流式细胞术的应用分析与质量控制(二)
第六,细胞与抗体的比例:厂家推荐的抗体用量通常是假定靶细胞数量在5X105 ~1x106范围内。有些标本没有足够的细胞,有些则由于细胞量大,正常浓度下的抗体相对过量或不足,导至假阳性或假阴性结果。因此,每个实验室应根据不同于厂家推荐的方法,调整细胞与抗体用量,得到最适的细胞/抗体比例。 第七,细胞活性的鉴定:死细胞对许多抗体均有很强的非特异性染色,这就使样本细胞活性检测变得非常重要,尤其是经过了长时间运输和储存的样本。检测的方法通常有两种 ① 实时的流式检测:利用荧光染料碘化吡啶(PI)、7氨基放线菌素D(7-AAD)或EMA(ethidium monoacide)进行死细胞染色,而活细胞拒染这些染料。此方法的优势是细胞表面标志和活性分析可同时进行。尤其适用于高度坏死的样本。7-AAD最常用,因为在488nm激发下,其最大发射光在670nm左右,适合与FITC 或PE进行多色标记。但随着时间延长,7AAD......阅读全文
流式细胞术的应用分析与质量控制(二)
第六,细胞与抗体的比例:厂家推荐的抗体用量通常是假定靶细胞数量在5X105 ~1x106范围内。有些标本没有足够的细胞,有些则由于细胞量大,正常浓度下的抗体相对过量或不足,导至假阳性或假阴性结果。因此,每个实验室应根据不同于厂家推荐的方法,调整细胞与抗体用量,得到最适的细胞/抗体比例。 第
流式细胞术的应用分析与质量控制(一)
随着对FCM研究的日益深入,其价值已经从科学研究走入了临床应用 阶段,在我国临床医学领域里已有着广泛的应用。可用于白血病的分型、肿瘤细胞染色体的异倍性测定,以及免疫学研究,并已开始用于细菌鉴定,病毒感染细胞的识别和艾滋病感染者T4、T8细胞的记数。自70年代以来,随着流式细胞技术水平的不断提高,其应
流式细胞术质量控制
流式细胞术(flow cytometry,FCM)越来越广泛的应用在临床检验中。由于临床检验本身的性质,它要求临床检验的管理者和操作人员必须把好常规操作已经结果分析的质量关。同时还必须懂得如何判断分是在控还是失控。作为临床检验工作,其工作的质量标准就是使检验的结果最佳地符合病人有无病变的实际情况。在
流式细胞术实验样本的质量控制
用于流式分析的样本种类很多,包括外周血、骨髓穿刺液、骨髓活检物、组织活检物、浆膜腔积液、脑脊液、皮肤、黏膜(内窥镜活检物)、细针穿刺物等等。样本的条件控制可能是免疫表型分析质控最困难的环节之一。每种样本都有不同的采集、保存、运输和制备要求。观测样本外观:有严重溶血、凝聚或坏死的样本应弃用。
FTIR应用质量控制与失效分析
质量控制与失效分析 质量控制 FT-IR光谱仪ALPHA II可实现对进厂原料的快速可靠和普遍适用的鉴别控制:颗粒状物热塑性塑料、弹性体、橡胶单体填料添加剂塑料制品(薄膜、纤维、零部件) 通常,进行分析无需样品制备,在几秒内即可提供结果。如果检测的原料是正确原料,那么,分析结果就会自动被告知用户
流式细胞术原理与应用详解
研究实验中,我们常常用到一个高大上的仪器――流式细胞仪,而与之相对应的就是流式细胞术,可是大家对它们都了解多少呢?今天小编就带着大家好好地认识一下~流式细胞术流式细胞术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行多参数、快速定量分析和分选
【干货】流式细胞术原理与应用详解
研究实验中,我们常常用到一个高大上的仪器――流式细胞仪,而与之相对应的就是流式细胞术,可是大家对它们都了解多少呢?今天小编就带着大家好好地认识一下~ 流式细胞术 流式细胞术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行多参数
流式细胞术的应用
(一)流式细胞术在细胞生物学中的应用流式细胞术最早被应用于生物学研究领域,就是生物细胞周期和动力学的分析。近年来,DNA倍体分析已经越来越广泛应用于临床和基础研究,发挥越来越重要的作用。1. 有利于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断 良性肿瘤或良性增生时不会出现非整倍体细胞(DI>1),而恶性肿瘤则伴有相当数
流式细胞术在血液学中的应用(二)
白血病免疫分型其临床意义 目前公认的系列特异性指标是:T淋巴细胞系--胞浆CD3(cCD3),B淋巴细胞系-- cCD22或cCD79,髓系---MPO 或cCD13,一般可先用他们区分细胞系列后再进一步分析某一系列亚型和分化阶段。1. ALL的免疫学分型1986年前分为普通型ALL(cALL)、未
流式细胞术在血液学中的应用(二)
二、 流式细胞术在血液病学中应用(一)白血病的分类研究 B-cell ALL 1.TdT positive. 2.CD10 positive, except for progenitor B-cell ALL. 3.HLA-DR positive. 4
流式细胞术的临床应用
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种能够对单个细胞或生物微颗粒的生物学性质进行定量分析和分选的检测手段,具有快速、高精度、高准确性、多参数和高通量等优点,是目前先进的细胞定量分析技术之一。FCM能够快速分析单个细胞或粒子的多种特性,既可以定性,也可以定量,尤其适用于大量样品检
流式细胞术的应用特点
应用特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞 DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开,以获得供生物学和医学研究用的纯细胞群体。
流式细胞术的应用范围
随着对FCM研究的日益深入,其价值已经从科学研究走入了临床应用阶段,在我国临床医学领域里已有着广泛的应用。可用于白血病的分型、肿瘤细胞染色体的异倍性测定,以及免疫学研究,并已开始用于细菌鉴定,病毒感染细胞的识别和艾滋病感染者T4、T8细胞的记数。 自70年代以来,随着流式细胞技术水平的不断提高
流式细胞术的应用介绍
流式细胞术在很多领域中都有应用,包括分子生物学、病理学、免疫学、植物学、和海洋生物学等[11]。在分子生物学中,它主要用于荧光标记的抗体。特异性的抗体与靶细胞上的抗原结合,能够通过流式细胞仪研究这些细胞的特别信息。这在医学中具有很广泛的应用,尤其是在器官移植、血液学、肿瘤免疫学和化疗、遗传学、精子分
质量控制计划在流式细胞术抗体特异性验证实验中的应用案例分享
以下是一个质量控制计划在流式细胞术抗体特异性验证实验中的应用案例:实验目的:验证一种新研发的抗 CD4 抗体在流式细胞术中的特异性质量控制计划:抗体采购与验收从知名供应商购买抗体,并要求提供详细的产品说明书和质量检测报告。到货后,检查抗体的外观、包装完整性,并使用微量分光光度计测定抗体浓度,与说明书
流式细胞术在高等植物研究中的应用(二)
3.流式细胞术在高等植物中的应用3.1应用于植物中的特殊性由于植物细胞与动物细胞在结构上的差异,例如植物细胞具有细胞壁、特殊细胞器以及中央液泡等,因此流式细胞术应用于植物细胞时,在样品制备、染色、仪器的改造等方面都应适应植物细胞的上述特点。3.1.1制备植物染色体悬液的材料1984年De Laat和
临床输血质量控制与流程(二)
②.采集血样A)采血护士资质:采集血型和交叉配血血样,护士要求必须有初级以上护士职称,实习/进修护士不得进行。B)明确患者用血申请,核对患者姓名、性别、年龄、住院号、科别、床号等信息。C)准备采血材料,并明确以下内容:正确的标本量;正确的容量;正确的标识:姓名、性别、住院号、床号、采血日期、采血者签
流式细胞分析术的特点
一、流式细胞术发展简史流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③是一门综合性
流式细胞分析术的特点
一、流式细胞术发展简史流式细胞术(FlowCytometry,FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③是一门综合性
流式细胞分析仪的操作技术的质量控制
(1)光路与流路校正:主要目的在于确保激光光路与样品流处于正交状态,使仪器检测时的变异减少到最小,从而控制仪器的CV值,校正物为Flow-checkFluoropheres。(2)PMT校准:对光电倍增管的校正是流式细胞仪在使用前进行的一项重要质控指标,为保证样品检测时仪器处于最佳灵敏度工作状态,采
简介流式细胞术的应用范围
随着对FCM研究的日益深入,其价值已经从科学研究走入了临床应用阶段,在我国临床医学领域里已有着广泛的应用。可用于白血病的分型、肿瘤细胞染色体的异倍性测定,以及免疫学研究,并已开始用于细菌鉴定,病毒感染细胞的识别和艾滋病感染者T4、T8细胞的记数。 自70年代以来,随着流式细胞技术水平的不断提高
简介流式细胞术的临床应用
FCM通过荧光抗原抗体检测技术对细胞表面抗原分析,进行细胞分类和亚群分析。这一技术对于人体细胞免疫功能的评估以及各种血液病及肿瘤的诊断和治疗有重要作用。有大量文章介绍了淋巴细胞亚群等在各种疾病中的变化。正常人群淋巴细胞T4/T8比值大约为2∶1,但在人体细胞免疫力低下时可出现比例倒置。用FCM还
尿液分析仪应用的质量控制
(一)尿液质量控制的一般情况在常规试验中,虽然尿液分析仪的使用一般不受人为因素的影响,但尿液分析准确与否却受许多因素的影响。这些影响因素可以出现在分析前、中、后三个环节。分析前的质量控制(简称质控)主要包括样品的标签、收集样吕使用的容器和样品收集的时间、尿标本新鲜程度等。一般均应在取样后2小时内完成
流式细胞术应用-|-小鼠脾细胞表型分析简便操作
实验简介脾脏是机体最大的免疫器官,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心,ft 机体免疫失衡时,免疫细胞的数量和比例都会发生变化,流式细胞仪能够直接检测出该变化的发生。该实验通过一个优化设计的 8 色方案,检测出了小鼠脾脏中 T、B 细胞亚群以及 FOXp3 的表达,从图中可以
流式细胞术应用-|-小鼠脾细胞表型分析简便操作
实验简介脾脏是机体最大的免疫器官,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心,ft 机体免疫失衡时,免疫细胞的数量和比例都会发生变化,流式细胞仪能够直接检测出该变化的发生。该实验通过一个优化设计的 8 色方案,检测出了小鼠脾脏中 T、B 细胞亚群以及 FOXp3 的表达,从图中可以
流式细胞分析术的工作原理
流式细胞计是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一
流式细胞分析术的工作原理
流式细胞计是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一
流式细胞术分析血小板
血栓性疾病、出血性疾病、心血管疾病以及自身免疫性血小板减少症等疾病的病生理过程与血小板相关。血小板功能检测包括黏附、聚集和活化功能试验。使用流式细胞仪检测全血中血小板表面相关标志物是一种新技术,它拓宽了血小板相关疾病的诊断与功能研究方法,丰富了血小板功能评估指标。流式细胞仪血小板分析应用范围通过分
流式细胞分析分选术1
1. 96 孔板样本处理 1.1 操作流程 接种细胞:3×104 /孔 药物刺激 一般作用24 小时,上机 1.2 方法 在cellquest 环境下,利用control 细胞标定上样条件,并在已设好的文件 夹(INS 文件及SET 文件)下,保存好需要的上样文件 关闭cellqest 软件, 打开
流式细胞分析分选术2
第七章 流式细胞分析分选术 47 转染24 小时后,一旦观察到经RIP 转染的细胞明显死亡,即可收获细胞。 每板分别收集培养液,在每个6cm 板中加入1ml 胰酶(细胞消化的方法同上), 消化完毕,加入已收集的培养液(注意一一对应,防止弄错)中和胰酶,离心(300g, 5min)收集细胞。 3.4