PCR循环次数是否越多越好
当然不是越多越好。循环次数过多，并不会计产物也随之过度增加。因为再次循环都有高温到低的温度变化，聚合酶的活性有限，而且一般体系中引物和原料的量也不会是无限供应的。另外循环次数过多，产物间可能会形成较为复杂的结构，影响其作为模板的效率，因此循环次数不是越多越好，一般PCR反应的循环不超过35次。......阅读全文
菌落PCR
菌落PCR可用于：（1）重组体的筛选；（2）重组体DNA测序分析。实验方法原理直接挑取菌落进行PCR，PCR的95℃加热可以破胞，释放基因组DNA或质粒，成为PCR体系的模板，然后进行链式扩增。实验材料菌落样品试剂、试剂盒dNTPPCR混合液仪器、耗材PCR仪实验步骤1. PCR混合液的制备（1）
反向PCR
主要内容如下：· RT-PCR· Competitive and Quantative RT-PCR· In Situ RT-PCR· RL-PCR· DNA Contamination· RT-PCR
Basic－PCR
实验概要The following basic protocol serves as a general guideline and a starting point for any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubati
降落PCR
基本方案 实验方法原理 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40
PCR－protocol
PCR reactionProtocol for 50µl reaction - adjust amounts if necessary, for a 20µl reaction use the same volumes of primer and dNTP-mix, but adjust the
简并PCR
简并PCR就是引物合成的时候在某个位置用两种以上的碱基代替原来的单碱基渗入oligo链合成的是一堆混和物实际上能够起做用的在其中占一定比例这个比例一般用简并度表示比如agctN合成的时候最后一位用4种碱基反应真正用的agctc，占总数的1/4agctNN其中agctCC就占1/16一般公司推荐3‘端
反向PCR
实验方法原理 标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间（指向内部）的一段 DNA 片段的扩增。与此相反，反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列，这种未知
定量PCR
实验方法原理 定量PCR（即时聚合酶链锁反应，Real-time Polymerase Chain Reaction，简称 Real-time PCR、即时PCR），又称定量即时聚合酶链锁反应（Quantitative real time
水浴PCR
PCR技术的诞生 1985年，美国科学家Kary Mullis发明了具有划时代意义的PCR技术他因此在1993年获得诺贝尔奖 PCR是什么？ PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强
Degenerate－PCR
Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR primers with a given sequen
实时－PCR
一旦 RNA 收集纯化完成，可以采用对不同的细胞质或核糖体 RNA 专一的商业化的实时 PCR 试剂盒，以组成型的 rRNA 为标准对所有资料进行标定。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒cDNA 样品rRNA 引物和探针目的基因的引物和探针Tag Man Un
PCR引物
PCR Primer Design and Reaction Optimization (Molecular Biology Techniques Manual) PCR Primer Design (Newman Lab) PCR Primer Design (Eppendorf)Detail
pcr原理
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链
标准PCR
· What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not onl
Quantitative－PCR
实验概要Quantitative PCR involves co-amplification of two templates: a constant amount of a preparation containing the desired target sequence and var
标准PCR
What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for thos
实时－PCR
试剂、试剂盒 cDNA 样品 rRNA 引物和探针 目的基因的引物和探针 Tag Man Universal PCR Master Mix 超纯水
免疫PCR
免疫PCR (Immuno PCR, Im-PCR) 是利用抗原抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性而建立的一种微量抗原检测技术。是用一段已知DNA分子标记抗体作为探针，用此探针与待测抗原反应，PCR扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA分子，电泳定性，根据特异性PCR产物的有无，来判断待测
菌落PCR
实验方法原理 直接挑取菌落进行PCR，PCR的95℃加热可以破胞，释放基因组DNA或质粒，成为PCR体系的模板，然后进行链式扩增。实验材料 基因样品试剂、试剂盒 dNTPPCR混合液仪器、耗材 PCR仪实验步骤 1. PCR混合液的制备（1）Taq buffer（10×） 180 ul（2）dNT
反向PCR
实验方法原理 标准 PCR 技术应用于定位在两个引物之间（指向内部）的一段 DNA 片段的扩增。与此相反，反向 PCR (inverse PCR) 应用于扩增和克隆与已知 DNA 序列某一个末端相邻的侧翼的未知 DNA 序列，这种未知序列没有引物可以利用。该项技术由几个研究小组开发（Ochm
免疫PCR
免疫PCR 实验方法原理 主要由两个部分组成，第一部分的免疫反应类似于普通的酶联免疫吸附试验（ELISA）的测定过程；第二部分即通常的PCR检测，抗原分子的量
Long－PCR
Two long PCR steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of
降落PCR
降落PCR（touchdown PCR），一种PCR技术，主要用于PCR的条件的优化。实验方法原理基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq
Long－PCR
Two long PCR steps:First round of the nested PCR step of the end point dilution procedure to quantitate the cDNA.First round of the nested PCR step of
定量PCR
定量PCR可以用于：（1）以外参或内参为标准，通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测，进行PCR起始模板量的定量；（2）用外标法（荧光杂交探针保证特异性）通过监测PCR过程（监测扩增效率）达到精确定量起始模板数的目的，同时以内对照有效排除假阴性结果（扩增效率为零）。实验方法原理定量PCR（即时聚
直接PCR技术，让PCR更简单（二）
直接PCR（Direct PCR）是一种不经核酸提取而直接使用动物或植物组织等直接进行扩增的反应。在许多方面，直接PCR的工作方式类似于常规PCR。主要区别是直接PCR中使用的定制缓冲液，样本可不经过核酸抽提，直接进行PCR反应，但对于参与直接PCR反应的酶的耐受性和buffer的兼容性有相对应的要
实时荧光定量pcr仪的PCR优势
样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值（限制点的循环数）。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大，这样可以获得最准确，可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品，线性回归分析将产生一条标准曲线，可以用来计算未知样品的浓度。
PCR产物的检测PCRELISA法
在一个引物的5’端标记上生物素以便使其能与包被板上的亲合素结合而固定PCR产物，而在另一引物的5’端标记FITC，用HRP标记的抗FITC抗体与之结合显色，即可进行常规ELISA检测。如设立标准对照，此技术还可用于定量分析。 【试剂与配置】 包被液：4.3mmol/L Na2HPO4,
An－Economic－PCR－Enhancer－for－GCRich－PCR－Templates
Since PCR is often problematic on GC-rich templates, we have evaluated different PCR enhancing additives and generated an Combinatorial Enhancer Solut
PCR技术（二）：PCR反应模板的制备
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计，酶的质量.模板的制备，在前二者都稳定可行的情况下，PCR模板的制备尤为重要.模板处理方法的选择及操作人员的基 本技能，决定分离模板核酸(DNA或RNA)的质和量及PCR的成败.而提高模板核酸质量的 关键是除去杂质(蛋白质、酶、脂肪等).除去抑制Taq DN