流式细胞术的应用分析与质量控制(二)
第六,细胞与抗体的比例:厂家推荐的抗体用量通常是假定靶细胞数量在5X105 ~1x106范围内。有些标本没有足够的细胞,有些则由于细胞量大,正常浓度下的抗体相对过量或不足,导至假阳性或假阴性结果。因此,每个实验室应根据不同于厂家推荐的方法,调整细胞与抗体用量,得到最适的细胞/抗体比例。 第七,细胞活性的鉴定:死细胞对许多抗体均有很强的非特异性染色,这就使样本细胞活性检测变得非常重要,尤其是经过了长时间运输和储存的样本。检测的方法通常有两种 ① 实时的流式检测:利用荧光染料碘化吡啶(PI)、7氨基放线菌素D(7-AAD)或EMA(ethidium monoacide)进行死细胞染色,而活细胞拒染这些染料。此方法的优势是细胞表面标志和活性分析可同时进行。尤其适用于高度坏死的样本。7-AAD最常用,因为在488nm激发下,其最大发射光在670nm左右,适合与FITC 或PE进行多色标记。但随着时间延长,7AAD......阅读全文
流式细胞术在移植中的应用
实验步骤展
流式细胞术在移植中的应用
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流式细胞术的发展和临床应用
流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项高新技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测。我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪,到目前在医学院校、科研机构和医院已经有100多台。 FCM采用流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析,通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐
流式细胞术在移植中的应用
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流式细胞术的技术特点和应用
流式细胞术是一种生物学技术,用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术(Flow CytoMetry,FCM)是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号,实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。其特
流式细胞术的发展和临床应用
流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项高新技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测。我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪,到目前在医学院校、科研机构和医院已经有100多台。 FCM采用流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析,通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检
流式细胞术的发展和临床应用
流式细胞术(FCM)是70年代初发展起来的一项高新技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测。我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪,到目前在医学院校、科研机构和医院已经有100多台。 FCM采用流式细胞仪对细胞悬液进行快速分析,通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检
流式细胞术检测细胞的应用介绍
流式细胞术检测细胞的结果在以下众多研究领域都有广泛应用:免疫学:分析免疫细胞的表型,如 T 细胞、B 细胞、NK 细胞等表面标志物的表达,评估免疫细胞的活化状态和分化阶段。检测细胞因子的分泌,研究免疫细胞的功能。进行免疫细胞的分选,用于后续的功能研究或细胞治疗。肿瘤学:肿瘤细胞的鉴定和分型,检测肿瘤
Maurice-iCIEF法在疫苗质量控制的应用(二)
Merck疫苗分析和开发部门第一次基于成像毛细管等电聚焦(iCIEF)表征LNPS包装的mRNA的疫苗。他们利用iCIEF,通过对两性电解质以及甘油的添加来优化检测LNP的表观pI。确定好优化条件后,对不同LNP样品的三种独立制剂之间的pI进行重复性检测,结果显示三次样品的峰形保持一致,重现性很好。
Maurice-iCIEF法在疫苗质量控制的应用(二)
Merck疫苗分析和开发部门第一次基于成像毛细管等电聚焦(iCIEF)表征LNPS包装的mRNA的疫苗。他们利用iCIEF,通过对两性电解质以及甘油的添加来优化检测LNP的表观pI。确定好优化条件后,对不同LNP样品的三种独立制剂之间的pI进行重复性检测,结果显示三次样品的峰形保持一致,重现性很好。
关于流式细胞术实验的室间质量评价
开展内部的质量控制使实验的受控项目达到一定的精密度。临床上往往只对实验结果是否可重复较敏感,若实验结果存在较稳定的系统误差,临床和实验室一般不易察觉,因此内部的质量控制还在于控制结果的不精密度。由专门机构定期向临床实验室分发质控品,要求各单位检测后返回测定结果,经过整理和统计,以数据和报告形式反
分析技术在中药质量控制中的应用
作为中药质量常规检验的分析技术在可预见的未来仍然将是TLC HPLC GC占主导地位, CE 将会逐步进入常规检验的层面,这从中国药典2000年版一部的内容也可反映出来。TCL一开始是以简单快速的鉴别为起点,20世纪60年代以后很快取代了纸色谱技术。所以至今仍然在中药以及欧美国家草药鉴别应用的频率最
流式细胞术临床检验的分析过程
在开始使用质控物的第一个月内,检验人员每天将质控物随机插入病人标本中进行检验项目的测定。月末对当月的测定结果(n≥20)做简单统计,求出均值x和标准差s。若检验结果的分布接近正态分布,结果的分布即可用均值和标准差来描述。这就意味着95.5%的结果在x+2s范围内,99.7%的结果在x+3s范围内
流式细胞术在生殖医学中的应用
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流式细胞术在生殖医学中的应用
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流式细胞术在PNH诊断中的应用
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流式细胞术在生殖医学中的应用
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流式细胞术在PNH诊断中的应用
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流式细胞术在临床检验中的应用
付海龙(蚌埠医学院研究生部)赵亚萍(解放军82医院检验科)流式细胞术(flow cytometry,FCM)是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学、流体力学、激光技术、电子计算机技术等高度结合和发展的结晶,是一种在功能水平上对单细胞或其他细胞粒子、抗原物质进行快速检测分析和分选的技术〔1〕。FCM
流式细胞术在环境检测中的应用
随着流式细胞术的发展,流式细胞仪越来越多的使用在环境相关的研究及检测中。相对于传统的平板法与显微计数法,流式细胞术具有快速、灵敏、精确并能进行多参数分析的特点,且在后期使用成本上具有一定的优势。自 1993 年流式细胞仪首次运用于活性污泥中微生物群落结构分析以来,该技术逐渐成为空气、土壤、水等环境中
灰铸铁的质量控制与灰铸铁碳硅分析仪的应用
灰铸铁的质量控制与灰铸铁碳硅分析仪的应用目前机床铸件大部分为灰铸铁,对于灰铸铁件的质量,要从化学成分、原材料质量、配料、合金化、熔炼温度、孕育处理直至热时效等环境严格控制。 1、熔炼环节 1)碳当量。应采用较高的碳当量,HT250,以3.95为好;HT300,以3.82为好;HT350,以3.7
如何看流式细胞术结果中的图?(二)
Q2:“Gate”和 “Regin”?设门是流式细胞分析中一种重要的技术,只有通过最佳的设门方式,才能准确地获取和分析数据,从而得到临床诊断和科研中有价值的信息。On-line gating(threshold gating)监测/获取数据Off-line gating: 分析实验数据
流式细胞术的工作原理与发展综述
摘要:流式细胞术(flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。是一项多学科交叉研究的结晶。流式细胞术及流式细胞仪的出现融合了医学,计算机学,物理学等众多学科背景。。它不仅测量速度快、准确度好、灵敏度高,而且还
流式细胞术
一. 流式细胞术概述流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体, 同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,可对
PerkinElmer中药分析与质量控制应用报告会邀请函
由于中药的种类繁多、所涉及的检测项目和检测手段也很广,使用有效、科学的方法实现中药、中成药、中药材的质量控制和原料产地的鉴别是药品生产企业非常关心的课题。美国PerkinElmer公司作为一家全球领先的科学仪器制造公司可以提供从原子光谱、分子光谱、色谱等多种仪器与检测手段,帮助中药生产企业实现中
如何制定质量控制计划以适应不同的流式细胞术抗体特异性验证实验?
制定质量控制计划以适应不同的流式细胞术抗体特异性验证实验可以考虑以下步骤:明确实验目的和要求:确定要验证的抗体类型、目标抗原以及预期的检测结果。了解实验的精度、准确性和灵敏度要求。确定关键控制点:抗体的选择和采购:包括抗体的来源、克隆号、特异性、亲和力等。抗体的储存和使用条件:如温度、湿度、光照等。
有关流式细胞术的数据分析介绍
在数据分析中,百分率、荧光强度、DNA指数(DI)、多少个/ul是我们报告中常用的。百分率主要适用于检验指标集中在细胞有无的数量变化。如T细胞亚群检测、网织红细胞检测等;荧光强度主要适用于检验指标的变化集中在细胞上抗原量的多少。如血小板无力症(GT)的检测、慢性淋巴细胞白血病(CLL)CD20的
流式细胞术在血液学中的应用
DNA倍体分析及细胞周期分析 在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞
流式细胞术在免疫学中的应用
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是二十世纪70年代发展起来的,是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型技术,能够对处在快速直线流动状态中的细胞或微球进行多参数的、快速的定量分析和分选,且能保持细胞及细胞器或微粒