如何根据现有的液相方法进行方法开发
一、方法验证简介分析方法开发与验证是一个整体，在实际工作中，一般是先开发分析方法，经过适当的优化以后再做方法验证。所谓方法验证是指为了保证分析检测结果准确、可靠，必须对所采用的分析方法的准确性、科学性和可行性进行验证，以证明分析方法符合分析测试的目的和要求。方法验证在质量控制上有重要的作用和意义，在建立产品质量标准时，分析方法需经验证；在产品生产工艺变更、配方的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法也需进行验证。二、方法验证内容包括专属性、线性、范围、准确度、精密度、检出限、定量限、耐用性等。三、方法验证成熟仪器项目色谱类仪器：气相色谱/质谱联用仪GC/GC-MS、液相色谱/质谱联用仪LC/LC-MS、三重四级杆串联液质仪UPLC-MS-MS；元素类仪器：电感耦合等离子发射光谱/质谱联用仪ICP-OES、电感耦合等离子发射光谱/质谱联用仪ICP-MS、离子色谱仪IC、原子吸收光谱仪AAS、原子荧光光谱仪AFS。四、方......阅读全文
液相色谱柱的结构及安装方法
1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16
提高液相色谱柱柱效的方法
要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。 （1）降低移动相的流速,但会使分析时间延长。 （2）减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。 （3）减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。 （4）选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。 （5
液相色谱柱选择的方法及建议
液相色谱柱选择的方法及建议 一液相色谱柱选择方法简单思路 1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的实验成本等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。 二
液相色谱管路接头故障解决方法
1、管路阻塞 阻塞是管路的主要故障, 管路完全阻塞，压力会突然升高，超压。部分阻塞开始不明显，不断滞留在液流中的微粒压力会慢慢升高，最后完全阻塞。管路阻塞同时会看到接头或垫圈渗漏，低压好一些，高压渗漏明显。 管路完全或部分阻塞是由下列原因引起的： ①没有很好过滤流动
盘点关于液相色谱柱的选择方法
在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。 特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 2.聚合物基质：应用pH值
盘点关于液相色谱柱的选择方法
在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。 特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。 2.聚合物基质：应用pH值
最全的液相色谱柱使用方法
高效液相色谱柱的正确使用包含：加装保护柱，过滤流动相和样品，净化样品，避免过高的柱压，注意温度和酸碱度，正确及时的冲洗等。 01.加装保护柱 保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两
液相色谱柱选择的方法及建议
1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。二、液相色谱柱选择方法|液相色谱柱选择的条件填料基质1.硅胶基质：纯
盘点关于液相色谱柱的选择方法
盘点关于液相色谱柱的选择方法在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。 特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。
液相色谱柱选择的方法及建议
液相色谱柱选择的方法及建议 一液相色谱柱选择方法简单思路 1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的实验成本等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。 二
液相色谱柱的正确使用方法
日常分离分析工作中，液相色谱柱的使用和维护十分重要，液相色谱柱使用是否得当，直接影响柱子的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。液相色谱柱的正确使用：（1）柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。（2）如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，
液相色谱柱的正确使用方法
日常分离分析工作中，液相色谱柱的使用和维护十分重要，液相色谱柱使用是否得当，直接影响柱子的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。液相色谱柱的正确使用：（1）柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。（2）如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，
液相色谱管路接头故障解决方法
1、管路阻塞 阻塞是管路的主要故障,管路完全阻塞，压力会突然升高，超压。部分阻塞开始不明显，不断滞留在液流中的微粒压力会慢慢升高，最后完全阻塞。管路阻塞同时会看到接头或垫圈渗漏，低压好一些，高压渗漏明显。 管路完全或部分阻塞是由下列原因引起的：①没有很好过滤流动相；②样品中有微粒；③泵
液相色谱柱常见故障排除方法
液相色谱系统主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 液相色谱柱常见故障排除方法： 1、若操作过程发现压力很小，则可能管件连接有漏，注意检查。当出现错误警告(各组件指示灯均为红色)，一般为漏液，其
蛋白质、多肽液相纯化方法简介
修饰肽纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤（例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等）成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱（capture chromatography），主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步zui关心的是流速和载量，常采用高
液相色谱柱提高柱效的方法
色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标，混合物能否在色谱柱中得到分离，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下，色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。一般说来塔板数愈多，或塔板高度愈小，色谱柱的分离效能愈好。如何对柱效进行评价 提
异相液相酶免疫测定的方法
主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性，且无放射性污染。 1.平衡法：将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育，待反应达平衡后，测定离心沉淀物（酶标抗原抗体复合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。 2.非平衡法：先将样品（或标准品）与抗
液相色谱柱选择的方法及建议
一、液相色谱柱选择方法|液相色谱柱选择的简单思路 1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法
1、纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤（例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等）成为稳定的可以用于色谱分离的样品。 然后进行捕获色谱（capturechromatography），主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量，常采用高载
液相色谱常见问题及处理方法
HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 1、样品量不足，解决办法为增加样品量 2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器 4、检测器衰减太多。调整衰减即可。 5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间
液相色谱柱提高柱效的方法
色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标，混合物能否在色谱柱中得到分离，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下，色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。一般说来塔板数愈多，或塔板高度愈小，色谱柱的分离效能愈好。如何对柱效进行评
液相色谱柱的正确使用方法
日常分离分析工作中，液相色谱柱的使用和维护十分重要，液相色谱柱使用是否得当，直接影响柱子的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。液相色谱柱的正确使用：（1）柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。（2）如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，
针对液相色谱柱的柱子清洗方法
1．液相色谱柱柱子的清洗 即使样品和流动相已做过前处理，也仍难以完成避免柱子受到污染，因此必须对柱子行清洗。清洗应定期进行，如果在短期内分析许多样品，则以每日清洗一次为宜，至少也应一周一次，防止有太多的杂质在柱上堆积。反相柱的常规洗涤办法是：分别取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱体积（既对于一根4
液相色谱管路接头故障解决方法
1、管路阻塞:阻塞是管路的主要故障, 管路完全阻塞，压力会突然升高，超压。部分阻塞开始不明显，不断滞留在液流中的微粒压力会慢慢升高，最后完全阻塞。管路阻塞同时会看到接头或垫圈渗漏，低压好一些，高压渗漏明显。管路完全或部分阻塞是由下列原因引起的： ①没有很好过滤流动
轻松实现液相色谱的方法转换（一）
图1. 从Agilent 1200系列LC系统到Agilent 1290 Infinity LC系统的方法转换。 本文对Agilent 1290 Infinity液相色谱系统用于测定盐酸胃复安药物制剂中的杂质和有关物质的性能进行了评价。1200系列HPLC系统上的常规LC方法很
高效液相色谱柱的洗柱方法
1、色谱柱清洗要看你的色谱柱是孔径是多少微米，适合的流速是多少。2、以4.6微米的为例，先用纯水清洗2小时，再用甲醇清洗1小时。用的时候直接换上流动相。3、高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流
液相色谱柱提高柱效的方法
色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标，混合物能否在色谱柱中得到分离，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下，色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。一般说来塔板数愈多，或塔板高度愈小，色谱柱的分离效能愈好。如何对柱效进行评价 提
针对液相色谱柱的柱子清洗方法
1．液相色谱柱柱子的清洗 即使样品和流动相已做过前处理，也仍难以完成避免柱子受到污染，因此必须对柱子行清洗。清洗应定期进行，如果在短期内分析许多样品，则以每日清洗一次为宜，至少也应一周一次，防止有太多的杂质在柱上堆积。反相柱的常规洗涤办法是：分别取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱体积（既对于一根4
液相色谱吸滤头堵塞解决方法
解决方法：吸滤头清洗或者更换。清洗时将吸滤头从送液管中拔出，用镊子放入装有异丙醇的烧杯中，超声波清洗15分钟，清洗完毕后将吸滤头用镊子取出，用滤纸擦干后插入送液管，放入装有流动相的瓶中，送液测试，确认吸滤头没有气泡产生，否则应更换新的吸滤头。
香豆酸的液相检测方法介绍
色谱柱：SymmetryC18 反相柱(Waters,250 x 4.6 mm, 5 jim, pH2-8? MA, USA)。 流动相：A相为0.1%甲酸水；B相为纯甲醇(使用前均超声除气20 min)； 洗脱条件：梯度洗脱条件见表； 检测器：紫外检测器； 检测波长：波长320nin；