细胞凋亡检测实验——TUNEL法
实验方法原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端，与dATP形成异多聚体，并可与连接了报告酶（过氧化物酶或碱性磷酸酶）的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下，过氧化物酶可产生很强的颜色反应，特异准确的定位出正在凋亡的细胞，因而可在普通光学显微镜下进行观察。 毛地黄植物是地高辛的唯一来源。在所有动物组织中几乎不存在能与抗地高辛杭体结合的配体，因而非特异性反应很低。抗地高辛的特异性抗体与脊椎动物甾体激素的交叉反应不到1%，若此抗体的Fc部分通过蛋白酶水解的方法除去后，则可完全排除细胞Fc受体非特异性的吸附作用。实验材料组织切片冰冻切片细胞试剂、试剂盒磷酸缓冲液蛋白酶K氯化钴盐蒸馏水双氧水二氨基联苯丁醇乙醇二甲苯甲醛乙酸松香水抗地高辛抗体氯化钠柠檬酸钠乙酸钠甲基绿TdT酶反应液仪器、耗材光学显微镜染色缸载玻片盖玻片实验步骤一......阅读全文
细胞凋亡检测实验——TUNEL法
实验方法原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端，与dATP形成异多聚体，并可与连接了报告酶（过氧化物酶或碱性磷酸酶）的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下，过氧化物酶可产生很强的颜色反应，特异准确
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程，染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ² 和Mg² 依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180～200bp核小体DNA多聚体。
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
原理 在细胞凋亡的过程中，基因组DNA会断裂产生双链、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段，这些DNA链的缺口可以利用没标记法来识别。试剂盒就是通过催化DNA断端，来标记缺口。酶底物显色后，可以光镜检查被染色的细胞。
细胞凋亡（TUNEL，TUNEL染色）检测技术
细胞凋亡是指为维持内环境稳定， 生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下，其死亡途径被激活，并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。细胞凋亡是程序性死亡过程的一种主要形式，它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞联系中断、内质网与细胞膜融合，最终细胞片段化形成许多
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和经验总结
一、TUNEL法的实验原理细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱
TUNEL细胞凋亡检测程序
实验概要本实验用TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可
hoechst－和tunel法检测细胞凋亡的区别
hoechst法看凋亡，主要是看sub-G1期的细胞数量。原理就是凋亡的细胞，由于DNA正在降解，所以含量比正常细胞要少。在以PI荧光强度（代表DNA量）为横坐标的柱状图上，一般会有2个峰，G1和G2，G1就是正常细胞，G2是正在分裂的2倍体。2者间是S期细胞。如果有凋亡的细胞，在G1前会有细胞出现
罗氏TUNEL细胞凋亡检测程序
一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素（fluorescein）标记的 dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，
罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序
（In situ cell death detection kit-POD法）一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素（fluorescein）标记的dU
Tunel－Procedure－in－Bovine－Embryos－牛胚胎TUNEL检测凋亡
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go highe
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。本试剂盒采用TUNEL法，应用高活性的基因重组末端脱氧核糖核苷酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）在凋亡细胞断裂的DNA 3’-
流式细胞仪检测实验用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞
实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素（FITC)-链霉亲和素（streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机（或相当的
流式细胞仪检测实验_用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞
实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素（FITC)-链霉亲和素（streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机（或相当的
细胞凋亡检测实验——DNA－ladder法
实验方法原理发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。 实验材料凋亡细胞试剂、试剂盒蛋白酶K醋酸钾白细胞裂解液Tris-HClNaClEDTAS
TUNEL－法测凋亡技术操作步骤
一、TUNEL检测原理 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况，可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。 其原理是细胞凋亡发生时，内源性核酸酶激活，
TUNEL－法测凋亡技术操作步骤
TUNEL 法测凋亡操作步骤 一、TUNEL检测原理 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况，可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。
2－TdT原位凋亡检测(TUNEL法)试剂盒说明
DNA断裂是细胞凋亡的重要特征，在凋亡初期，DNA可断裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段；晚期则可进一步在核小体间断裂，形成180-200bp的DNA断裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUT
细胞凋亡检测实验——形态学检测法
细胞凋亡检测可应用于：（1）肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究；（2）临床诊疗，新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗；（3）对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征，使用合适的显微镜检测凋亡细胞形态变化。
细胞凋亡检测实验——Caspase3活性检测法
实验方法原理Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（
一步法TUNEL细胞凋亡检测技巧及常见问题分析
1. 对于贴壁细胞或细胞涂片： a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PB
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞凋亡检测实验
实验方法原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是细胞的生命现象之一，它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关，自身免疫性疾病和
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
流式细胞仪检测实验_TUNEL组织切面中的凋亡细胞原位杂交
实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% （m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐（TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛（digo×igenin下同）-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级
流式细胞仪检测实验TUNEL组织切面的凋亡细胞的原位杂交
实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% （m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐（TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛（digo×igenin下同）-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级
ELISA法检测细胞凋亡
（一） 原理细胞凋亡的发生，是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp～200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法，应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体，与核小体片段形成夹心结构，可特
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的（1）石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的（1）石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的（1）石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
细胞凋亡检测实验——细胞凋亡的形态学检测
实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实验步骤一、光学显微镜和倒置显微镜1. 未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞