GFP：荧光蛋白的起源
绿色荧光蛋白(简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。GFP的荧光非常稳定，在激发光照射下，其抗光漂白能力比荧光素强很多。因此GFP及其变种被广泛地用作分子标记；此外，GFP还被用作砷和一些重金属的传感器。 1962年，下村脩和约翰逊在一篇纯化水母素的文章提到从水母中发现了荧光蛋白（GFP），正式开启了生物发光研究的大门。2008年10月8日，日本科学家下村修、美国科学家马丁•查尔菲和钱永健因为发现和改造绿色荧光蛋白而获得了当年的诺贝尔化学奖。而萤光蛋白的故事要从53年前讲起。 1955年Davenport和Nicol发现水母可以发绿光，但不知其因，未深入研究，错过了一次获得诺奖的机会。 1956年，下村修从海萤体内提取出一种蛋白质，发光亮度比海萤本身强3.7万倍。因为这项发现，下村修不仅被名古屋大学破例授予博士学位，晋升助理教授，还引起美国普林斯顿大学学者弗......阅读全文
黄色荧光蛋白的应用
像绿色荧光蛋白一样，YFP是细胞生物学和分子生物学中一种非常常用的报告基因。目前，有三种改良的黄色荧光蛋白： Citrine, Venus, and Ypet。这三种改良的蛋白荧光更亮，更稳定，而且成熟更快，因此应用广泛。黄色荧光蛋白最常用于荧光共振能量转移，作为荧光能量的接受体（acceptor）
什么是绿色荧光蛋白
绿色荧光蛋白分子的形状呈圆柱形，就像一个桶，负责发光的基团位于桶中央，因此，绿色荧光蛋白可形象地比喻成一个装有色素的“油漆桶”。装在“桶”中的发光基团对蓝色光照特别敏感。当它受到蓝光照射时，会吸收蓝光的部分能量，然后发射出绿色的荧光。利用这一性质，生物学家们可以用绿色荧光蛋白来标记几乎任何生物分子或
荧光蛋白的发光原理
绿色荧光蛋白是从水母体内发现的发光蛋白。分子质量为26kda，由238个氨基酸构成，第65～67位氨基酸形成发光团，是主要发光的位置。其发光团的形成不具物种专一性，发出荧光稳定，且不需依赖任何辅因子或其他基质而发光。绿色荧光蛋白基因转化入宿主细胞后很稳定，对多数宿主的生理无影响，是常用的报道基因。荧
荧光蛋白的发光原理
生命的颜色在海洋中，栖息着一类美丽而神奇的生物——水母。水母是一类古老的水生无脊椎软体动物。多数水母拥有颜色绚丽的伞性身躯及自体发光的能力，可散发出点点淡蓝色荧光，与摇曳的海水相映成辉，常引人无限遐想。没有人知道水母发光的能力是如何进化而来的，这些美丽的海洋精灵遍布在世界各地的海洋中，如繁星般点缀着
关于荧光蛋白的简介
荧光蛋白在某种定义下可以说是革新了生物学研究——运用荧光蛋白可以观测到细胞的活动，可以标记表达蛋白，可以进行深入的蛋白质组学实验等等。特别是在癌症研究的过程中，由于荧光蛋白的出现使得科学家们能够观测到肿瘤细胞的具体活动，比如肿瘤细胞的成长、入侵、转移和新生。
高灵敏度的生物发光探针问世
近日，中国科学院深圳先进技术研究院副研究员储军主持研发的新型大斯托克斯位移荧光蛋白取得重要突破，实现了在小鼠脑内单一波长激发双色荧光成像和高灵敏的生物发光成像。 这里的斯托克斯位移指的是荧光物质的最大发射波长和最大激发波长之差，差值若大于100 nm，则认为该荧光蛋白具有大斯托克斯位移的特性
天津大学最新Nature子刊文章
来自天津大学，南开大学生命科学学院的研究人员发表文章报道称增强型绿色荧光蛋白的荧光会由于激光而被关闭，这种特殊的激光即飞秒激光，是人类目前在实验室条件下所能获得最短脉冲的技术手段，研究人员还通过癌细胞的系列离子进程验证了这一点，相关成果公布在Nature Photonics杂志(影响因子为29.2)
化学家利用前所未有的新方法合成纳米纤维
卡内基梅隆大学的科学家们已经通过连接改性的绿色荧光蛋白分子合成了纳米纤维。这种纳米纤维未来可能被用于药物输送和组织工程的应用中。 美国卡内基梅隆大学的研究人员开发出一种新方法用于产生自组装蛋白质/聚合物的纳米结构，这让人联想到在活细胞中的纤维。 这项工作提供了一个前景可
LaVision双光子显微镜多焦点扫描与光激活蛋白在...（一）
LaVision双光子显微镜-多焦点扫描与光激活蛋白在核转运研究中的应用Multifocal two-photon laser scanning microscopy combined with photo-activatable GFP for in vivo monitoring of intr
绿色荧光蛋白的研究与使用历史
1962年，已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母（luminous hydromedusan Aequorea）中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代，对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初，科学家才克隆到
绿色荧光蛋白的研究与应用
1962年，已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母（luminous hydromedusan Aequorea）中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代，对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初，科学家才克隆到
蛋白质的内源性荧光与荧光探针
利用荧光光谱法研究蛋白质一般有两种方法。一是测定蛋白质分子的自身荧光(内源荧光)，另一种是当蛋白质本身不能发射荧光时，通过非共价吸附或共价作用向蛋白质分子的特殊部位引入外源荧光(也称荧光探针)，然后测定外源荧光物质的荧光。 蛋白质的内源荧光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan
激光扫描共焦显微镜技术及应用（二）
五、激光扫描共焦显微镜技术的应用定位、定量三维重组动态测量¨ 活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量¨ 活细胞内H+浓度（ pH值）的测量¨ 自由基的检测¨ 药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量 应用：细胞膜电位的测量 荧光漂白恢复（FRAP）的测量 笼锁解笼锁的测量
自噬双标腺相关病毒说明（一）
一．关于自噬及LC31. 自噬大自噬（macroautophagy），也就是通常说的自噬（autophagy），是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分（细胞器、蛋白等）被双层膜的囊泡包裹，形成自噬体（autophagosome），进而传递到溶酶体进行降解的过程。详细来说，自噬过
从染料细胞与滤光片等多维度解析免疫荧光实验的操作
当我们做免疫荧光的实验时，市面上会有很多的染料供我们选择，让人眼花缭乱，那到底应该如何选择呢？让我们看看以下介绍一、荧光标记是什么？荧光标记就是用荧光基团特异性来标记细胞或者组织样品中所感兴趣的区域。一般常用的荧光标记方法有表达荧光蛋白、细胞器及DNA特异性染料、抗体偶联免疫荧光染料和双光子荧光染料
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用四
二、活体动物荧光成像技术 （一）技术原理1．标记原理活体荧光成像技术主要有三种标记方法。（1）荧光蛋白标记：荧光蛋白适用于标记细胞、病毒、基因等，通常使用的是GFP、EGFP、RFP（DsRed）等；（2）荧光染料标记：荧光染料标记和体外标记方法相同，常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7，可以
通过SpectraMax－Paradigm微孔板检测平台和Tune技术可自动扫...
通过SpectraMax Paradigm微孔板检测平台和Tune技术可自动扫描荧光蛋白分子来确定其最佳波长Molecular Devices公司基于SpectraMax ®Paradigm® 多功能微孔板检测平台的基础上推出了一款使用滤光片作为其单色器，但又可随意调节其检测波长的Tune卡盒，
植物多光谱荧光成像系统多激发光、多光谱荧光成像技术
多激发光、多光谱荧光成像技术：通过光学滤波器技术，仅使特定波长的光（激发光）到达样品以激发荧光，同时仅使特定波长的激发荧光到达检测器。不同的荧光发色团（如叶绿素或GFP绿色荧光蛋白等）对不同波长的激发光“敏感”并吸收后激发出不同波长的荧光，根据此原理可以选配2个或2个以上的激发光源、滤波轮及相应
GFPTrap如何设计成功的IP实验？
借助Chromotek公司GFP-Trap如何设计成功的IP实验？How to plan an immunoprecipitation of your GFP-fusion protein when using the ChromoTek GFP-Trap®PreambleThis document
报告基因实验——荧光蛋白（FP)－的显微检测
实验材料活体组织仪器、耗材落射荧光显微镜汞灯实验步骤表达突光蛋白的材料一般首先用落射荧光显微镜（epi-fluorescent microscopy) 来观察 ，尤其当研究表皮上表达的荧光蛋白或者用反褶积软件去掉从焦点之外采集的荧光时[18]。然而，对于较厚的材料，必须使用共聚焦显微镜，因为它可以
新型双荧光共定位系统开发成功
北京航空航天大学生物与医学工程学院和北京大学化学与分子工程学院等研究人员以绿色荧光蛋白（GFP）和红色荧光蛋白（RFP）为材料，开发出一种新的用于活细胞内检测蛋白质相互作用的检测系统。研究论文近期发表在《科技导报》上。 荧光蛋白是目前细胞分子生物学广泛应用的分子探针，在细胞生物学、组织工程、基
饶毅：美妙的生物荧光分子与好奇的生物化学家
下村修 做出应获诺贝尔奖工作的科学家，几十年默默无闻； 被广泛应用的分子，很少人知其发现者； 原始论文鲜为人知，后继论文倒很热门； 曾失明的人，发现了美丽的发光蛋白； 低调的父亲，出了高调的儿子。 这里简介一项生物化学研究，讲一个科学家的故事，还讨论一个问题：是否活着的科学
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白（一）
简介在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众
绿色荧光蛋白的基本结构
野生型绿色荧光蛋白，最开始是 238 个氨基酸的肽链，约 25KDa。然后按一定规则，11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心，能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团，致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点，而其中的
绿色荧光蛋白的结构介绍
野生型绿色荧光蛋白，最开始是 238 个氨基酸的肽链，约 25KDa。然后按一定规则，11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心，能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团，致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点，而其中的
绿色荧光蛋白的结构特点
野生型绿色荧光蛋白，最开始是 238 个氨基酸的肽链，约 25KDa。然后按一定规则，11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心，能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团，致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点，而其中的
绿色荧光蛋白融合抗体研究
融合抗体 近二十年来，抗体生成技术有了飞速发展，已经从细胞工程抗体（杂交瘤技术一单克隆抗体）发展到了第三代抗体：基因工程抗体，尤其是噬菌体抗体库技术的出现，解决了人源抗体的研制问题，促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发。单链抗体（Single-chain variable
LSCM表达荧光蛋白的组织
表达荧光蛋白的组织经冷冻切片制样后，可直接封片，观察并扫描图像，也可配合使用其它荧光染料进行免疫荧光抗体标记和核染色。同时表达GFP 和 RFP 荧光蛋白的组织切片，如还需作免疫荧光抗体标记，应选择可以被 633 nm 和 405 nm 波长激光器激发的荧光染料，如 CY5、Alexa fluor
绿色荧光蛋白的应用特点
由于荧光蛋白能稳定在后代遗传，并且能根据启动子特异性地表达，在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。更多地，荧光蛋白被改造成了不同的新工具，既提供了解决问题的新思路，也可能带来更多有价值的新问题。GFP和它的衍生物的可用性已经彻底重新定义荧光显微镜，以及它被用来在细胞生物学和其他生物学科的方
生化与细胞所建立鉴定内质网跨膜蛋白拓扑结构的新方法
4月18日，国际学术期刊PLoS One在线发表了中科院上海生命科学研究院生化与细胞所胡红雨课题组的研究论文A Redox-Sensitive Luciferase Assay for Determining the Localization and Topology of Endoplasmi