PCR、qPCR、dPCR你需要知道的事儿

上世纪八十年代Cetus Corporation公司的化学家Kary Mullis发明了PCR,如今DNA扩增俨然已经成为了生物学研究的基础。三十多年以来,人们为了解决研究中出现的新问题新需求,不断对这一经典技术进行改良。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字PCR,PCR技术在不断蜕变却从未淡出我们的视野。如今PCR技术早已走出实验室,在遗传学鉴定和疾病诊断中发挥着巨大的作用,在越来越广阔的领域里焕发着新的活力。 PCR方法大比拼 PCR的原理在这里无庸赘述。多年来,研究者们已经在此基础上开发了一系列衍生技术。目前的PCR方法主要可以分为三类:终点PCR、qPCR和dPCR。 终点PCR 终点PCR是最原始、最简单的PCR方法,如今仍在被我们广泛使用。使用者只能在PCR反应结束之后,通过凝胶电泳、毛细管电泳等方法对产物进行检测。终点PCR本身是无法定量的,因为该反应产出的DNA量不一定能反映最初情况。举......阅读全文

2016:关于基因治疗你需要知道的一切

  对于一些幸运的病人来说,2016年可以称得上是基因治疗逐渐兑现承诺的一年。长久以来,基于基因敢于的基因治疗技术都以其在根本上治愈很多疑难杂症的强大能力不断给予着学术和临床领域以无限希望,2016年,基因治疗技术取得了几项不容忽视的重大进展并在几个领域初步实现了商业化。虽然价格不菲,但是基因治疗却

丙型肝炎HCV-|-你需要知道这6件事

丙型肝炎(简称丙肝)是由丙型肝炎病毒引起的一种肝脏疾病:该病毒可造成急、慢性肝炎性感染,其严重程度从持续几周的轻微病症到终身存在的严重疾病。丙肝见于世界各地,受影响最严重的地区为非洲、中亚和东亚。目前全球HCV总流行率约2.5%(1.775亿),约50%~80%的感染者会出现慢性化;丙型肝炎起病隐匿

探针台选型需要注意事项”你知道吗?

  探针台是一种很专业的仪器,它主要的功能就是针对半导体元件进行检测,这里面说的半导体元件指的是集成电路,分立器件,光电器件,传感器等元件以及封装的测试。通过探针台配合测量仪器可完成集成电路的电压,电流,电阻和电容电压特性曲线等参数检测。可以适用于对芯片进行科研分析,抽查检测等;可以保证这些半导体元

数字PCR应用(三)

Fluidigm公司于2006年底推出了基于集成流体通路(IFC)芯片的Bio-Mark™ 高通量基因剖析系统。 其创新在于集成液体通路技术:应用集成电路制造工艺(光刻)在硅片或石英玻璃上刻上许多微管和微腔体,经过不同的控制阀门控制溶液在其中的活动来完成生物样品的分液、混合、PCR扩增。图8. Bi

数字PCR的原理是什么

  数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。  在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)

你需要知道的液相色谱仪的维护与保养知识!

液相色谱仪是属于易学难用的仪器,特别讲究“正确使用”和经验。液相工作者接触最多的是流动相,也就是流动相,是造成液相色谱各种问题的最主要源头。液相色谱仪最常见的故障一是堵,二是漏。下面就这两点分别展开讨论。(注:流动相以甲醇为例,色谱柱以C18为例)“堵”的表现现象就是柱压异常升高,直接原因就是流路不

基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展(三)

3.2 dPCR在转基因植物检测方面的研究 转基因植物及相关食品的定量分析主要测定转入基因的相对含量。目前常用qPCR作为核酸定量方法。dPCR可以不需要校准物而准确测量低拷贝的DNA分子。Corbisier 等用dPCR分析了提取于MON810玉米种子的外源检测基因和hmg基因的拷贝数,验证了dP

你需要知道的液质使用禁忌,千万别踩雷!

  酸性物质适合做负离子检测,所以流动相偏碱性较合适,促使其解离,碱性物质适合做正离子检测,流动相中适当的加入酸,促使其形成正离子,流动相中适当加一些醋酸钠(或者醋酸铵),可形成加钠的正离子或者加铵的正离子。   推荐使用的流动相和添加剂:   有机溶剂:反相:乙腈/甲醇/乙醇/异丙醇/

荧光定量PCR——qPCR的原理及应用

  qPCR的英文全名是Real-timeQuantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称qPCR。  上世纪八十年代Cetus Corporation公司的化学家Kary Mullis发明了PCR,如今DNA

嗓子痛就是“二阳”?关于“二阳”,这些你需要知道

近期,很多人出现了咽喉疼痛的症状,担心自己二次感染上了新冠病毒。对此,北京大学第一医院感染疾病科主任王贵强认为,咽喉疼痛有多种原因,需摸清病因客观对待。当前流行的XBB系变异株是新冠病毒奥密克戎的重组变异株。研究数据显示,与早期流行的奥密克戎变异株相比,其传播力和免疫逃逸能力都要强,但致病力没有明显

快速排查酒精检测仪需要进行消毒你知道吗

  快速排查酒精检测仪需要进行消毒你知道吗仪器的规格参数:(B1型)   1.UV波长 : C波段   2.消毒机理:破坏冠状病毒等病菌的蛋白质,核酸   3.适用病菌:新guan病毒,流感病毒,结核杆菌,禽流感病毒及其他呼吸道传染病致病菌   4.消毒检测:自动识别仪器放入   5.消毒

水浴恒温振荡器使用前后你需要知道哪些事

水浴恒温振荡器是一种温度可控的恒温水浴槽和振荡器相结合的生化仪器,主要适用于各大中院校、医疗、石油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作生物、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡培养。使用前须知:1、 使用前请详细阅读本说明书。2、 机器的工作平面不能过度平滑(例如瓷砖等)。3、 用户提供的插

快速排查酒精检测仪需要进行消毒你知道吗

  快速排查酒精检测仪需要进行消毒你知道吗仪器的规格参数:(B1型)   1.UV波长 : C波段   2.消毒机理:破坏冠状病毒等病菌的蛋白质,核酸   3.适用病菌:新guan病毒,流感病毒,结核杆菌,禽流感病毒及其他呼吸道传染病致病菌   4.消毒检测:自动识别仪器放入   5.消毒

Digital-PCR-技术的发展与应用(二)

液滴数字PCR数字PCR源于乳液PCR(emulsion PCR)技术 ,利用微滴发生器可以一次生成数万乃至数百万个纳升甚至皮升级别的单个油包水微滴,作为数字PCR的样品分散载体,PCR反应结束后检测每个微滴的荧光信号。目前Bio-Rad公司的QX100系统、 QX200系统均为采用液滴技术

你知道与不知道的巨噬细胞?

  巨噬细胞是先天免疫系统的一种特殊的、长寿命的吞噬细胞。巨噬细胞是三种吞噬细胞类型之一,还有粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和树突状细胞(DCs)。        大多数病原体通过呼吸道、肠粘膜、皮肤病变或泌尿生殖道进入宿,NOI个遇到的就是在粘膜下组织中的巨噬细胞,它们通常是NO

血糖你知道,糖化血红蛋白你知道吗

什么是糖尿病监控“金指标”?走近糖化血红蛋白,这些问题你知道吗?第一:什么是糖化血红蛋白?去医院看病时医生会建议我们定期查糖化血红蛋白,那么什么是糖化血红蛋白呢?通过糖化血红蛋白我们又能得到哪些有用的信息呢?糖化血红蛋白:是血液中红细胞的主要成分血红蛋白与血液中的葡萄糖发生结合的产物,由于这种结合是

什么是数字PCR

数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖的酶促合成反应,扩增的特异

普通PCR技术和数字PCR技术,什么区别?

PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。按照PCR技术的演进,人们习惯性将PCR技术划分为三代:普通PCR技术、实时荧光定量PCR技术(qPCR)以及数字PCR(dPCR)技术。以前也介绍了很多关于qPCR相关知识,这期给大家分享另外两种PCR技术

RTqPCR需要注意的那些事

rt-qpcr需要注意的那些事,你都了解吗?在rt-qpcr实验中不论是实验小白还是老司机,都会遇到各种不同的实验问题。解决问题不仅要浪费额外的样品和试剂,还要占用大量的时间一遍遍的重复和分析,真是被实验折磨得焦头烂额。那实验过程中应该注意哪些细节呢?小翊精心为大家总结了rt-qpcr实验的注意事项

使用旋转粘度计你需要知道的七点事项

  1、仪器的性能指标必须满足国家计量检定规程度要求。使用中的仪器要进行周期检定,必要时要进行中间自查以确定其计量性能合格,系数误差在允许范围内,否则无法获得准确数据。   2、特别注意被测液体的温度。要特别注意将被测液体的温度恒定在规定的温度点附近,对测量不要超过0.1℃。   3、测量容器的

关于三代基因测序,你所需要知道的都在这儿!

  一、导读:  在大部分投资者对“二代测序”(NGS)还没有搞清技术细节的情况下,“三代测序”(3GS)又火了。  6月17日,医药板块中基因测序相关标的在“三代测序技术获得重大突破”的新闻影响上出现明显涨幅,我们也接到较多投资者对相关新闻的背景及观点的询问。为此,我们结合各方面资料归纳总结了三代

关于三代基因测序,你所需要知道的都在这儿!

  一、导读:  在大部分投资者对“二代测序”(NGS)还没有搞清技术细节的情况下,“三代测序”(3GS)又火了。  6月17日,医药板块中基因测序相关标的在“三代测序技术获得重大突破”的新闻影响上出现明显涨幅,我们也接到较多投资者对相关新闻的背景及观点的询问。为此,我们结合各方面资料归纳总结了三代

你需要知道的14种工业废水处理工艺

  1、含酚废水有何危害,怎样处理?  含酚废水主要来自焦化厂、煤气厂、石油化工厂、绝缘材料厂等工业部门以及石油裂解制乙烯、合成苯酚、聚酰胺纤维、合成染料、有机农药和酚醛树脂生产过程。含酚废水中主要含有酚基化合物,如苯酚、甲酚、二甲酚和硝基甲酚等。酚基化合物是一种原生质毒物,可使蛋白质凝固。水中酚的

梦天实验舱发射在即,这些事情你需要知道

中国空间站第三大舱段——梦天实验舱——发射在即。在地面科技人员的配合下,神十四乘组开展了相关训练,飞控团队前期也对空间站组合体进行了调相控制,天地共同完成了准备工作。北京航天飞行控制中心副总工程师 汪赛进:梦天实验舱发射之前,我们空间的组合体也要进行180度掉头转倒飞,这样就是为了梦天实验舱与空间站

眼科光学仪器标准解读,占领市场你需要知道这些

  近年来,眼科光学技术及仪器呈现出繁荣发展的局面,进口设备垄断市场的格局被打破,国产眼科光学仪器大有可为。为提高我国的标准水平,推动我国医用光学行业的发展,眼科光学创新发展论坛暨医用光学和仪器检验标准解读会将对国家医用光学和仪器检验标准进行详细解读。    论坛主要议题涵盖行业热点和最新发展:医

你不知道的TOF

TOF顾名思义是测量光飞行时间来取得距离,具体而言就是通过给目标连续发射激光脉冲,然后用传感器 接收从反射光线,通过探测光脉冲的飞行往返时间来得到确切的目标物距离。因为光速激光,通过直接测 光飞行时间实际不可行,一般通过检测通过一定手段调制后的光波的相位偏移来实现。TOF 法根据调制方法的不

你的发色-基因知道

来自中科院北京基因组研究所和其他几国科研机构的科学家新发现了超过100个影响人类头发颜色的基因。这有助于实现通过DNA来精准预测未知犯罪者的头发颜色。这项研究最近发表在《自然遗传学》杂志上。图片来源:hairstylezz中科院北京基因组研究所、伦敦国王学院、荷兰伊拉斯姆斯大学等六国研究人员合作进行

1/2/3代PCR技术

Mullis在发明PCR技术后曾这样描述:“用一个单分子DNA,PCR能在一个下午内产生100百万个相似的分子。只需要一个管子、一些简单的试剂和一个用来加热的设备”。从PCR技术发明至今已过30年,而PCR技术刚好发展到第三代,在过去的30年里PCR技术为生命科学的发展做出了不可磨灭的贡献。◆◆一代

关于COD,你知道多少?

COD的衡量标准:  水中的还原性物质有各种有机物、亚硝酸盐、硫化物、亚铁盐等。但主要的是有机物。因此,化学需氧量(COD)又往往作为衡量水中有机物质含量多少的指标。化学需氧量越大,说明水体受有机物的污染越严重。 化学需氧量(COD)的测定,随着测定水样中还原性物质以及测定方法的不同,其测定值也有不

烘箱—你必须知道

  无尘烘箱也称无尘工业烘箱、洁净工业烘箱。是一种提供高温净化环境的特殊洁净无尘烘干设备。箱内空气封闭自循环,经耐高温高效空气过滤器(100级)反复过滤,使烘箱工作室内处于无尘状态。无尘烘箱工作室为不锈钢结构。工作室内温度由温控仪自动控制,并有自动恒温及时间控制装置,并附设有超温自动停电及报警电路,