浅谈实验室细菌菌种的保存
在微生物学、环境科学、分子生物学、毒理学、酶学、疫苗制备、药品生产等等领域的实验过程中,都需要应用各种细菌,储备标准菌种、参考菌种、特殊菌种是必不可少的,下面就几种实验室菌株的保存方法简述如下。 1 斜面低温保存法 将分纯的待存菌接种于适宜的固体斜面培养基上,得到充分生长后,用封口膜封口,贴上标签,保存于4℃的冰箱中。此法操作简单、使用方便、不需要特殊设备,是实验室菌种保存最常用的方法。但保存时间短,一般每个月都要移种1次,而且菌种容易变异,所以此方法只适合实验室短期实验菌株的保存。 2 半固体琼脂法 用接种针将以分纯的待存菌,穿刺接种于半固体中,放入培养箱培养后取出,封上无菌的液体石蜡,贴上标签,放4℃冰箱保存。此方法简便易操作,不需特殊设备、技术难度不大,但保存的......阅读全文
浅谈实验室细菌菌种的保存
在微生物学、环境科学、分子生物学、毒理学、酶学、疫苗制备、药品生产等等领域的实验过程中,都需要应用各种细菌,储备标准菌种、参考菌种、特殊菌种是必不可少的,下面就几种实验室菌株的保存方法简述如下。 1 斜面低温保存法 将分纯的待存菌接种于适宜的固体斜面培养基上,得到充分生长后
浅谈实验室细菌菌种的保存
作者:张晓雷, 董小青, 王丹敏 作者单位:300162 天津,武警医学院微生物教研室 在微生物学、环境科学、分子生物学、毒理学、酶学、疫苗制备、药品生产等等领域的实验过程中,都需要应用各种细菌,储备标准菌种、参考菌种、特殊菌种是必不可少的,下面就几种实验室菌株的保存方法简述如下。
浅谈实验室细菌菌种的保存
实验室细菌菌株的保存方法:作者:张晓雷, 董小青, 王丹敏 作者单位:300162 天津,武警医学院微生物教研室 在微生物学、环境科学、分子生物学、毒理学、酶学、疫苗制备、药品生产等等领域的实验过程中,都需要应用各种细菌,储备标准菌种、参考菌种、特殊菌种是必不可少的,下面就几种实验室菌株
常用实验室菌种保存方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。保藏方法大致可分为以下几种:1.传代培养保藏法又
菌种保存方法
甘油冷冻保藏法 本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右.(1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落.(2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右.(3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或
保存菌种技巧
保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种,挑取分隔良好的单 克隆接种于2-10 ml LB中(如菌种含质粒则应加抗生素)37摄氏度快摇 8小时,按0.1%-0.5% 比例转种,培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量,以 保证足够的通气。用O.D.600 测菌密度时,读数值在0.1-0.5
菌种保存方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代
菌种保存方法
菌种保存方法 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以
菌种保存方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种: 1.传代
菌种保存的原理
菌种保存的原理是预防或减缓DNA 复制时自发突变导致菌种退化,因此要创造代谢不活泼的状态,而菌种保存时使菌种进入休眠态(孢子、芽孢),并创造干燥、低温、缺氧、缺营养的环境,创造的环境越接近此状态,所保存的菌种的时间就越长,所以从原理上讲,所有菌种都可用这种方法保存, 但需要注意的是,苛刻菌(如流感嗜
微生物实验室菌种管理浅谈
微生物实验室如果从事致病菌检测、培养基质控验收、方法验证等相关工作,就应该备有标准菌株。实验室需对使用的标准菌株进行规范性管理,以便有效地、安全地使用,保证实验结果的准确性。 一、实验室应建立菌种管理制度内容包括菌种申购、保管、领用、使用、传代、存储等方面的内容,标准菌种申购应由专人
菌种保存方法汇总
甘油冷冻保藏法 本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右. (1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落. (2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右. (3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL
能用菌种保存管永久保存菌株吗?
温度越低,保藏效果越好。从目前的试验数据及实际保存效果来看,-20℃可保存1-5 年,-80℃或液氮中可保存5-10 年,不同菌种及不同的保存温度保存时间会有所不同(例如:大肠、沙门等常规细菌-20℃我们目前可以保存到6年)。但需要注意的是所保存的菌种需每年抽检进行生化特征的鉴定,确定菌株无变异。
菌种保存的几种常用方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于zui不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种:
传统的菌种保存方式简介
斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可广泛用于细菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。液体石蜡保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放线菌及需氧菌,方法简便,可防止斜面干燥和氧气进入,但一些固氮菌、分枝杆菌、毛霉、厌氧菌等不适宜用此法。甘油冷冻保存法:用于一般细菌的保存,需使甘油终浓度为20%左右,然
菌种保藏实验_核酸的保存
实验步骤1. 以溶液形式置低温保存DNA 溶于无菌 TE 缓冲液(10 mmol/L Tris • HCl,1 mmol/L EDTA,pH 8.0)中,其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子,从而抑制 DNA 酶的活性(Mg2+ 是 DNA 酶的激活剂)。 TE 的 pH 为 8.0 是为
瓷珠菌种保存流程
1.从培养18h以上的平板上刮去新鲜纯培养物于菌种保存管中,配成大约3-4麦氏比浊度的菌悬液。2.拧紧保存管,来回颠倒几次使细菌乳化,不能旋摇。3.用无菌移液器将菌种保存管内的液体吸取干净,妥善放置被吸出的液体。4.拧紧保存管,迅速将其置于-20℃或-70℃冰箱中。
瓷珠菌种保存法
传统的菌种保存方式简介• 斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可广泛用于细菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。• 液体石蜡保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放线菌及需氧菌,方法简便,可防止斜面干燥和氧气进入,但一些固氮菌、分枝杆菌、毛霉、厌氧菌等不适宜用此法。• 甘油冷冻保存法:用
在使用后,菌种保存管的保存环境要求
菌种保存管采用的是低温冷冻保存法,因此,使用后,需放置低温环境,如-20℃、-80℃或液氮中保存,而且温度越低,保存效果越好。用户需根据菌种的保存要求选择具体保存温度。
瓷珠菌种保存法的优点
优点:操作简单方便、菌种保存快速、包装物体积小、菌种保存时间长。操作简单方便:挑取细菌新鲜纯培养物,接入菌种保存管。菌种保存快速:混匀后,吸出冷冻保存液。包装物体积小:1.8ml冷冻管。菌种保存时间长:2-8℃可保存6个月;-20℃可保存12个月;-80℃可保存24个月。
瓷珠菌种保存法的原理
瓷珠菌种保存管是实验室保存菌种的容器,管内有表面凹孔小瓷珠用于细菌的吸附和保存,放置于-20℃或-80℃下便可创造干燥、低温、缺营养的环境,使菌株处于“休眠” 状态,方可长期保存(视不同菌种与保存温度,一般可保存3-10 年), 同时菌种保存管的取用和保存较为便利(取用复苏及保存菌种仅需1分钟)。
常用的菌种保存方法有哪些
菌种保藏是食用菌产业的一项基础工作,是确保野生种质资源基因留存和现有生产用种遗传性能相对稳定的必要手段。菌种保藏的方法多种多样,有的虽然保藏效果好,但投资高或操作繁杂。在生产实践中,更需要设备投入少,能保障菌种不死亡、不污染、最大限度地保持优良种性的简便方法,如斜面低温短期保藏和自然基质较长期保藏相
微生物菌种保存方法
一、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的
生物菌种冻干保存步骤
冻干机适用于大多数细菌、放线菌、病毒、噬菌体、立克次体、霉菌和酵母等的真空冷冻干燥保藏,但不适于霉菌的菌丝型、菇类、藻类和原虫等。生物菌种冻干保存步骤,其操作流程如下: 1、安瓿管准备 安瓿管材料以中性玻璃为宜。清洗安瓿管时,先用2%盐酸浸泡过夜,自来水冲洗干净后,用蒸馏水浸泡至pH
生物菌种冻干保存步骤
冻干机适用于大多数细菌、放线菌、病毒、噬菌体、立克次体、霉菌和酵母等的真空冷冻干燥保藏,但不适于霉菌的菌丝型、菇类、藻类和原虫等。生物菌种冻干保存步骤,其操作流程如下: 1、安瓿管准备 安瓿管材料以中性玻璃为宜。清洗安瓿管时,先用2%盐酸浸泡过夜,自来水冲洗干净后,用蒸馏水浸泡至pH
菌种的保存效果不佳的原因分析
1、可能是由于保存后未将保存液吸尽,反复冻融形成冰晶损伤菌株细胞,影响了菌株活性。2、确定所保存的菌种是否为对数生长期的菌种,我们建议普通菌种保存为18小时内的新鲜菌种,而霉菌需要待孢子出现后保存其孢子。
几种菌种的保存及复苏方法
定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下:1.培养基制备1.1器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸
细菌的保存方法
1。细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保存)
细菌的保存方法
1。细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂 到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保
细菌的保存方法
1。细菌保存于穿刺培养物中:一般细菌保存于穿刺培养物可以维持两年。具体方法如下:用灭菌接种针挑取分散良好的单菌落,针缓慢穿过琼脂到达瓶底,连续几次,盖上瓶盖拧紧,做好标记。室温下存放于暗处。(最好一点可以将瓶盖放松,在适当温度下培养过夜,再拧紧瓶盖并加封Parafilm膜,室温或最好在4度避光保存)