PCR、qPCR、dPCR你需要知道的事儿
上世纪八十年代Cetus Corporation公司的化学家Kary Mullis发明了PCR，如今DNA扩增俨然已经成为了生物学研究的基础。三十多年以来，人们为了解决研究中出现的新问题新需求，不断对这一经典技术进行改良。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字PCR，PCR技术在不断蜕变却从未淡出我们的视野。如今PCR技术早已走出实验室，在遗传学鉴定和疾病诊断中发挥着巨大的作用，在越来越广阔的领域里焕发着新的活力。 PCR方法大比拼 PCR的原理在这里无庸赘述。多年来，研究者们已经在此基础上开发了一系列衍生技术。目前的PCR方法主要可以分为三类：终点PCR、qPCR和dPCR。 终点PCR 终点PCR是最原始、最简单的PCR方法，如今仍在被我们广泛使用。使用者只能在PCR反应结束之后，通过凝胶电泳、毛细管电泳等方法对产物进行检测。终点PCR本身是无法定量的，因为该反应产出的DNA量不一定能反映最初情况。举......阅读全文
关于伺服，你应该知道
什么是伺服？伺服的目标是调整一些输出，以使输入保持恒定值（通常为0）。可以想象一下汽车上的定速巡航控制装置功能如何工作：定速巡航控制调节油门（伺服输出），以使车速表读数（伺服输入）保持特定值。伺服器通过反馈来实现此目标：如果速度太低，则伺服器会给汽车更多的汽油，汽车加速，反之亦然。即使汽车的速度是许
PCR之歌+PCR十大常用网站+结果图剖析（一）
PCR作为老生常谈的一种实验技术，对实验新手而言却仍是一个不小的挑战，比如引物的设计、预测脱靶效率、PCR中的疑难杂症等等，其中任何一个问题都会让他们头疼一阵了。而本文推荐的十个常用网站基本囊括了PCR全方位攻略，你想知道的都可以在这里找到答案。 1.Primer3 网址：http://prime
如何知道PCR产物的大小
电泳，加Marker对照着估计
如何知道PCR产物的大小
如果你的模板序列已知的话，直接将引物序列和模板进行匹配，两条引物之间的DNA片段长度即为目的PCR产物的大小；如果你是想知道PCR仪反应后的产物大小，可以跑琼脂糖凝聚电泳，照胶仪下根据Marker的指示条带读取产物的大小，或者可以用照胶仪自带的软件直接读出所有pcr产物条带的大小
精液常规检查：你知道的和不知道的
精液是男性生育非常重要的条件，一旦精液出现问题，也就直接导致了男性不育或者影响宝宝健康。所以说在不育检查过程中，精液检查是必须做的。那么，精液检查前需要注意什么？又应该怎样一步一步的进行精液检查呢？精液常规检查——你知道的和不知道的1、精液检查的次数如果精液分析结果是正常的，那么一次检测就已经足够。
你需要知道，低钠盐：肾病患者的一颗隐形炸弹
所谓低钠盐就是在普通盐（氯化钠碘盐）为原料基础上添加一定量的氯化钾和硫酸镁混合后的盐，也就是将原本100%氯化钠（普通盐）变成了70%氯化钠+30%氯化钾和硫酸镁制成的混合盐。与普通钠盐相比，其氯化钠含量下降30%左右，但额外增加了30%的氯化钾含量。图片来源于网络 由于氯化钾也是一种盐类（俗
实时荧光定量PCR（Quantitative－Realtime－PCR－，qPCR）技术介绍
荧光定量PCR也叫Real-Time PCR，是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。荧光定量PCR的发展史是一部ABI、罗氏和伯乐等巨头的荡气回肠的斗争史，感兴趣的可以去查查。该技术是目前最成熟，使用最广泛的半定量PCR技术。 荧光染料法（SYBR
你知道你的身体里有多少塑料吗？
在最近上海开始实行的垃圾分类中，塑料水瓶属于可回收垃圾，它们会被回收再利用，用于纺丝等工业。然而在实行垃圾分类之前，相当一部分的塑料瓶进入了大自然，使得微塑料颗粒分布到了地球上的各种环境介质中，逐渐形成一种新型污染。 微塑料污染不仅会对生态环境造成潜在影响，还将有可能最终影响到我们人类自身的健
传统获得肽的方法你知道有哪些么？看完你就知道了
传统获得肽的方法有很多。传统法主要有:微生物发酵法、酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法、酶解法等。 1、微生物发酵法:微生物发酵法的生产工艺技术主要是通过现代微生物发酵技术将大分子球蛋白转化为小分子肽，通过控制微生物的代谢和发酵条件可生产不同氨基酸排序和分子量不同的肽。在发酵过程中，产生
分子克隆介绍
各位小伙伴，大家还记得当初进实验室的时候接触到的一个实验技能是什么呢？没错，是 PCR 扩增。小编曾经也是，看着自己亲自配比 PCR 克隆扩增的每个组分，亲眼看着琼脂糖凝胶在紫外透光台上发出的幽绿色的荧光，也是深深被迷住。但总不可能成天就对着这个邪魅的荧光发呆，对吧？看久了，她会爱上你的眼
你需要知道的热重分析仪的维护保养及注意事项
在热分析仪的使用过程中，应提前熟悉设备的使用方法及维修保养手册，以避免操作不当而造成仪器损坏或寿命减短等问题。注意事项：1、电炉放置水平的调节：电炉放置在具有一定支撑力的平整平台上，调节调整 螺丝直至水平器气泡在中心圈之内。2、炉管中心位置的调节：取下保护罩盖，取去炉顶端盖，观察炉管，应在炉膛中内
关于寨卡病毒：你知道和不知道的
寨卡病毒，英文名Zika Virus。“寨卡”原本是非洲乌干达南部一片丛林的名字，科学家最早从生活在那片丛林里的一只恒河猴身上分离出了这种寨卡病毒。1952年又在乌干达和坦桑尼亚的人体中分离出该病毒，1968年，在尼日利亚发现了人感染寨卡病毒的病例。 首次得到文件记载的寨卡病毒病疫情暴发于20
从qPCR溶解曲线判断PCR产物的相对大小
在做qPCR的时候，40个循环之后，都会插入一步（6）：绘制溶解曲线。上图的三种颜色代表了我三种不同的PCR产物片段（3个基因）从左至右依次（产物名称，产物大小，GC含量，GC碱基对）：A(蓝色)，141bp，59%，84B(红色)，138bp，61%，85C(绿色)，169bp，58%，99结果会
qPCR和qRTPCR各有什么优缺点
QRT PCR一般指以RNA为模板，先逆转成cDNA，再进行qPCR而qPCR一般是泛指，既可以当它是qRTPCR，也可以指他是专门定量检测DNA的比如检测细菌的16S，那不需要做RT，直接用qPCR检测定量即可。
qPCR和qRTPCR各有什么优缺点
QRT PCR一般指以RNA为模板，先逆转成cDNA，再进行qPCR。更容易突变，因此种类更多，更难研制有效疫苗，难以预防。RNA病毒的抵抗力普遍比DNA病毒弱，治愈也更容易。但也有例外，例如双链RNA病毒的抵抗力就很强，逆转录病毒的治愈就极其困难。植物病毒，除少数例外（如花椰菜花叶病毒Caulif
qPCR和qRTPCR各有什么优缺点
QRT PCR一般指以RNA为模板，先逆转成cDNA，再进行qPCR。更容易突变，因此种类更多，更难研制有效疫苗，难以预防。RNA病毒的抵抗力普遍比DNA病毒弱，治愈也更容易。但也有例外，例如双链RNA病毒的抵抗力就很强，逆转录病毒的治愈就极其困难。植物病毒，除少数例外（如花椰菜花叶病毒Caulif
引物篇：普通PCR－和－QPCR－引物异同点
Q问题： 普通PCR 和 QPCR 引物 是否一样？ A 回答： 二者的设计原则有相同也有不同； 相同处： • 序列的查找是一致的； • 序列选取应在基因的保守区段； • 选取合适的扩增片段大小 •
引物篇：普通PCR－和－QPCR－引物异同点
Q问题： 普通PCR 和 QPCR 引物 是否一样？ A 回答： 二者的设计原则有相同也有不同；相同处：• 序列的查找是一致的；• 序列选取应在基因的保守区段；• 选取合适的扩增片段大小• 避免引物自身或与引物之间形成4个或4个
DNA合成：你应该知道的秘密
说起DNA合成，几位前辈师兄师姐们犹会提起上世纪90年代世行贷款买仪器，好些单位甚至医院都赶时髦买了DNA合成仪，买回来才发现自己那点合成需求和费用，委实买得起用不起，那昂贵的设备成了摆设。彼时国外DNA合成虽然质量好纯度高，可寄回来海关不好过，时间上实在伤不起，幸亏国内迅速崛起的几家
想知道你的遗传命运吗？
你想知道你和你的孩子是否有遗传癌症的风险吗？你想知道你和你的孩子们是否存在患心血管疾病的风险，是否携带阿尔茨海默病的相关基因吗？即使这些疾病可能在几十年内都与你不相关或者至今没有治疗方法。 只需取少量血液或唾液，通过全基因组测序的方法就能使你获得你想知道的那些问题的答案，在一项研究中，有超过一
唐筛你要知道的秘密
怀孕15周后，孕妇都得去医院做一个唐氏筛查，主要是为了避免先天性唐氏儿的出生。这是孕期一项非常重要的检测。卫生部规定所有的孕妇都应该在孕15周-19周之间做唐氏筛查，所以大多数的准妈妈都要去做。但是以下这些唐筛的秘密你都了解吗？ 误区一：唐筛结果通过了就没事。错！ 很多的准爸妈对于唐筛寄
DNA合成：你应该知道的秘密
说起DNA合成，几位前辈师兄师姐们犹会提起上世纪90年代世行贷款买仪器，好些单位甚至医院都赶时髦买了DNA合成仪，买回来才发现自己那点合成需求和费用，委实买得起用不起，那昂贵的设备成了摆设。彼时国外DNA合成虽然质量好纯度高，可寄回来海关不好过，时间上实在伤不起，幸亏国内迅速崛起的几家DNA定制
HCMV，你该知道的新单词
人巨细胞病毒(HCMV) 当HIV、AIDS、H7N9等英文缩写单词越来越被人们熟知的时候，又有多少人了解或熟知CMV这个单词呢? 中国科学院武汉病毒所 “百人计划”研究员罗敏华此时正努力呼唤国人对潜伏的CMV的重视。CMV是巨细胞病毒(Cytomegalovirus)的英文缩写。能
废水的治理方法你知道多少？
1.1煤化工废水的基本特点煤化工企业排放废水以高浓度煤气洗涤废水为主含有大量酚、氰化物、油、氨氮等有毒、有害物质。废水中的易降解有机物主要是酚类化合物和苯类化合物砒咯、萘、呋喃、眯唑类属于可降解类有机物难降解的有机物主要有砒啶、咔唑、联苯、三联苯等。2.污水再生回用技术污水再生处理技术按照作用机理不
关于硫醇，你知道的够多吗？
硫醇(Thiol)是一种包含巯基官能团的化合物。硫醇的英文单词thiol也来源于“thion”和“alcohol”两个词的组合，其中第一个部分来源于希腊语的θεῖον (theion)，即“sulfur”。硫醇在英文中有时也被称为“mercaptan”，这个单词是1832年由丹麦哥本哈根大学
大便隐血的检测，你知道多少？
随着医学的飞速发展，各种高大上的新检查和新项目大量涌现；但在实验室检查中，有些不起眼的“老”检查却不可或缺、历久弥新——比如大便隐血。 大便隐血除了可以对有明显胃肠道出血病史的患者进行监测外，在胃肠道肿瘤筛查预警、抗凝剂使用过程中的出血监测等方面都有着非常重要的意义。因为它的灵敏、快捷、廉价，
说说你不知道的痰
每个人几乎都有过咳痰不爽的体验，尤其是痰液比较黏时，还可能在嘴里嚼/咬两下，试图把它弄开（恶趣味～）。痰液在气道内生成后，经过咳嗽动作排出气道，因此，痰液的各种属性能够从不同层面反映呼吸道的病理生理状况，今天我们就来谈谈痰液检查。痰液量 正常值 无痰或仅有少量稀薄的痰液 临床意义：增加，常见于支气
关于硫醇，你知道的够多吗？
硫醇(Thiol)是一种包含巯基官能团的化合物。硫醇的英文单词thiol也来源于“thion”和“alcohol”两个词的组合，其中第一个部分来源于希腊语的θεῖον (theion)，即“sulfur”。硫醇在英文中有时也被称为“mercaptan”，这个单词是1832年由丹麦哥本哈根大学的威廉•
城市环境所在产毒蓝藻的早期精准检测研究中取得进展
产毒蓝藻水华威胁水生态系统健康和饮用水安全，除了在浅水湖泊常见的微囊藻水华之外，新型水华蓝藻——拉氏尖头藻（Raphidiopsis raciborskii）由于其入侵性、高毒性、暴发性等特征日益受到关注。拉氏尖头藻是具有固氮能力的丝状水华蓝藻，曾被称为拉氏拟柱胞藻（Cylindrospermo
实时荧光定量PCR（Realtime－PCR，QPCR，荧光定量）分类以...
实时荧光定量PCR（Real-time PCR，QPCR，荧光定量）分类以及实验步骤介绍实时荧光定量PCR（Real-time PCR，QPCR，荧光定量）技术（Real-time quantitative PCR），是指在（QPCR，荧光定量）反应体系中加入荧光基因，利用荧光信号积累实时监测整个（