GFP：荧光蛋白的起源
绿色荧光蛋白(简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。GFP的荧光非常稳定，在激发光照射下，其抗光漂白能力比荧光素强很多。因此GFP及其变种被广泛地用作分子标记；此外，GFP还被用作砷和一些重金属的传感器。 1962年，下村脩和约翰逊在一篇纯化水母素的文章提到从水母中发现了荧光蛋白（GFP），正式开启了生物发光研究的大门。2008年10月8日，日本科学家下村修、美国科学家马丁•查尔菲和钱永健因为发现和改造绿色荧光蛋白而获得了当年的诺贝尔化学奖。而萤光蛋白的故事要从53年前讲起。 1955年Davenport和Nicol发现水母可以发绿光，但不知其因，未深入研究，错过了一次获得诺奖的机会。 1956年，下村修从海萤体内提取出一种蛋白质，发光亮度比海萤本身强3.7万倍。因为这项发现，下村修不仅被名古屋大学破例授予博士学位，晋升助理教授，还引起美国普林斯顿大学学者弗......阅读全文
GFP在大肠杆菌中的诱导表达和细菌蛋白的超声破碎抽提
[实验原理] 把含有外源基因的表达载体转化的大肠杆菌在有相应抗菌素和诱导物的条件下培养，可以诱导外源蛋白在大肠杆菌中表达。利用溶菌酶、反复冻融或超声波破碎的方法将诱导培养的细菌的细胞壁破碎后，可使那些可溶性的外源蛋白释放出来，再利用硫酸铵沉淀、蛋白质层析技术和制备电泳等方法能够将外源
荧光探针研究获进展－实现单一波长激发双色荧光成像
近日，中国科学院深圳先进技术研究院副研究员储军主持研发的新型大斯托克斯位移荧光蛋白取得突破，实现了在小鼠脑内单一波长激发双色荧光成像和高灵敏的生物发光成像。该工作以A bright cyan-excitable orange fluorescent protein facilitatesdual
肿瘤细胞的标记及活体荧光成像
摘要 以绿色荧光蛋白( GFP) 作为标记基因转入人类肺癌细胞系(ASTC2a21) , 经800 mg/ L G418 筛选, 获得5 株高表达细胞系. 利用流式细胞仪对GFP 表达的稳定性进行了初步研究, 结果表明本实验中有些细胞株间GFP 表达稳定性有显著差异( P < 0101) . 将稳定
生物发光技术研究及其应用进展
摘要：目的：了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。方法：对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。结果：生物发光有两类，机理明确，应用广泛。结论：生物发光在很多领域的应用日趋广泛，对其深入了解和研究至关重要。生物发光是生物发光器在细胞或生物体内发
生物发光技术研究及其应用进展
摘要： 目的：了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。 方法：对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。 结果：生物发光有两类，机理明确，应用广泛。 结论：生物发光在很多领域的应用日趋广泛，对其深入了解和研究至关重要。
绿色荧光蛋白药物筛选应用研究
药物筛选 许多新发展的光学分析方法已经开始利用活体细胞来进行药物筛选，这一技术能从数量众多的化合物中快速筛选出我们所感兴趣的药物。基于细胞的荧光分析可分为三类：即根据荧光的密度变化、能量转移或荧光探针的分布来研究目标蛋白如受体、离子通道或酶的状态的变化。荧光探针分布是利用信号传导中信号分子的迁
细胞计数仪的选型指导（三）
2）K2型号—双荧光细胞分析仪 K2型号计数仪是即AUTO2000型号之后的另外一款双荧光细胞计数仪。这款型号除了细胞活力分析功能，还可以选配FCS EXPRESS流式软件，进行细胞凋亡、细胞周期、转染后GFP蛋白表达等的检测分析。 特点： a.电脑操控软件； b.双荧光和明场成像：用于AO/PI
载体构建中常用的选择标记基因和报告基因是什么
报告基因的主要作用是标记转化细胞，起报告和识别作用。常用的有Gus基因（β-葡萄糖苷酸酶基因），该基因来自大肠杆菌染色体上的uidA座位，编码β-葡萄糖苷酸酶。绝大多数植物不存在内源的Gus基因活性，因而Gus基因被广泛用作转基因植物的报告基因。常用的检测方法有组织化学染色定位法、荧光检测法和分光光
载体构建中常用的选择标记基因和报告基因是什么
报告基因的主要作用是标记转化细胞，起报告和识别作用。常用的有Gus基因（β-葡萄糖苷酸酶基因），该基因来自大肠杆菌染色体上的uidA座位，编码β-葡萄糖苷酸酶。绝大多数植物不存在内源的Gus基因活性，因而Gus基因被广泛用作转基因植物的报告基因。常用的检测方法有组织化学染色定位法、荧光检测法和分光光
自噬流的检测方法
自噬是真核细胞降解长寿蛋白、错误折叠蛋白和受损细胞器的重要生物学过程。细胞自噬由多个步骤组成, 其中包括: ① 吞噬泡的形成； ② 自噬体的形成； ③ 自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体； ④ 自噬溶酶体的降解。自噬流是这些步骤在细胞内连续出现的动态过程, 自噬流中的任一环节出现障碍自噬将无法完成
报告基因分类及优缺点
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件：（1）全序列已测定（2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，
绿色荧光蛋白的功能介绍
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
绿色荧光蛋白的功能特点和作用
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
免疫双扩散检测抗GFP血清抗体
实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇，当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物，这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时，在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线，这叫免疫双扩散实验
免疫双扩散检测抗GFP血清抗体
实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇，当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物，这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时，在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线，这叫免疫双扩散实验
GFP骨的冰冻切片实验方法
Protocol for Frozen section of GFP Bone:Fix the bone in 4% Paraformaldehyde at 4�C under constant agitation for 3 days.Decalcification in 14% EDTA sol
Nature子刊：首个电镜版GFP问世
绿色荧光蛋白GFP曾给分子生物学领域带来了一场革命，科学家们用GFP标记细胞内的特定蛋白，就能够通过荧光显微镜轻松的进行识别和定位。但GFP无法用于电镜，而电镜的分辨率可比荧光显微镜高多了。 日前，麻省理工的化学家们就开发出了类似GFP的电镜标记，利用这一新技术科学家们可以在电镜下观察标记的蛋白，
绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的吗
绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的（1）在该实验中，绿色荧光蛋白基因是目的基因．（2）③是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是动物细胞时，采用最多也最有效的方法是显微注射技术．（3）GFP基因可以作为标记基因，标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因．（4）动物细胞培养时，其培养
绿色荧光蛋白的概念和发现
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
关于绿色荧光蛋白的简介
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是
揭秘神奇荧光蛋白：让老鼠和猪也“发光”
据美国《连线》杂志报道，凭借在绿色荧光蛋白质(GFP)研究领域取得的重要成就，3名科学家上周最终问鼎诺贝尔化学奖，他们分别是马丁·查尔菲(Martin Chalfie)、钱永健(Roger Y. Tsien)和下村修(Osamu Shimomura)。绿色荧光蛋白质可以帮助科学家了解细胞机制如何工作
体视显微镜荧光适配器用于小鼠胚胎筛选
NIGHTSEA体视显微镜荧光适配器(SFA，Stereo Microscope Fluorescence Adapter)应用于筛选GFP阳性的小鼠胚胎并解剖脊髓 实验目的研究者为了研究运动和感觉神经元的生理属性，需要收集出生12-13天带有特殊特性小鼠胚胎的脊髓。然而，只有50%的小鼠胚胎带有特
植物多光谱荧光成像系统配置规格
1) 一体式：可进行叶绿素荧光成像分析及UV紫外光源激发4个波段的荧光成像分析，成像面积13 x 13cm，系统高度集成（整体配置于一个一体式暗适用操作箱内）、方便使用，具备7位滤波轮及多光谱荧光成像滤波器组、高分辨率CCD镜头、UV紫外光激发多光谱荧光成像功能模块及程序软件等；具体又有如下几种
新型“化骨绵掌”——纳米级细胞蛋白质水平调控平台
莱斯大学的化学和生物分子工程师Laura Segatori师从双功能识别系统“NanoDeg”创始人Lara Pferdehirt博士（本科）和Wenting Zhao博士（研究生）。该系统允许操作者靶向细胞特定蛋白质，通过加速蛋白水解，控制靶蛋白翻译后的水平，严格调节它们的降解。 这种“即插
生物发光技术研究及其应用进展
摘要： 目的：了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。 方法：对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。 结果：生物发光有两类，机理明确，应用广泛。 结论：生物发光在很多领域的应用日趋广泛，对其深入了解和研究至关重要。
生物发光技术研究及其应用进展
摘要：目的：了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。方法：对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。结果：生物发光有两类，机理明确，应用广泛。结论：生物发光在很多领域的应用日趋广泛，对其深入了解和研究至关重要。生物发光是生物发光器在细胞或生物体内发
LUYOR3415RG荧光蛋白观测镜常见问题解答
LUYOR-3415RG荧光蛋白观测镜常见问题解答 荧光蛋白观察镜常见问题解答 1.为什么荧光显微镜能观察到，用荧光蛋白观测镜看不到？ 因为有些植入的荧光蛋白不是整体表达，只是局部表达，表达的面积太小，人的肉眼无法识别，而荧光显微镜是在放大几十倍甚至上百倍观察的效果。 2
高灵敏度的生物发光探针问世
近日，中国科学院深圳先进技术研究院副研究员储军主持研发的新型大斯托克斯位移荧光蛋白取得重要突破，实现了在小鼠脑内单一波长激发双色荧光成像和高灵敏的生物发光成像。 这里的斯托克斯位移指的是荧光物质的最大发射波长和最大激发波长之差，差值若大于100 nm，则认为该荧光蛋白具有大斯托克斯位移的特性
什么是绿色荧光蛋白
绿色荧光蛋白分子的形状呈圆柱形，就像一个桶，负责发光的基团位于桶中央，因此，绿色荧光蛋白可形象地比喻成一个装有色素的“油漆桶”。装在“桶”中的发光基团对蓝色光照特别敏感。当它受到蓝光照射时，会吸收蓝光的部分能量，然后发射出绿色的荧光。利用这一性质，生物学家们可以用绿色荧光蛋白来标记几乎任何生物分子或
绿色荧光蛋白的应用
由于荧光蛋白能稳定在后代遗传，并且能根据启动子特异性地表达，在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。更多地，荧光蛋白被改造成了不同的新工具，既提供了解决问题的新思路，也可能带来更多有价值的新问题。