薄层层析(TLC)方法(二)

薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。 薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定,也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。 根据分离的原理不同,薄层层析可以分为两类:用吸附剂铺成的薄层所进行的层析为吸附薄层层析;用纤维素粉、硅胶、硅藻土为支持剂铺成的薄层,属于分配薄层层析。 薄层层析中以吸附薄层为多用,吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶。 吸附TLC→固定相为吸附剂→氧化铝、硅胶。(较多用)TLC→{ 分配TLC→固定相为液态(水)→固定相吸苷在支持剂上。 (一)吸附薄层的基本原理: 吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同,及展开剂对它们的解吸附能力的不同,使各成分达到分离。 吸附......阅读全文

薄层层析(TLC)方法(二)

薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。  薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定,也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通过薄

薄层层析(TLC)方法(一)

  薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。  薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定,也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通

薄层层析(TLC)实验操作步骤

薄层色谱(TLC )是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用

氨基酸的薄层层析(TLC)

【实验原理】聚酰胺薄膜层析是60年代以后发展起来的一种新的层析方法,特别适用于氨基酸及其衍生物的分析。具有灵敏度高、分辨率强、操作方便快捷等特点。聚酰胺是一类化学纤维素原料,即锦纶(尼龙)。由乙二酸和乙二胺聚合而成的,称锦纶66。 由于分子中含有大量的酰胺基团,故称聚酰胺。聚酰胺薄膜是在涤纶片基

薄层色谱(TLC)定义

薄层色谱(TLC)是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用毛

薄层色谱(TLC)定义

定义薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,是近来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。

薄层层析定量方法

可分为洗脱测定法、薄层层析法和原位扫描法:洗脱测定法①洗脱测定法,将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下,用适宜溶剂将组分洗脱溶出,然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外-可见分光光度法,也可用电化学分析法等。原位扫描法②原位扫描法,将展开后的薄层板放在光密度计内,以一定波长的光照射,同时使斑

薄层色谱的TLC的通用显色方法

   理想的显色希望灵敏度高、斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好、斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比。在样品组成并不完全已知的情况下,通用显色方法显得成尤为重要。通用显色法主要有:   (1)、紫外照射法:方便,不破坏样品;   (2)、碘蒸气法:通用性强,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用

TLC薄层色谱法

薄层色谱法,又简写为TLC,常用于中药成方制剂中有效成分的定性鉴别。由于该方法鉴别专属性强,使用设备简单,易于操作,故应用广泛,在目前的药品质量标准定性鉴别中(如中国药典和食品药品监督管理局标准),已大大地超过了显微鉴别、理化鉴别和光谱鉴别。

TLC薄层板的选用

薄层板的选用目前实验室已普遍采用市售高效薄层板,以硅胶G型板最为常见,相对于自制薄层板来说分离效果更好。由于硅胶表面的pH值约为5,比较适合于酸性和中性物质的分离,如有机酸、酚类、醛类等。碱性物质能与硅胶作用,展开时易被吸附于原点不动或出现斑点拖尾现象。在自制薄层板时可用稀碱溶液制备薄层使其变为碱性

细菌细胞壁糖的薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)(2)

四、操作步骤(一)菌体培养及样品的准备1.菌体培养:以枯草芽孢杆菌为例。培养基成分为:1%蛋白胨,0.5%氯化纳,1%牛肉汁,调pH 至7.2。将培养基装入500mL 三角瓶内,每瓶100mL,灭菌,5.52×10Pa,30分钟。灭菌后的培养基冷至约30℃,用接种环取菌株一环,接种于培养基内。摇床培

可溶性糖的硅胶G薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)

一、实验目的1.了解薄层层析测定可溶性糖的原理。2.掌握硅胶G 薄层层析的操作方法。二、实验原理薄层层析(简称TLC)是一种微量而快速的层析方法,是在吸附剂或支持剂均匀涂布的薄层上进行的,故称薄层层析。为了使所要分析的样品各组分得到分离,必须选择合适的吸附剂。硅胶、氧化铝和聚酰胺是广泛采用的吸附剂,

细菌细胞壁糖的薄层层析(thin-layer-chromatography,TLC)(1)

一、实验目的1.熟悉薄层层析的操作步骤。2.掌握薄层层析法分析细菌细胞壁糖的原理和方法。二、实验原理簿层层析是一种微量而快速的层析方法。该方法是把吸附剂或支持剂(例如硅胶或硅藻土)涂在玻璃板上成为一簿层,将要分析的样品滴加到薄层上,然后用合适的溶剂进行展开,使样品中各个成分分离,最后进行定性鉴定和定

薄层色谱法(TLC)简介

简介   1.定义:薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀地铺成薄层,试样点在薄层的一端,流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。    2.原理:薄层色谱是吸附色谱,展开

薄层层析

Reaction volume 100 ul5 ul NADPH (100 mM)x ul cell extract so you get 50 % conversion0.2 uM C14-Testosteroneadd Tris-Citrate Buffer pH 6 to an endvolu

薄层层析的薄层层析的分析程序

将样品溶液用毛细管点在薄层板的一端,置密闭槽中,加入适宜溶剂为流动相。由于毛细管原理,溶剂被吸上,沿板移动,并带动样品中各组分向前移动,这个过程称为展开。由于各组分性质不同,移动距离不同,展开一定距离后,即得互相分离的组分斑点。可用适当方法使各组分在板上显示其位置,如组分本身有颜色,即可直接观察,否

薄层层析板常用制备方法

薄层层析板制备方法有很多,有手工的,也有机械的。如果薄层层析板用量较少,可以用手工的,如果用量较大,还是用机械的更加方便快捷!下面先介绍一下配置方法:CMC-Na溶液的配置:一般其浓度为0.3~0.5%,根据自己经验而定(我习惯用0.4%的)。具体方法如下:先将预用的水加热至60~70℃,然后加入C

薄层层析板常用制备方法

薄层层析板制备方法有很多,有手工的,也有机械的。如果薄层层析板用量较少,可以用手工的,如果用量较大,还是用机械的更加方便快捷!下面先介绍一下配置方法:1. CMC-Na溶液的配置:一般其浓度为0.3~0.5%,根据自己经验而定(我习惯用0.4%的)。具体方法如下:先将预用的水加热至60~70℃,然后

糖的硅胶G薄层层析实验——薄层层析

实验方法原理硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的吸附能力不同,再用适当的溶剂系统展层,使不同的物质得以分开,使用显色剂显色,得到不同的 Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关,经过

黄曲霉毒素检测方法薄层分析法(TLC)

TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的试样

薄层色谱法(thin-layer-chromatography,TLC)

一、目的要求1. 了解薄层层析分离和鉴定有机物的原理和方法;2. 掌握薄层层析分离和鉴定有机物的操作步骤。二、基本原理薄层色谱具有设备简单、速度快、分离效果好、灵敏度高以及能使用腐蚀性显色剂等优点,是一种微量的分离分析方法。它可以与光谱或质谱结合起来,是一种很有发展前途的分析技术。薄层色谱是把吸附剂

TLC柱层析中硅胶的使用

 硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了,有时还会有大量的硅胶剩余,浪费硅胶,这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。柱层析用的硅胶一般是 100-200 目,100 毫升硅胶的质量在47 克左右,如果装一个直径是 2.8 厘米的柱子,可以装 18 厘高。为了避免浪费硅胶和溶剂,最初学习装

TLC柱层析过柱的技巧

过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为: 加压, 常压, 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度, 减少产品收集的时间, 但是会减低柱子的塔板数。 所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的, 但是时间也最长, 例如一些天然化合物的分离,有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量,但是由于

TLC柱层析上样的技巧

上样的技巧上样也有湿法和干法之分: 湿法一般用淋洗剂溶解样品, 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等, 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下, 尽量不要破坏硅胶面。加样后, 打开柱底活塞, 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂,再充分地吸

常用中药薄层方法(二)

蒙花苷  野菊花栓  石醚脱脂,甲醇回流,滤过用  乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)  氯化铝+UV365异欧前胡素  白芷  乙醚提,乙酸乙酯溶  石醚-乙醚(3:2)  UV365欧前胡素  白芷  乙醚提,乙酸乙酯溶  石醚-乙醚(3:2)  UV365丁香酚  十六味冬青丸  乙醚

薄层层析和纸层析的异同

一、性质不同1、纸层析:用纸作为载体的一种色谱法。2、薄层层析:色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术。二、用途不同1、纸层析用途:常用于叶绿素色素、氨基酸的鉴定和测定、桔皮精油成分的测定和一些特定细胞的筛选实验。2、薄层层析用途:适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用

薄层层析和纸层析的异同

一、性质不同1、纸层析:用纸作为载体的一种色谱法。2、薄层层析:色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术。二、用途不同1、纸层析用途:常用于叶绿素色素、氨基酸的鉴定和测定、桔皮精油成分的测定和一些特定细胞的筛选实验。2、薄层层析用途:适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用

氨基酸薄层层析实验方法

  【实验试剂和器材】  (一) 试剂  1. 氨基酸标准液(10mg/ml):三种氨基酸是赖氨酸、脯氨酸、缬氨酸,分别配成上述浓度的溶液。  2. 氨基酸混合液(每种氨基酸5mg/ml)  3. 展层剂:正丁醇:12%氨水:95%乙醇=13: 3: 3(V/ V)  4. 0.1%茚三酮-正丁醇液

薄层层析操作要点

铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑

薄层层析法原理

薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度