WB上样量应为多少
>这要根据你做的蛋白表达量多少，一般是用DAB显色要50-100μg，用ecl曝光上样量为20-40μg。但根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg，ecl法至少20pg。我也用组织作过western，蛋白浓度的确很高。通常我上50-100ug，足够了。如果蛋白浓度太高导致上样过小，可用裂解液稀释蛋白使总上样体积在10ul即可，勿用水稀释会改变PH值。上样不要过高，否则条带兜一大坨，不好看。具体还得在试验后确定，如果内参出来，目的蛋白不出来，可能表明目的蛋白丰度低，上样量相对不足可在增加上样量试试。当然目的蛋白不出来的原因有很多：）这只是从上样的角度考虑。好的，多谢我前几天预示了一下，倒是有条带，我我算了一下就150-160μg,请问一下各位，加这么高的量可以吗？关键是你自己分析一下你底预实验结果，最后得到清晰而不太浓密底条带最好。其实WB控制最后显示底条带不仅可以控制上样量，还可以控制WB整个过程中底许多......阅读全文
WB跑胶后没有条带是什么原因
提取细胞蛋白加1ml裂解液实在是有点多，你可以减少到200-300ul试试，提取蛋白后做个BCA蛋白定量，在做后续的考蓝染色，确定蛋白没有问题再电泳转膜
【锐赛小课堂】WB生物样本总蛋白抽提
锐赛小课堂1222-158 一、贴壁细胞蛋白提取 A 1..将水浴锅的温度调至100℃，等水浴锅达到100℃温度后，取出需要收样的细胞的培养皿或者孔板。 2.将缓冲液（1Xloading buffer）置于100℃水浴锅中预热10min。 （loding buffe
wb－蛋白在重复实验时还需要煮吗
蛋白样品的制备是蛋白质组研究的第一步，无论后续采用怎样的分离或鉴定手段，样品制备都是关键步骤。因此，为了完全分析所有的细胞内蛋白，组织与细胞必须进行有效的破碎。本文在此介绍几种较为常见的方法。变性条件——SDS LB直接裂解：用常温或者高温预热过（预热更有利于阻止蛋白水解或者磷酸酶去磷酸化，但容易遗
ELISA、WB、QPCR采样及取样注意事项
ELISA取样及运输注意事项一、血清提取方法：1.全血促凝管取血，轻轻颠倒两三次，放置片刻让全血凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。2.全血普通EP管取血，室温放置2h左右，让其凝固，凝固后3000转15-30min离心取上清。特别注意：取血清避免震荡，以防止溶血，溶血会对结果有影响。
wb免疫印迹法的主要显色方法有哪些
Western免疫印迹（WesternBlot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 western显色的方法主要有以下几种： i.放射自显影 ii.底物化学发光ECL iii.底物荧光E
锥形量热仪产烟量为0
锥形量热仪(CONE)法中燃烧性能的测定应用锥形量热仪(CONE)可以得到燃烧试样的多个性能参数，如热释放速率、质量损失速率、烟生成速率、有效燃烧热、点燃时间以及关于燃烧气体的毒性和腐蚀性等。这些性能参数的测定是在稳定、真实、易于控制的条件下得到的,且能够在不同时间、地点重复操作，因此，可以作为文献
反义亲和层析法纯化及去除核蛋白复合物实验
实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒NaCl 洗液Laemmli 上样缓冲液ATP磷酸肌酸无菌蒸馏水尿素缓冲液MD 0.1MD 0.6KCl 洗液链亲和素琼脂糖凝胶封闭缓冲液NP-40仪器、耗材链亲和素琼脂糖凝胶Dounce 玻璃匀浆器微量透析杯透析袋实验步骤一、材料与设备1. AAS 法纯化 RNP
反义亲和层析法纯化及去除核蛋白复合物实验
实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 NaCl 洗液 Laemmli 上样缓冲液 ATP
反义亲和层析法纯化及去除核蛋白复合物实验
实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 NaCl 洗液Laemmli 上样缓冲液ATP磷酸肌酸无菌蒸馏水尿素缓冲液MD 0.1MD 0.6KCl 洗液链亲和素琼脂糖凝胶封闭缓冲液NP-40仪器、耗材 链亲和素琼脂糖凝胶Dounce 玻璃匀浆器微量透析杯透析袋实验步骤 一、材料与设备1. AAS 法纯化
告别黑白迎接色彩荧光技术在WesternBlot显影上的应用1
说起免疫印迹（Western Blot）检测，想必大家都很熟悉了，不就是WB吗？每天都做啊，白底黑带，但是最近经常阅读SCI文献（特别是高分的）小伙伴可能会发现，近两年发表很多高影响因子的文献的WB结果图发生了大变样：白底变成了黑底，条带从黑色变成了：红，橙，黄，绿，蓝等各种颜色了
跑胶蛋白质弥散
estern Blot（WB）可以说是生物学方向的同学最...最基本的实验技能了，然而好看的 WB 总是别人的，自己的 WB 总是杂带丛生，尤其是新课题、新抗体，总在目的条带附近出现非特异性条带。产生这种状况的原因是什么呢、用下面的几个例子，咱们一起研究一下。 案例一：啥也没有 原因：比较多
跑胶蛋白质弥散
estern Blot（WB）可以说是生物学方向的同学最...最基本的实验技能了，然而好看的 WB 总是别人的，自己的 WB 总是杂带丛生，尤其是新课题、新抗体，总在目的条带附近出现非特异性条带。产生这种状况的原因是什么呢、用下面的几个例子，咱们一起研究一下。 案例一：啥也
跑胶蛋白质弥散
estern Blot（WB）可以说是生物学方向的同学最...最基本的实验技能了，然而好看的 WB 总是别人的，自己的 WB 总是杂带丛生，尤其是新课题、新抗体，总在目的条带附近出现非特异性条带。产生这种状况的原因是什么呢、用下面的几个例子，咱们一起研究一下。 案例一：啥也没有 原因：比较多
量高法测量
冻结图片后，按顺序用鼠标左键点击液滴的左、右端和液滴顶端。如图所示，结果自动计算并显示。（如需快速分析，可直接测量，无须冻结图象）。如点击有误差，可点击鼠标右键，取消选定，重新测算。C．基于两基点的自动计算：1. 点选“基点”项；2. 用鼠标点取两基点，先左后右，结果自动计算并显示。
量热仪
●技术特点 1. 大容量外筒水箱，热容量稳定。环境稳定后，连续测试10个样，可保持足够的准确度。 2. 独有弹筒，抗压强，主期时间缩短。 3. 样品称重范围自动警示；实验室环境温度和湿度实时监控；差的结果自动提示。 4. 样品编码和重量信息自动传送；测试结果备份和上传；实验数据防篡改。 5. 可实现
遏制舌尖上的浪费－减少舌尖上的风险
在2013年粮食科技活动周在全国启动之际，国家粮食局发布数据显示，由于消费习惯误区，成品粮过度追求亮、白、精，低水平粗放加工，全国加工环节每年造成口粮损失逾130亿斤;偏好过度加工精米、精白粉，缺乏全谷物食品，成为冠心病、糖尿病等慢性病及癌症多发重要因素。建构科学的膳食结构，遏制“舌尖上的浪费”
MA30一代智能卡尔费休水分测定仪进样量如何控制
MA-30一代智能卡尔费休水分测定仪的电解池中的试剂容量在200ml左右，更换一池试剂可以重复做许多次样品。从试验时间、试剂耗量、产品标准诸多因素考虑，进样量应控制在样品水分的含量在10ug-30ug之间*。小于10ug水时，取两次平行测定数据的算术平均值做为报告值时偏差可能增大，大于30ug水时
我国建世界上最大样本量中国汉族人群MHC遗传变异数据库
由安徽医科大学、复旦大学与华大基因研究院共同开展的人类MHC区域全覆盖深度测序近日完成。该研究成功构建出迄今为止最完整的中国汉族人群MHC遗传变异数据库，并阐述了其在复杂疾病研究中的重要价值。23日，国际着名专业杂志《自然遗传》以论着形式在线全文发表。 MHC，即主要组织相容性复合体，在人类中
免疫印迹法和免疫捕获法的区别
免疫印迹实验和酶联免疫的区别如下：免疫印记一般是要把检测的样品转到膜上,再用抗体检测酶联免疫一般是把抗体固定在支持物上,再与要检测的样品反应,目标物就会与抗体结合而留在支持物上。WB所检测的一般是抗原，而Elisa抗原抗体都可以检测。WB只能用抗体去检测你的蛋白样品。ELISA可以固定抗原也可以固定
植物内参抗体该怎么选？
先来说说为什么要用内参抗体？内参抗体的真的是必要的吗？ 我举个例子，印度人和韩国人谁更富有？那还用说，当然是韩国人富有。 可是分明印度的GDP更高，为什么说韩国人更富有呢？ 那怎样实现呢，如果我们能数一数细胞，不同的泳道上同样数量的细胞是最好的，可是这实现不了。这时候我们就需要一个大致能代
单位时间通过横截面积的电荷量的电荷量是净电荷量吗
是净电荷量在一段导体中，导体的横截面积为S，单位体积内带电粒子数n，带电粒子的定向移动速度为v，单个粒子的电荷量q；根据电流的定义：单位时间通过横截面积的电荷量，即I=Q/t；取时间为t过程研究，通过横截面积的带电粒子所占的体积为LS=vtS，这个体积内所包含的带电粒子数为nvtS，这些粒子所带的总
Biosensis的糖尿病与肥胖研究相关抗体在ELISA的应用
尽管仍未完全了解糖尿病的确切原因，但已知肥胖会增加患上不同类型糖尿病的风险。肥胖如何导致II型糖尿病？一个众所周知的事实是，如果您超重或肥胖，则罹患II型糖尿病的风险更大，特别是如果您的腹部脂肪过多。 研究表明，腹部脂肪会导致脂肪细胞释放“促炎性”化学物质，从而
WB40微孔板恒温振荡器受欢迎原因
WB40微孔板恒温振荡器受欢迎原因微孔板恒温振荡器采用微处理技术结合PID控制方式而形成的微孔板孵育器。它具有体积小、重量轻、噪音低；温度、振荡、时间LCD显示，美观大方，操作简单等特点。主要用于酶标板（96孔/384孔板）、细胞培养板（24孔板、48孔板、96孔板等）等溶液在适当温度下进行混匀或细
WB20微孔板恒温振荡器适用领域介绍
微孔板恒温振荡器采用微处理技术结合PID控制方式而形成的微孔板孵育器。它具有体积小、重量轻、噪音低；温度、振荡、时间LCD显示，美观大方，操作简单等特点。主要用于酶标板（96孔/384孔板）、细胞培养板（24孔板、48孔板、96孔板等）等溶液在适当温度下进行混匀或细胞的培养孵育。1．人机友好的触摸式
LZB4WB玻璃转子流量计使用小技巧
LZB-4WB玻璃转子流量计广泛的应用在各个工业项目中，应用于化工、制药、石油、轻工业以及引发部门，因为其结构简单，操作方便，安装简易，以及价格低廉实惠，成为了流量仪表中受欢迎的流量测量仪表。LZB-4WB玻璃转子流量计在使用的时候需要有哪些注意事项呢？有哪些使用玻璃转子流量计的小技巧呢？1、 首先
wb压出的片子条带都是黑的是怎么回事
出现黑点和黑斑，原因：膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合，解决办法：封闭牛奶一定要纯，封闭结束之后要洗，我们常常是等到要封闭的时候发现没有牛奶，然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置，配的匆忙的时候往往不管是否已经完全溶解。如果没有完全溶解的情况下加牛奶倒膜上，会导致很多不溶性颗粒附着在膜上，这就
wb中pvdf膜活化时间长有影响吗
有影响。用甲醇活化不能超过15秒，时间太久会对pvdf膜造成损伤。pvdf膜用甲醇泡的目的是为了活化pvdf膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合，做小分子的蛋白转移时多加甲醇也是这个目的。
wb转膜到半个小时改变电压会影响吗
转膜的时候电压40v，可以看到电流先下降后上升。我转膜的时候就这样的，转膜效果挺好的。转膜液随着使用次数增多，电阻增大，相应电流下，电压增大，建议每次转膜液使用2～3次就换新的，这个是正常的，恒压的时候，电流也是会变化的，这是关于电泳液的问题，用的时间久了就会出现这样的问题，可以经常换电泳液
为什么wb做出来目的条带有两条
估计跟常温放置有关系，要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话，那么可能就是目的蛋白降解了，你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且，你也可以查查目的蛋白的相关资料，看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式，也有可能是这种情况导致的。
wb中pvdf膜活化时间长有影响吗
有影响。用甲醇活化不能超过15秒，时间太久会对pvdf膜造成损伤。pvdf膜用甲醇泡的目的是为了活化pvdf膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合，做小分子的蛋白转移时多加甲醇也是这个目的。