原理 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖的营养基质。培养基要具备以下条件:①要有适宜的营养物质和水分;②具有适宜的PH值;③配制后应经灭菌呈无菌状态。 培养基按物理状态可分液体培