PCR方法—常用的10种策略
PCR实验包括三大主要的热循环步骤 ，在这个过程中需要多种必要的反应成分 ，通过对PCR的设置做相应的调整，便可以获得一些特殊的实验结果，如产率提高，特异性增强或反应时间缩短等。 表 1.常用PCR方法及其核心优势热启动PCR常用于增强PCR扩增的特异性。该方法主要利用抗体、亲合配体、适体或化学修饰物等酶修饰酶，来抑制室温下的DNA聚合酶的活性。这种修饰使得在PCR体系配制阶段引物与模板、引物与引物之前的结合能力降低，从而避免了非特异性扩增。由于DNA聚合酶在室温下的活性被抑制，所以，热启动技术为在室温下配制多个PCR反应体系提供了极大的便利，且不会影响特异性和扩增能力。什么是热启动PCR？当反应体系配制好后，在反应初始加热阶段或“热启动”阶段，酶修饰物在高温下（通常高于90 ℃）被释放，使得DNA聚合酶被激活。具体激活时间和温度取决于DNA聚合酶以及热启动修饰物的性质。对某些DNA聚合酶而言，有时激活和起始变性步骤可......阅读全文
PCR测序的方法过程
PCR测序根据标记的方式不同和循环的次数不同可分为直接测序法和循环测序法。
PCR污染的防止方法
(一)合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行，特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开。最好能划分①标本处理区;②PCR反应液制备区;③PCR循环扩增区;④PCR产物鉴定区。其实验用品及吸样枪应专用，实验前应将实验室用紫外线
知晓PCR，定量PCR与数字PCR的实验方法与选择
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。一代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过将PC
废气处理常用方法
常用的废气处理方法有吸附法、吸收法、催化燃烧法、热力燃烧法等。选用废气处理方法时，应根据具体情况优先选用费用低、耗能少、无二次污染的方法，尽量做到化害为利，充分回收利用成分和余热。多数情况下，石油化工业因排气浓度高，喷漆车间废气处理采用冷凝、吸收、直接燃烧等方法；涂料施工、印刷等行业因排气浓度低，采
常用层析方法介绍
◆吸附层析吸附剂的吸附力强弱，是由能否有效地接受或供给电子，或提供和接受活泼氢来决定。被吸附物的化学结构如与吸附剂有相似的电子特性，吸附就更牢固。常用吸附剂的吸附力的强弱顺序为：活性炭、氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙、石膏、纤维素、淀粉和糖等。以活性炭的吸附力最强。吸附剂在使用前须先用加热脱水
常用采样方法介绍
1、三层五点法：按堆形和面积大小采用分区设点，或按食品堆高度采用分层采样、分区设点，每区面积不超过50m2，各设中心四角共五点；区数在两个以上的两区界线上的两个点为共有点。将样品分为上、中、下三层，在各层的四角和中间各取等量样本混合后，再取检验所需样本。2、刮涂法：在酒精灯火焰下燃烧灭菌的小刀（放凉
TOC常用检测方法
1.高温催化燃烧氧化 - 非色散红外探测（NDIR)：高温催化燃烧氧化的应用时间远比湿法氧化迟，但是因为高温燃烧相对彻底,可以适用于污染较重的江河、海水以及工业废水等水体。2.紫外(UV)- 湿法(过硫酸盐)氧化 - 非色散红外探测(NDIR)：这种方式是紫外氧化和湿法氧化两者协同作用,相互补充,相
常用菌种保藏方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力. 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的. 一、保藏方法大致可分为以下几种：
常用生物测试方法
①短期生物测试。常采用静态测试、定期换水或流水生物测试等方法。测试时间一般为4~7d，最多不超过14d，主要用于测定半致死浓度（LC50）或半效应浓度（EC50）。多用于对废水处理的出水测定、固体废物毒性测定、各种废水处理效率的比较、各类生物对污染物的敏感性比较等；并且，也为中期测试和长期测试提供污
常用浓缩方法介绍
在一些实验中，一些被测物经分离、净化后，样液的量比较多，被测定成分含量极其微小。例如痕量测定实验，在测定前需要浓缩样液，提高浓度，这样能提高分析的灵敏度。但是存在于这些被测物中的污染物存在性质不稳定，易氧化分解，浓缩过程一定应注意防止氧化分解，尤其是在浓缩至近干的时候，极易发生氧化、分解，这时需要在
常用田间取样方法
常用的取样方法有：五点取样、对角线取样、棋盘取样、平行线取样、“Z”字形取样等。1五点取样法从田块四角的两条对角线的交驻点，即田块正中央，以及交驻点到四个角的中间点等5点取样。或者，在离田块四边4～10步远的各处，随机选择5个点取样，是应用最普遍的方法。2对角线取样法调查取样点全部落在田块的对角线上
常用金相评定方法
常用金相评定方法1、石墨的测定（根据相关国标）2、夹渣物的测定（根据相关国标）3、基体组织的测定（根据相关国标）4．相关记录要在现场进行拍照，并且作出相关分析报告。5．显微镜的维护与保养1．卤素灯泡应轻轻插入灯座，长期不用应取下妥善保管。可调光电源旋扭应轻轻换档，调整部件及用后应随时关闭电源。2．目
常用菌种保藏方法
菌种保存方法微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种
常用菌种保藏方法
菌种保存方法微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种
塑料改性常用方法
塑料改性，指通过在塑料树脂中添加一种或多种其它物质，来达到改变其原有性能、改善一方面或多方面性能，从而达到拓展其适用范围之目的的方法。下面介绍几种常用的塑料改性方法。 一、增强 通过加入玻璃纤维、碳纤维、云母粉等纤维状或片状填料来达到增加材料刚性及强度的目的。如保险杠、仪表盘、后车门挡板
一文知晓PCR，定量PCR，数字PCR方法选择
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。diyi代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。
常用的物质分离方法介绍
1、分液：分离两种不互溶的液体，如分离油和水。2、萃取：加入适当溶剂把混合物中某成分溶解及分离，如庚烷、取水溶液中的碘。3、蒸馏：溶液中分离溶剂和非挥发性溶质，如海水中取得纯水。4、分馏：离两种互溶而沸点差别较大的液体，如液态空气中分离氧和氮、石油的精炼。5、升华：离两种固体,其中只有一种可以升华，
涂层厚度测量的常用方法
覆层厚度测量已成为加工工业、表面工程质量检测的重要一环，是产品达到优等质量标准的必备手段。为使产品国际化，我国出口商品和涉外项目中，对覆层厚度有了明确的要求。覆层厚度的测量方法主要有：楔切法，光截法，电解法，厚度差测量法，称重法，X射线荧光法，β射线反向散射法，电容法、磁性测量法及涡流测量法等。这些
色谱柱的常用填充方法
固定相填充的好坏，将直接影响柱效率。通常多用泵抽填充法，即把色谱柱的一端塞上玻璃棉，接真空泵，另一端接一漏斗，在抽吸下加入固定相，边装边敲打色谱柱，至固定相不再进入为止。装好后，塞上玻璃棉。装柱要求要填充得均匀，紧密，切忌有空隙。
细胞凋亡试验常用的方法
细胞凋亡试验常用的方法（MTT法、荧光法、DNA琼脂糖凝胶电泳法与流式细胞仪检测法）（一）药物对肿瘤细胞的抑制效应的MTT法：用培养基将肿瘤细胞调整至2 X108个/L，在96孔板中每孔加入100ul细胞悬液于37℃、5% CO2下培养过夜。次日每孔加入不同浓度的药物100mg/L作为试验组，设加完
痕量分析的常用方法
化学光谱法常用于测定高纯材料中痕量杂质，对分析99.999～99.9999%纯度材料，效果好，测定下限可达μg至ng级。此法须先用液-液萃取、挥发、离子交换等技术分离主体，富集杂质，再对溶液干渣用高压电火花或交流电弧光源进行光谱测定；或在分离主体后，把溶液浓缩到2～5ml，用高频电感耦合等离子体作光
常用的层析分析方法
在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是
血氨测定的常用方法
（1）直接显色测定法：在床旁取静脉血2ml，以钨酸沉淀蛋白后，用酚——次氯酸盐显色，参照标准计算氨含量。如严格掌握实验条件，本法分析结果能满足临床要求。（2）谷氨酸脱氢酶速率法：血浆中的氨在足量的α-酮戊二酸和NADPH存在时，经谷氨酸脱氢酶作用生成谷氨酸，并消耗NADPH，NADPH的下降速率与血
比浊法的常用方法
（1）目视比浊法目视比浊法就是指用眼睛观， 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准，然后在同样的实验条件下，将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。（2）免疫比浊法免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。（3）光电比浊法当光束通过悬浊液时, 由于被散射或吸
常用的层析分析方法
在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。
真空镀膜的常用方法
(1)真空蒸镀：将需镀膜的基体清洗后放到镀膜室，抽空后将膜料加热到高温，使蒸气达到约13.3Pa而使蒸气分子飞到基体表面，凝结而成薄膜。(2)阴极溅射镀：将需镀膜的基体放在阴极对面，把惰性气体(如氩)通入已抽空的室内，保持压强约1.33～13.3Pa，然后将阴极接上2000V的直流电源，便激发辉光放
菌种保存的几种常用方法
微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于zui不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种：
残留溶剂的常用检测方法
早期用来测定药品中残留溶剂的方法是干燥失重测定法。也就是通过加热过程中，样品的质量减失来测定残留溶剂的含量。这种方法的最大缺点就是非专属性。只能对其总量分析而无法对定性鉴别，而且水分也会干扰残留溶剂的测定。分光光度法也通常利用特定溶剂和特定化学试剂的反应测定药品中的残留溶剂，虽然专属性尚可，但灵敏度