层析的概念
小编为广大考生整理了生物化学名词解释,希望对大家考博复习有所帮助,下面是层析(chromatography)相关名词解释以及试题范例。层析是什么(概念)(chromatography)层析,即色层分析,利用各组分物理性质的不同,将多组分混合物进行分离及测定的方法,有吸附层析、分配层析两种,一般用于有机化合物、金属离子、氨基酸等的分析。层析的类别◆按层析的机理划分:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。◆按流动相与固定相的不同划分:气相层析、液相层析。◆按操作形式划分:柱层析、纸层析、薄层层析、高效液相层析等。以上划分无严格界限,有些名称相互交叉,如亲和层析应属于一种特殊的吸附层析,纸层析是一种分配层析,柱层析可做各种层析。色层分析法层析(色层分析法)即色谱法。起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科-色谱学。1952年英国科学家阿切尔·马丁(Archer JohnPorter ......阅读全文
层析技术的应用(五)
(四)亲和层析法 亲和层析是利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离目的的一类特殊层析技术。具有专一亲和力的生物分子对主要有:抗原与抗体、DNA与互补DNA或RNA、酶与它的底物或竞争性抑制剂、激素(或药物)与它们的受体、维生素和它的特异结合蛋白、糖蛋白与它相应的植物凝集素
分配层析的基本概念
分配色谱是色谱法之一种,利用固定相与流动相之间对待分离组分子溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂,依靠图布、键合、吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。分配色谱过程本质上是组分分子在固定相和流动相之间不断达到溶解平衡的过程。
离子交换层析法简介
离子交换层析法(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。常用的离子交换剂有:离子交换纤维素、离子交换葡聚糖和离子交换树脂 。
吸附层析法的应用介绍
吸附色谱在生物技术领域有比较广泛的应用,主要体现在对生物小分子物质的分离。生物小分子物质相对分子质量小,结构和性质比较稳定,操作条件要求不太苛刻,其中生物碱、萜类、苷类、色素等次生代谢小分子物质常采用吸附色谱或反相色谱进行分离。吸附色谱在天然药物的分离制备中也占有很大的比例 。
渗透层析的基本概念
中文名称渗透层析英文名称permeation chromatography定 义被分离的物质能进入固定相的层析系统,其中混合物的分离是根据固定相基质的选择性容纳和排阻的效应,如分子大小、形状的不同(分子筛层析)或电荷多寡的不同(离子交换层析)等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术
关于凝胶层析的优点介绍
它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。
批量层析方法筛选-poly-(A)+-RNA
实验方法原理 当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时(
关于层析法的历史介绍
1903年3月21日俄国植物学家茨维特(Michael Tswett,1872-1919)在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”研究论文,介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法,并首先认识到这种层析现象在分离分析方面有重大价值。1906年他在德国植物学
亲和层析实验:常规方法
实验步骤一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。
什么是柱层析技术?
柱层析技术(chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。 柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中
薄层层析的操作步骤
1.点样: ⑴ 样品的溶解:将样品溶于展开剂极性相近、挥发性高的有机溶剂。 ⑵ 薄层点样:用毛细管(0.5mm以下)或用专业点样器进行点样。 点样的要求:样点位置应在距离底边1-1.5cm处;点样量适当;样点直径小于2-3mm;间隔反复点样;多个样点时,间隔为2cm且处于同一条直线上。
层析技术概念、原理、分类
一、概念利用混和物中各组分理化性质(吸附力、分子形状、大小、分子极性、分子亲和力以及分配系数)的差异,在物质经过两相中进行分离的一种技术。本世纪初(1903年),俄国植物学家M.C.Jber发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素,还含有其他色素,实际上他使用的吸附层析。现在层系法已成为生化
层析液的成分是什么
不同层析液的成分不同。主要有以下五种1、20份60℃-90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮、1份苯混合而成的层析液。2、9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合而成的层析液。3、汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠混合而成的层析液。4、体积分数为95%的酒精组成的层析液。5、92号汽油组成的层析液。
薄层层析的分析程序
将样品溶液用毛细管点在薄层板的一端,置密闭槽中,加入适宜溶剂为流动相。由于毛细管原理,溶剂被吸上,沿板移动,并带动样品中各组分向前移动,这个过程称为展开。由于各组分性质不同,移动距离不同,展开一定距离后,即得互相分离的组分斑点。可用适当方法使各组分在板上显示其位置,如组分本身有颜色,即可直接观察,否
柱层析的基本概念
柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。
简述硅胶柱层析惯用方法
1.称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。 2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是
常用的层析分析方法
在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是
层析类型的划分和依据
◆按层析的机理划分:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。吸附层析:利用吸附剂表面对不同组分吸附性能的差异,达到分离鉴定的目的。分配层析:利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数不同,使之分离。离子交换层析:利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同。凝胶层析:利用某些凝胶对于不同
离子交换层析简要概述
离子交换层析(IEX)基于特定pH下的净电荷差异分离生物分子。蛋白电荷取决于可电离氨基酸侧链基团的数量和类型。每个蛋白具有等电点(pI),即负电荷和正电荷的总数为零的pH。在低于蛋白pI的缓冲溶液中,蛋白带正电并将结合阳离子交换树脂的带负电荷的官能团。在高于蛋白pI的缓冲液中,蛋白是带负电荷的,
薄层层析操作关键点
薄层层析操作关键点1、铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀
亲和层析的原理介绍
亲和层析是一种吸附层析, 抗原(或 抗体)和相应的 抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将 抗原(或 抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他 蛋白质分开,达到 分离提纯的目的。 此法具有高效、快速、简
气相色谱层析技术
(一)基本原理 混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。 利用气相色谱层析技术做为微生物诊断的工具已成功地用于微生物的分类和鉴定。该法敏感性强,能够分离和检测到毫微克的水平。它具有快速的特点,常在数十分钟甚至数小时就可以对传染病做出早期诊断。其结果稳定,重复性
亲和层析(Affinity-Chromatography)(2)
⑵基质的活化基质的活化是指通过对基质进行一定的化学处理,使基质表面上的一些化学基团转变为易于和特定配体结合的活性基团。配体和基质的偶联,通常首先要进行基质的活化。①多糖基质的活化多糖基质尤其是琼脂糖是一种常用的基质。琼脂糖通常含有大量的羟基,通过一定的处理可以引入各种适宜的活性基团。琼脂糖的活化方法
柱层析的装柱方法
装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂
常用的层析分析方法
在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、
非传统层析的生物分离方法连续层析工艺的相关内容
连续层析是一种逆流层析,被称为模拟移动床层析(SMB),它允许二元混合物以一种非常有效的方式分离。不过在生物制药中,二元混合物较少出现。逆流上样将是未来最流行的(伪)连续层析方法,用于从澄清培养液中捕获蛋白质和其他生物药物。集成连续工艺优选以流穿的方式进行,过程中杂质被结合,目标产品流出,这样可
凝胶过滤层析和离子交换层析分离蛋白质的原同
所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同.离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用.凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离.
离子交换柱层析分离核苷酸实验_离子交换层析法
本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。旨在了解并掌握RNA 碱水解的原理和方法,掌握离子交换柱层析的分离原理和方法,熟练掌握紫外吸收分析方法。实验方法原理本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离
凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量实验_凝胶过滤层析法
凝胶过滤也称排阻层析、分子筛层析和凝胶层析。本实验目的是了解凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量的基本原理,巩固柱层析的操作方法。实验方法原理凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Ch
序列特异性DNA结合蛋白亲和层析纯化实验_DNA亲和层析法
实验材料制备性的DNA亲和层析树脂试剂、试剂盒缓冲液Z或其他柱缓冲液(如缓冲液Ze或TM)配制时含不同的KCl浓度(从缓冲液 Z 0.1 mol L KCl 至缓冲液 Z 1 mol L KCl对缓冲液Z 0. 1 mol L KCl透析的部分纯化的蛋白质组分非特异性的竞争DNA柱再生缓冲液柱储存缓