层析的概念
小编为广大考生整理了生物化学名词解释,希望对大家考博复习有所帮助,下面是层析(chromatography)相关名词解释以及试题范例。层析是什么(概念)(chromatography)层析,即色层分析,利用各组分物理性质的不同,将多组分混合物进行分离及测定的方法,有吸附层析、分配层析两种,一般用于有机化合物、金属离子、氨基酸等的分析。层析的类别◆按层析的机理划分:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。◆按流动相与固定相的不同划分:气相层析、液相层析。◆按操作形式划分:柱层析、纸层析、薄层层析、高效液相层析等。以上划分无严格界限,有些名称相互交叉,如亲和层析应属于一种特殊的吸附层析,纸层析是一种分配层析,柱层析可做各种层析。色层分析法层析(色层分析法)即色谱法。起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科-色谱学。1952年英国科学家阿切尔·马丁(Archer JohnPorter ......阅读全文
层析法的原理是什么?
层析法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以固定相对流动相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。
层析技术的研究发展
起步期在层析技术发展之初,对于一些物质的分离方式都处在比较原始的状态,并且分离的结果也并不是很理想。bio-rad专家谈到层析技术最初是在1903~1906年由俄国植物学家M.Tswett首先提出来的。那时,他将叶绿素的石油醚溶液倒入碳酸钙管柱,并继续以石油醚淋洗,由于碳酸钙对叶绿素中各种色素的吸附
亲和层析(Affinity-Chromatography)(1)
亲和层析(Affinity Chromatography)是利用生物分子间专一的亲和力而进行分离的一种层析技术。人们很早就认识到蛋白质、酶等生物大分子物质能和某些相对应的分子专一而可逆的结合,可以用于对生物分子的分离纯化。但由于技术上的限制,主要是没有合适的固定配体的方法,所以在实验中没有广泛的
吸附层析法的应用介绍
吸附色谱在生物技术领域有比较广泛的应用,主要体现在对生物小分子物质的分离。生物小分子物质相对分子质量小,结构和性质比较稳定,操作条件要求不太苛刻,其中生物碱、萜类、苷类、色素等次生代谢小分子物质常采用吸附色谱或反相色谱进行分离。吸附色谱在天然药物的分离制备中也占有很大的比例 。
柱层析的装柱方法
装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂
简述硅胶柱层析惯用方法
1.称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。 2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是
关于分配层析的基本介绍
分配色谱是色谱法之一种,利用固定相与流动相之间对待分离组分子溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂,依靠图布、键合、吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。 分配色谱过程本质上是组分分子在固定相和流动相之间不断达到溶解平衡的过程。
对免疫层析方法再认识
大多数的免疫层析(金标)产品快速检测只是定性的,只能用于检测临床样本中是否含有超过检测浓度的特定生物成分存在。然而,有许多的检测则需要定量的结果,例如监控临床指标的变化或确定特定分析物的相对或绝对浓度。这样的检测包括三种形式,第一种形式是,当进行测试时,许多内在的信号可出现测试结果在视觉上的对比,这
斑点免疫层析试验的原理
原理:免疫层析试验的原理与免疫渗滤相同,不同点在于液体的移动不是通过直向的穿流,而是基于层析作用的横流。在一塑料片条上依次粘贴如下组分:①吸水纸;②玻璃纤维膜,膜上固定着干燥的金标抗体;③硝酸纤维素膜,膜上包被着线条状的抗体;④吸水纸。
层析柱如何来选择
层析柱的质量关键要考虑以下几点:两端的4F塞是否密封质量好,中间的玻璃管的透明度以及耐压度,是否有相应的转换接头来控制进料高度,我们研究所用的是同兴玻璃的。
亲和层析的操作实验
亲和层析的操作实验 试剂、试剂盒 非特异性竞争 DNA 液氮 缓冲液 Z
关于凝胶层析的优点介绍
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
关于层析法的历史介绍
1903年3月21日俄国植物学家茨维特(Michael Tswett,1872-1919)在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”研究论文,介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法,并首先认识到这种层析现象在分离分析方面有重大价值。1906年他在德国植物学
免疫荧光层析技术
免疫层析技术因其简单、方便、易操作、快速,价格相对低廉,已广泛应用于即时检测(POCT)。随着POCT检测项目的增多和对已有项目检测定量、灵敏度、特异度等要求提高。 1免疫层析技术简介 免疫层析技术是在20世纪60年代在发达国家兴起并被用于检测血清蛋白的一种结合了免疫技术和色谱层析技术的快速
薄层层析操作关键点
薄层层析操作关键点1、铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀
凝胶层析的加样洗脱
凝胶床经过平衡后,在床顶部留下数亳升洗脱液使凝胶床饱和,再用滴管加入样品。一般样品体积不大于凝胶总床体积的5%-10%。样品浓度与分配系数无关,故样品浓度可以提高,但分子量较大的物质,溶液的粘度将随浓度增加而增大,使分子运动受限,故样品与洗脱液的相对粘度不得超过1.5-2。样品加入后打开流出口,使样
层析液的成分是什么
不同层析液的成分不同。主要有以下五种1、20份60℃-90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮、1份苯混合而成的层析液。2、9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合而成的层析液。3、汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠混合而成的层析液。4、体积分数为95%的酒精组成的层析液。5、92号汽油组成的层析液。
阳离子交换层析介绍
中文名称阳离子交换层析英文名称cation exchange chromatography定 义利用不同分子在所设计的条件(如pH、离子强度等)下,携带电荷情况不同,与阳离子交换剂结合的强度不同,可以用不同的条件洗脱出不同的组分的一种层析法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二
薄层层析的定性检测
薄层层析的定性检测:展开完毕后,把薄层从层析缸中取出,用铅笔划出或小针刺出展开剂前缘的位置,随即进行显色,以确定各个斑点的位置、Rf值和显色情况,从而判断试样中含有哪些组分。有色物质经展开后呈现明显的色斑,很易判断。对于无色物质,可根据化合物的性质,用物理检出法、化学检出法、酶与生物检出法和放射性检
离子交换层析的原理
离子交换层析法是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性,极性,所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离出来。层析开始前,功能基团与反离子稳定结合,就与反离子发生可逆交换,与层析剂
常用的层析填料有哪些
常用液相色谱填料的粒径有:1.8um、3um、5um,这些一般是用在分析柱上的。还有:10um、15um、20um、40um这些一般是用在制备色谱柱上的。
亲和层析(affinity-chromatography)技术
(一)原理亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。此法具有高效、快速、简便等优点。(
批量层析方法筛选-poly-(A)+-RNA
实验方法原理 当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时(
层析技术及离心技术
(一)层析技术层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。可分为吸附层析法、分配层析法、离子交换层析法、凝胶层析法、亲和层析法、高效液相层析法等。在层析法中,根据层析峰的位置及峰高或峰面积,可以定性及定量。层析法与光学、电学或电化学仪器连用,可检测出层析后各组分的浓度或质量,同时绘出层析图。
薄层层析分离原理
薄层层析分离是把支持剂均匀涂布于支持板(常用玻璃板和涤纶布等)上形成薄层,待分离样品点在支持板上,然后用相应的溶剂进行展开,使样品中各组分得到分离的过程。薄层层析分离根据固定相支持剂的不同,分薄层吸附层析分离、薄层分配层析分离、薄层离子交换层析分离和薄层凝胶层析分离等。一般实验中应用较多的是薄层吸附
DEAE-层析原理是什么
层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素、多糖等的一项技术。在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl,DEAE)纤维素。
层析技术的应用(六)
(五)聚焦层析法 聚焦层析是一种操作简单、廉价的层析技术。它的原理是根据各种蛋白质的等电点不同进行分离的过程,因此本方法具有高分辨、高度浓缩和高度专一等特点。聚焦层析所用的凝胶首先用高pH溶液平衡,然后用多元缓冲液进行洗脱,多元缓冲液pH呈梯度下降。聚焦层析所用凝胶主要有两种:MONOP和多元缓
阴离子交换层析介绍
中文名称阴离子交换层析英文名称anion exchange chromatography定 义一种含阴离子交换剂的层析系统,根据样品混合物中各成分所含负电荷数量的不同,从而对阴离子交换剂结合的强度不同而得以分离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
疏水层析的原理简介
疏水层析其原理如下:蛋白质表面一般有疏水与亲水基团,疏水层析是利用蛋白质表面某一部分具有疏水性,与带有疏水性的载体在高盐浓度时结合。在洗脱时,将盐浓度逐渐降低,因其疏水性不同而逐个地先后被洗脱而纯化,可用于分离其它方法不易纯化的蛋白质。
凝胶层析的加样洗脱
凝胶床经过平衡后,在床顶部留下数亳升洗脱液使凝胶床饱和,再用滴管加入样品。一般样品体积不大于凝胶总床体积的5%-10%。样品浓度与分配系数无关,故样品浓度可以提高,但分子量较大的物质,溶液的粘度将随浓度增加而增大,使分子运动受限,故样品与洗脱液的相对粘度不得超过1.5-2。样品加入后打开流出口,使样