qRTPCR中标准曲线制作及浓度梯度问题
要做qRT-PCR,但是不太清楚,1:浓度梯度是用来制作标准曲线的吗?2:是不是内参和每个目的基因都要制作各自的标准曲线?也就是说如果我要作10个基因的话,就要制作内参加目的基因共11个标准曲线?3:怎么确定最适合的cDNA模板浓度呢?4:有说作3个生物学重复,是怎么做?是的,标准曲线法是绝对定量法不是,既然用到了内参,就是相对定量了反转录的时候按照试剂盒的要求转录特定质量的RNA(RNA的浓度可以通过分光光度计测定),反转完后按照推荐的比例稀释产物即可,一般确保你要的基因的Ct值在20~25比较理想对于同一类生物样本,提取三份RNA(每份RNA都应包含若干不同的生物个体)并反转录,分别Q,这叫生物学重复;Q同一个基因的时候平行3个加样孔,这叫技术重复......阅读全文
做标准曲线如何设定浓度梯度
aluckydog9258(站内联系TA)一般来说设置等间距的五个浓度点,以被测物物质的浓度居中为佳hao1658(站内联系TA)一般来说设置等间距的五个浓度点,以被测物物质的浓度居中为佳chen_007051(站内联系TA)也可以配单浓度,控制进样量,做峰面积和纯品质量的标曲yangliu2006
原子荧光测试项目配置浓度梯度
原子荧光测试项目配置浓度梯度 汞 Hg (标贮液1mg/ml标准液0.01ug/ml)还原剂配制0.5% 氢氧化钾(稳定剂)+2%硼氢化钾(先称取KOH放入水中,待溶解后加入称好的KBH4)。注:先后顺序不能颠倒) 载流液配制 5% HCL (量取50ml定容到1000ml)。
qRTPCR中标准曲线制作及浓度梯度问题
要做qRT-PCR,但是不太清楚,1:浓度梯度是用来制作标准曲线的吗?2:是不是内参和每个目的基因都要制作各自的标准曲线?也就是说如果我要作10个基因的话,就要制作内参加目的基因共11个标准曲线?3:怎么确定最适合的cDNA模板浓度呢?4:有说作3个生物学重复,是怎么做?是的,标准曲线法是绝对定量法
浓度梯度(Etest)法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
是1988年AB Biodisk公司推出,在含20 g/L NaCl的MH琼脂平板上,贴上苯唑西林的试条,菌液调至0.5~1麦氏浊度,35°C孵育24 h,直接读取MIC值。MIC4 μg/ml为耐药。Etest法结合了纸片扩散法和肉汤稀释法的优点,长塑料条含有连续的呈指数梯度变化的苯唑西林(0
线性浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪介绍
连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪测定蛋白质分子量时,由于SDS和巯基乙醇的作用,天然蛋白质解离为亚基和肽链,测得的分子量不是天然蛋白质的分子量。为了弥补这一缺陷,可采用线性浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳仪分离和鉴定蛋白质。一、工作原理:聚丙烯酰胺凝胶的浓度可在一定范围内(如4%~30%)连续改变,凝
为什么材料在脱水过程中脱水剂要有一定的浓度梯度
脱水应按照从低浓度到高浓度的过程,否则标本直接进入高浓度溶液中极易引起组织的强烈收缩或使组织发生变形,从而影响切片,还会造成免疫组化实验过程中的脱片。
被动运输的概念
被动运输(passive transport)是物质顺浓度梯度且不消耗细胞代谢能(ATP)所进行的运输方式,运输动力来自质膜内、外侧物质的浓度梯度势能或电位差。被动运输分为简单扩散和易化扩散。
被动运输的定义
被动运输(passive transport)是物质顺浓度梯度且不消耗细胞代谢能(ATP)所进行的运输方式,运输动力来自质膜内、外侧物质的浓度梯度势能或电位差。被动运输分为简单扩散和易化扩散。
蔗糖梯度为何界面模糊
蔗糖每降低一个浓度梯度,其数量及就降低一个,即低浓度是其相邻的高浓度的1/10,而当这个浓度梯度小数小到一定程度时,就大约相等了,因而一会后界面就会变得模糊了.
参与细胞移动的细胞外信号分子介绍
在一定条件下,细胞外的化学信号能引发细胞的定向移动。这些信号有些时候是底质表面上一些难溶物质,有些时候则是可溶物质。信号分子有很多,可以是肽,代谢产物,细胞壁或是细胞膜的残片,但是作用方式却是一样的,就是与细胞膜表面上的受体结合,启动细胞内信号,完成一系列的反应,去激活或抑制肌动蛋白结合蛋白的活性,
协同运输的作用和分类
协同运输(cotransport)是一类靠间接提供能量完成的主动运输方式。物质跨膜运动所需要的能量来自膜两侧离子的电化学浓度梯度,而维持这种电化学势的是钠钾泵或质子泵。动物细胞中常常利用膜两侧Na+浓度梯度来驱动,植物细胞和细菌常利用H+浓度梯度来驱动。根据物质运输方向与离子沿浓度梯度的转移方向,协
协同运输的方式介绍
协同运输(cotransport)是一类靠间接提供能量完成的主动运输方式。物质跨膜运动所需要的能量来自膜两侧离子的电化学浓度梯度,而维持这种电化学势的是钠钾泵或质子泵。动物细胞中常常利用膜两侧Na+浓度梯度来驱动,植物细胞和细菌常利用H+浓度梯度来驱动。根据物质运输方向与离子沿浓度梯度的转移方向,协
我国学者揭示胚胎背腹轴发育稳定性的奥秘
动物胚胎如何由一个均一的卵裂球发育为具有头尾、背腹和左右等不对称特征的胚胎,即胚胎前后、背腹和左右体轴的建立,是发育生物学中一个重要的研究领域。为纪念创刊125周年,Science杂志于2005年7月提出了125个重要的科学问题。上述胚胎不对称性建立的机制,即属于其中的科学问题之一。图1. 爪蟾
糖的消化和吸收
糖的消化和吸收:食物中的糖主要是淀粉,另外包括一些双糖及单糖。多糖及双糖都必须经过酶的催化水解成单糖才能被吸收。医学|教育|网搜集整理食物中的淀粉经唾液中的α淀粉酶作用,催化淀粉中α-1,4-糖苷键的水解,产物是葡萄糖、麦芽糖、麦芽寡糖及糊精。由于食物在口腔中停留时间短,淀粉的主要消化部位在小肠。小
信号分子的细胞外环境相关介绍
在一定条件下,细胞外的化学信号能引发细胞的定向移动。这些信号有些时候是底质表面上一些难溶物质,有些时候则是可溶物质。信号分子有很多,可以是肽,代谢产物,细胞壁或是细胞膜的残片,信息分子的作用是与靶细胞的受体结合,改变受体的性质和作用,完成一系列的反应,去激活或抑制肌动蛋白结合蛋白的活性,最终改变
化学渗透[偶联]学说的定义
中文名称化学渗透[偶联]学说英文名称chemiosmotic [coupling] hypothesis定 义英国生物化学家米切尔(P. Mitchell)于1961年提出的关于ATP合成机制的学说,主张电子沿电子传递链传递,造成穿线粒体内膜的质子浓度梯度,质子浓度梯度势能驱动ATP合酶催化合成A
化学渗透[偶联]学说的概念
中文名称化学渗透[偶联]学说英文名称chemiosmotic [coupling] hypothesis定 义英国生物化学家米切尔(P. Mitchell)于1961年提出的关于ATP合成机制的学说,主张电子沿电子传递链传递,造成穿线粒体内膜的质子浓度梯度,质子浓度梯度势能驱动ATP合酶催化合成A
一种新型可视细胞趋化实验方法及系统搭建的介绍
一.细胞趋化实验原理定义:趋化性(Chemotaxis,亦被称为化学趋向性)是趋向性的一种,指身体细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。这对细菌寻找食物(如葡萄糖)十分重要,细菌以此趋进有较高食物分子浓度的地方,或远离有毒(如苯酚)的地方。在多细胞生物中,趋化性对其发
关于细胞趋化实验及系统搭建,我们整理了这份攻略
一. 细胞趋化实验原理定义:趋化性(Chemotaxis,亦被称为化学趋向性)是趋向性的一种,指身体细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。这对细菌寻找食物 (如葡萄糖) 十分重要,细菌以此趋进有较高食物分子浓度的地方,或远离有毒 (如苯酚) 的地方。在多细胞生
梯度离心时为什么会形成蔗糖梯度?
蔗糖溶液在超速离心的状态下,会形成一个连续的梯度。虽然它是溶液,但溶质毕竟是有重量的。你在生活中仔细观察的话,把墨水超速离心,也能看到一个连续的浓淡梯度,原理是差不多的。分子量越大,形成浓度梯度的离心转速就较小一些。除了蔗糖以外,还有氯化铯的浓度梯度,这些都是为了分离不同分子量的物质所存在的。
钾离子通道一直开放吗
钾离子通道不是一直开放。钾离子通道,就是指通透特异性允许钾离子通过质膜,而阻碍其他离子特别是钠离子通透的通道。离子通道是各种无机离子跨膜被动运输的通路。生物膜对无机离子的跨膜运输有被动运输(顺离子浓度梯度)和主动运输(逆离子浓度梯度)两种方式。被动运输的通路称离子通道,主动运输的离子载体称为离子泵。
工业化膜分离过程及特征
工业化膜分离过程及特征分离过程分离目的截留物性质(尺寸)透过物性质推动力过程机理原料、透过物相态气体分离(Gas Separation)气体的浓缩或净化大分子或低溶解性气体小分子或高溶解性气体浓度梯度(分压差)溶解一扩散气相渗透汽化(Pervaporalion)液体的浓缩或提纯大分子或低溶解性物质小
生物膜离子通道的基本信息
生物膜离子通道(ion channels of biomembrane)是各种无机离子跨膜被动运输的通路。生物膜对无机离子的跨膜运输有被动运输(顺离子浓度梯度)和主动运输(逆离子浓度梯度)两种方式。被动运输的通路称离子通道,主动运输的离子载体称为离子泵。生物膜对离子的通透性与多种生命活动过程密切相关
离子通道是什么意思
生物膜离子通道(ion channels of biomembrane)是各种无机离子跨膜被动运输的通路。生物膜对无机离子的跨膜运输有被动运输(顺离子浓度梯度)和主动运输(逆离子浓度梯度)两种方式。被动运输的通路称离子通道,主动运输的离子载体称为离子泵。生物膜对离子的通透性与多种生命活动过程密切相关
什么j生物膜离子通道
生物膜离子通道(ion channels of biomembrane)是各种无机离子跨膜被动运输的通路。生物膜对无机离子的跨膜运输有被动运输(顺离子浓度梯度)和主动运输(逆离子浓度梯度)两种方式。被动运输的通路称离子通道,主动运输的离子载体称为离子泵。生物膜对离子的通透性与多种生命活动过程密切
离子通道是什么意思
生物膜离子通道(ion channels of biomembrane)是各种无机离子跨膜被动运输的通路。生物膜对无机离子的跨膜运输有被动运输(顺离子浓度梯度)和主动运输(逆离子浓度梯度)两种方式。被动运输的通路称离子通道,主动运输的离子载体称为离子泵。生物膜对离子的通透性与多种生命活动过程密切相关
生物膜离子通道的概念和应用
生物膜离子通道(ion channels of biomembrane)是各种无机离子跨膜被动运输的通路。生物膜对无机离子的跨膜运输有被动运输(顺离子浓度梯度)和主动运输(逆离子浓度梯度)两种方式。被动运输的通路称离子通道,主动运输的离子载体称为离子泵。生物膜对离子的通透性与多种生命活动过程密切相关
通道蛋白的功能和主要种类
通道蛋白(channel protein)是横跨质膜的亲水性通道,允许适当大小的离子顺浓度梯度通过,故又称离子通道。有些通道蛋白形成的通道通常处于开放状态,如钾泄漏通道,允许钾离子不断外流。有些通道蛋白平时处于关闭状态,即“门”不是连续开放的,仅在特定刺激下才打开,而且是瞬时开放瞬时关闭,在几毫秒的
关于促进扩散的通道蛋白的介绍
通道蛋白(channel protein)是横跨质膜的亲水性通道,允许适当大小的离子顺浓度梯度通过,故又称离子通道。有些通道蛋白形成的通道通常处于开放状态,如钾泄漏通道,允许钾离子不断外流。有些通道蛋白平时处于关闭状态,即“门”不是连续开放的,仅在特定刺激下才打开,而且是瞬时开放瞬时关闭,在几毫
通道蛋白的功能和主要种类
通道蛋白(channel protein)是横跨质膜的亲水性通道,允许适当大小的离子顺浓度梯度通过,故又称离子通道。有些通道蛋白形成的通道通常处于开放状态,如钾泄漏通道,允许钾离子不断外流。有些通道蛋白平时处于关闭状态,即“门”不是连续开放的,仅在特定刺激下才打开,而且是瞬时开放瞬时关闭,在几毫秒的