新技术:一种新型DNA结构的荧光张力探针
基于新型DNA结构的分子力学探针原理及细胞力学可视化研究 武汉大学供图 近日,《自然—细胞生物学》在线发表了武汉大学高等研究院教授刘郑课题组在生物物理交叉领域的最新研究成果。课题组设计出一种新型DNA结构的荧光张力探针,并应用于活细胞运动过程的机械力可视化研究。该技术有望成为研究肿瘤细胞迁移、免疫细胞识别和激活等机械力深度参与生命过程的重要工具。 论文题目为《用于观察活细胞中强机械力传递的可逆性剪切DNA探针》,高等研究院2018级博士研究生李洪云为第一作者,刘郑为唯一通讯作者。合作者包括武汉大学生命科学学院研究员张兴华及其团队的博士生张晨、中山大学教授马杰。第一作者单位为武汉大学。 电学、化学和力学是细胞内最常见的三大信号系统,它们相互协调,共同维持着细胞的生命活动。前两者已被广泛研究,而细胞的机械力信号传递过程因缺少有效的研究方法,人类对其认识有限。实际上,细胞的生命过程不断地受到挤压、拉伸、弯曲和拉扯细胞外基......阅读全文
新型DNA结构的荧光张力探针于活细胞机械力可视化研究
电学、化学和力学是细胞内最常见的三大信号系统,它们相互协调,共同维持着细胞的生命活动。前两者已被人们广泛研究,而细胞的机械力信号传递过程因缺少有效的研究方法,人们一直对其认识有限。研究表明,细胞在体内拥挤的环境中不仅通过挤来挤去以获得足够的生存空间,同时,细胞的生命过程也不断的受到挤压、拉伸、弯
开尔文探针力显微镜的开尔文探针力显微镜
原子力显微镜(atomic force microscope,简称AFM),也称扫描力显微镜(scanning force microscope,SFM)是一种纳米级高分辨的扫描探针显微镜,优于光学衍射极限1000倍。原子力显微镜的前身是扫描隧道显微镜,是由IBM苏黎士研究实验室的海因里希·罗雷
机械力转导的定义
中文名称机械力转导英文名称mechanotransduction定 义细胞在接受包括摩擦力、压力、牵引力、重力和剪切力等机械力刺激时,将这些刺激信号的机械能转化为电信号或生物化学信号并最终引起细胞生理反应的过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)
机械力转导的作用
中文名称机械力转导英文名称mechanotransduction定 义细胞在接受包括摩擦力、压力、牵引力、重力和剪切力等机械力刺激时,将这些刺激信号的机械能转化为电信号或生物化学信号并最终引起细胞生理反应的过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)
什么是“DNA探针”?
DNA探针(DNA probe)是最常用的核酸探针,为长度在几十到几百甚至上千碱基对的单链或双链DNA,用特殊示踪剂(如同位素、酶或有色基团)进行标记;在适当的pH值、温度和离子强度下,DNA探针利用分子的变性、复性以及碱基互补配对的高度精确性,能与待测样本中互补的非标记单链DNA或RNA以氢键结合
DNA探针的来源介绍
DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe);另一种是从相应的基因转录获得了mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针(cDNA probe)。与基因组探针不同的是,cDNA探针不含有内含子序列。此外,还可在体外人工合成碱基数不
“DNA探针”的性能优势
①DNA探针多克隆在质粒载体中,制备方法简便;②DNA探针相对RNA探针(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探针的标记方法较成熟,可用同位素或非同位素标记,有多种方法可供选择。
DNA探针原位杂交
1、4—6微米切片,用防脱片胶(多聚赖氨酸)处理过的玻片贴附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2(趁热脱蜡) 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml),37℃消化1
“DNA探针”的性能优势
①DNA探针多克隆在质粒载体中,制备方法简便;②DNA探针相对RNA探针(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探针的标记方法较成熟,可用同位素或非同位素标记,有多种方法可供选择。
DNA探针的制备方法
基因组DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。要得到一种特异性DNA探针,常常是比较烦琐的。以细菌为例,细菌的基因组大小约为5×106碱基,约含3000个基因。要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后(如用限制性内切酶做不完全水解)分别
“DNA探针”的制备过程
基因组DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。要得到一种特异性DNA探针,常常是比较烦琐的。以细菌为例,细菌的基因组大小约为5×106碱基,约含3000个基因。要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后(如用限制性内切酶做不完全水解)分别
DNA探针的功能特性
DNA探针是以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体。DNA探针将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针。可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以
“DNA探针”的技术依据
DNA探针根据其来源分为3种:一种来源于基因组中的基因本身,称为基因组探针(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一种是从相应的基因经转录获得mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针(cDNA probe);此外,还可在体外人工合成20~50个碱基的与基
原子力显微镜探针、原子力显微镜及探针的制备方法
原子力显微镜探针、原子力显微镜及探针的制备方法。原子力显微镜探针包括探针本体和设置在探针本体的针尖一侧的接触体,接触体具有连接段和接触段,接触段具有接触端面;接触段为二维材料,且接触端面为原子级光滑且平整的单晶界面。本发明ZL技术的原子力显微镜探针可精确地检测受测样品的各种性质。介绍随着微米纳米科学
机械力实现人造细胞分裂
地球上生命的成功是基于活细胞分裂成两个子细胞的惊人能力。在这样的分裂过程中,细胞外膜必须经历一系列的形态转变,最终膜分裂。近日,德国马普学会胶体与界面研究所和聚合物研究所的研究人员,通过在人工细胞膜上固定低密度的蛋白质,现在已经实现了对这些形状转变和由此产生的分裂过程前所未有的控制。 为了控制
机械力敏感通道的结构功能
中文名称机械力敏感通道英文名称mechanosensitive channel定 义介导细胞对机械力刺激(如对细胞膜受到的压力)做出反应的离子通道。能够将机械力转化为电及化学信号。此类离子通道可以分为多个家族,广泛见于各种生物。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)
纳米机械力引发细胞自噬
机械力刺激在细胞生长、分化与通讯等重要生命活动中发挥关键作用。近年来,机械门控离子通道蛋白Piezo的发现为在分子水平理解机械力对于生物体的作用奠定了基础。然而,如何在单细胞水平定量分析机械力对于细胞效应的作用仍然是一个难题。近日,上海交通大学樊春海院士、邵志峰教授与中国科学院上海高等研究院胡钧
机械力如何影响干细胞分化?
采用一种独特的工具箱,研究人员就能用珠子按摩细胞,以了解机械力如何影响干细胞分化。 间充质干细胞——是不断更新我们的骨骼、软骨和肌肉的成体干细胞,因为它们可大量生产各种各样不同的愈合因子,因此被认为具有治疗疾病的巨大潜力。大量的临床试验正在研究这些细胞,用于许多疾病(从糖尿病到脊髓损伤)的治疗
机械力如何影响干细胞分化?
采用一种独特的工具箱,研究人员就能用珠子按摩细胞,以了解机械力如何影响干细胞分化。 间充质干细胞――是不断更新我们的骨骼、软骨和肌肉的成体干细胞,因为它们可大量生产各种各样不同的愈合因子,因此被认为具有治疗疾病的巨大潜力。大量的临床试验正在研究这些细胞,用于许多疾病(从糖尿病到脊髓损伤)的治
机械力实现人造细胞分裂
地球上生命的成功是基于活细胞分裂成两个子细胞的惊人能力。在这样的分裂过程中,细胞外膜必须经历一系列的形态转变,最终膜分裂。近日,德国马普学会胶体与界面研究所和聚合物研究所的研究人员,通过在人工细胞膜上固定低密度的蛋白质,现在已经实现了对这些形状转变和由此产生的分裂过程前所未有的控制。 为了控制
原子力显微镜探针简介
原子力显微镜(AFM),是一种具有原子分辨率的表面形貌、电磁性能分析的重要仪器。首台原子力显微镜在1985年研发成功,其模式可分为接触模式和轻敲模式等多种模式。AFM探针由于应用范围仅限于原子力显微镜,属于高科技仪器的耗材,应用领域不广,全世界的使用量也不多。主要的生产厂家分布在德国,瑞士,保加
植物DNA提取实验——机械法
植物DNA提取实验用于:(1)获得较纯的真核细胞基因组DNA;(2)后续PCR分析,RFLP分析,基因文库的构建,基因探测等的研究。实验方法原理这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破裂。同时将核酸与植物
DNA探针的种类及其特点
核酸探针按性质划分可分为基因组 DNA 探针、cDNA 探针、RNA 探针和人工合成的寡核苷酸探针等几类。作为诊断试剂,较常使用的是基因组 DNA 探针和 cDNA 探针。其中,前者的应用最为广泛,它的制备可通过酶切或聚合酶链反应(PCR)从基因组中获得特异的 DNA 后将其克隆到质粒或噬菌体载体中
DNA探针根据其来源分类
DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe);另一种是从相应的基因转录获得了mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNA探针(cDNA probe)。与基因组探针不同的是,cDNA探针不含有内含子序列。此外,还可在体外人工合成碱基数不多的
DNA探针的标记实验
探针标记法 实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一
DNA探针的标记实验
实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。
DNA片段探针的应用实验
甲酰胺法 水溶液中杂交 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
DNA探针的标记实验
核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀
DNA探针检测法的原理
原理:碱基互补配对。。探针:DNA单链-化学连接的标记基团探针和目标DNA(经过加热,分成单链)混合,探针结合的目标DNA就会被标记
DNA探针的技术优势
①DNA探针多克隆在质粒载体中,制备方法简便;②DNA探针相对RNA探针(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探针的标记方法较成熟,可用同位素或非同位素标记,有多种方法可供选择。