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你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。追问 : 谢谢您，可是我还是有点不明白：如果我重复三次，每次3个复孔（即一共9个孔），您指的“把几次试验的对照组的平均值设为1”是指把对照组的ΔCT还是ΔΔCT还是2的-ΔΔCT的平均值设为1啊？谢谢！追答 : 首先，你重复做一个样本（3个重复的孔），那只能算一个值（取平均）。 我说的1是指的相对表达量，不是ΔCT。你得到每个样本中目的基因和内参的CT值后，就可以算出相对表达量了，对不对？ 这时，取所有对照组的平均值，设为1. 每次实验的对照组再和这个平均值1比较，就是对照组的标准差了。追问 : 您所说的目的基因和内参的CT值相减得到的不就是ΔCT吗？假设三次实验某一基因的对照组的均值为4，5，6，则均值为5，此时把5设为1，然后再怎么算啊？不好意思......阅读全文
在荧光定量PCR检测实验中可以采用多种方法来进行基因的定量。定量的方法也取决于实验的目标。当实验者对待测样品中的核酸的具体拷贝数比较感兴趣时，可以选择绝对定量。如果实验者关注的是实验样本与对照样本之间的倍数变化，无需精确测定拷贝数，则选择相对定量。目前相对定量方法适用于大多数基因表达研究，可分析对照
在做qPCR实验时，我们经常会问：“你是做绝对定量还是相对定量呢？”，而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数，但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线，常用于确定病毒滴度。 使用标准曲线进行绝对定量 绝对定量是通
在做qPCR实验时，我们经常会问：“你是做绝对定量还是相对定量呢？”，而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数，但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线，常用于确定病毒滴度。使用标准曲线进行绝对定量绝对定量是通过样品的Cq值和标准
同学们又是做qPCR实验的一天，有没有怀着忐忑又期待的心情去点开“analysis”的呢？点开之后，发现扩增曲线不正常，或者Cq值过大，又或者SD值太高，那这样的实验结果还靠谱吗？现在让小编来告诉你，qPCR实验的成功与否，关键在于各组数据是否达到判定标准以及是否符合实验预期，小小的qPCR实验
同学们又是做qPCR实验的一天，有没有怀着忐忑又期待的心情去点开“analysis”的呢？点开之后，发现扩增曲线不正常，或者Cq值过大，又或者SD值太高，那这样的实验结果还靠谱吗？现在让小编来告诉你，qPCR实验的成功与否，关键在于各组数据是否达到判定标准以及是否符合实验预期，小小的qPCR实验它可
新发和再发传染病对公共卫生造成了严重影响。然而，由于这些病原体例如新冠COVID-19，SARS必须在3或4级别生物安全实验室中进行处理，因此抗病毒药或疫苗的研发常常受到阻碍。人们一直在积极寻求解决这一问题的替代方法，其中使用假病毒代替野生型病毒，是一种很好的手段。 假病毒是一种重组病毒颗
新发和再发传染病对公共卫生造成了严重影响。然而，由于这些病原体例如新冠COVID-19，SARS必须在3或4级别生物安全实验室中进行处理，因此抗病毒药或疫苗的研发常常受到阻碍。人们一直在积极寻求解决这一问题的替代方法，其中使用假病毒代替野生型病毒，是一种很好的手段。 假病毒是一种重组病
做过PCR的小伙伴都知道，PCR前期的验证引物探针性能和确定最适反应条件是确保正式实验顺利进行的前提。PCR实验中有个相当重要的工作——即是PCR扩增效率的评估。扩增效率是PCR检测性能最重要的指标之一，也是定量分析计算结果时所需要的参数。接下来，让小编给大家细细说来吧。 什么是扩增效率&
Mullis博士在发明PCR技术后曾这样描述：“用一个单分子DNA，PCR能在一个下午内产生100百万个相似的分子。反应很容易进行，只需要一个管子、一些简单的试剂和一个用来加热的设备”（Beginning with a single molecule of the genetic material
华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法，可从粪便样本中检测与EE（热带肠病）关联的人mRNA，灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA，可作为反应病人消化道病
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。diyi代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。第一代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过将P
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。一代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过将PC
靶基因表达标准化参考基因选择对于相关定量分析来说，通过参考基因表达进行靶基因表达标准化。理想情况下，标准化处理应该能够补偿 RNA/cDNA起始量变异情况，以及cDNA合成或 PCR 扩增中潜在抑制剂的作用。参考基因作为内源性样本材料对照，工作流中，与靶基因一同被处理。为获取可靠结果，标准化
介绍：Azure Cielo™ 3和Cielo™ 6 实时荧光定量PCR系统具有卓越的灵敏度。该系统配置新型的高性能光学系统，采用16组光纤单孔扫描设计，一根光纤用于高能LED激发，另一根用于光信号检测，可16孔同时采集(图1)。特殊的激发/发射方式保证单孔扫描时仅激发一个孔，光纤传导也有效消除
“预防就是治疗”--《众病之王：癌症传》 战胜癌症，早期预防、早期发现是关键。癌症患者如果在晚期被发现，90%的患者都会死亡，而肿瘤在早期发现，5年的存活率是90%。早期发现恶变细胞踪迹，可以通过干预手段，提高自身免疫力，也可以完整切除，结合化疗，治疗疾病。 微滴式数字PCR（Droplet
Mullis在发明PCR技术后曾这样描述：“用一个单分子DNA，PCR能在一个下午内产生100百万个相似的分子。只需要一个管子、一些简单的试剂和一个用来加热的设备”。从PCR技术发明至今已过30年，而PCR技术刚好发展到第三代，在过去的30年里PCR技术为生命科学的发展做出了不可磨灭的贡献。◆◆一代
荧光定量PCR(qPCR)内参的选择对基因表达差异分析结果的影响与应用实时荧光定量PCR技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。由于其精准度好、灵敏度高，在分子生物学研究和医学研究等方面得到了广泛的应用，尤其是在基因表达差异分析方面。基因表达差异分析一般是比较不同
1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR方法以后，PCR已经成为生命科学研究领域中最常规的实验方法之一。PCR是用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点，是能将微量DNA大量扩增。最传统的一代PCR采用琼脂糖电泳的方式对PCR产物进
分析测试百科网讯 2021年5月20-21日，MDx 2021第七届中国先进分子诊断技术与应用论坛在上海新发展亚太JW万豪酒店开幕。本次论坛深度探讨分子诊断技术升级及产品申报与临床落地等前沿走向、基于测序的mNGS临床落地方案、纳米孔/单分子/固态纳米孔技术平台进展、PCR/RAA/dPCR等技
ROX是一种广泛使用的惰性荧光染料，通常添加到qPCR反应液中以校正荧光信号。然而，随着荧光技术在仪器中的发展，比如在Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统，为了标准化而单独使用染料的步骤已不再需要。当实时荧光定量PCR系统首次引入市场时，许多产品使用固定光源和检测系统对96孔整板进行同
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：模板DNA的变性，模板DNA与引物的退火(复性)，引物的延伸。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能
在决定实时荧光定量PCR检测灵敏度、准确性和可靠性的众多因素中，模板质量是决定重复性和生物学相关性的重要因素之一。诸多报告中也描述了生物样品中常见的抑制成分会导致qPCR分析灵敏度和动力学的显著降低。如何检测抑制剂：多种方法可用于评估生物样品中是否存在抑制剂。常用方法是通过连续稀释样品来评估样品的P
病原细菌产生耐药性，能够降低细菌感染后的药物治疗效果，并增加细菌感染和传播的风险，是造成食品安全问题和健康威胁的重要因素。细菌耐药性可分为固有耐药（intrinsic resistance）和获得性耐药（acquired resistance）两种。在获得性耐药中，携带耐药基因的质粒可导至耐
有时，细胞就是那么少，但又要开展多项分析，着实让人为难。丹麦哥本哈根大学的研究人员开发出一种新方法，能从微量的样本中同时提取mRNA和天然蛋白。这项成果发表在《BioTechniques》5月刊上。 在生物学研究的许多领域，样本量往往很有限，特别是人体细胞和组织，如卵泡和胚胎干细胞。但是，研究
FFPET 样本特异性RealTime ready qPCR检测潜在生物标志物假设检验我们使用的第一套临床样本来自于各种用于人类研究的福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）组织。肿瘤来源的 FFPE 组织是临床试验或生物标志物研究中，治疗复合物研发最具有相关性的样本材料。使用 High
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：模板DNA的变性，模板DNA与引物的退火(复性)，引物的延伸。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟， 2～3小
如果避免了预扩增，数据可转换成绝对的cDNA数量，否则数据分析可以Cq值来开展，因为每个细胞的转录本水平呈对数正态分布。一开始，可以各种方法对数据作图，此外，基本的统计分析也应开展（如阳性细胞的数量、平均值和偏差）。细胞数量测定通常是以验证过的参考基因来均一化的。这种策略在单细胞分析中应避免，因为单
你说世界变化快不快，PCR已经迈入第三代!近日，一种称为微滴式数字PCR(ddPCR™)的新技术出现在《Analytical Chemistry》杂志上，它能够确定样品中待测靶分子的绝对数目。 第一代PCR就是我们目前最常用的终点PCR技术，通过凝胶电泳获得定性的结果。风靡全球的实时定
脑肿瘤诊断往往涉及侵袭性神经外科手术，对于临床医生而言能够在不需要活体组织检测的条件下监视脑肿瘤是一个福音，这让他们能追踪和尽早治疗恶性脑肿瘤。 美国马萨诸塞州总医院(MGH)研究人员研发出基于数字PCR的、检测脑肿瘤相关IDH1突变体的分子诊断方法。该公司的Xandra B