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共聚焦扫描显微镜的成像原理

采用点光源照射标本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜收集,并沿原照射光路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致,约100-200nm;相对于焦平面上的光点,两者是共轭的,即光点通过一系列的透镜,最终可同时聚焦于照明针孔和探测针孔。这样,来自焦平面的光,可以会聚在探测孔范围之内,而来自焦平面上方或下方的散射光都被挡在探测孔之外而不能成像。以激光逐点扫描样品,探测针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光点的共聚焦图像,转为数字信号传输至计算机,最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面的共聚焦图像。 每一幅焦平面图像实际上是标本的光学横切面,这个光学横切面总是有一定厚度的,又称为光学薄片。由于焦点处的光强远大于非焦点处的光强,而且非焦平面光被针孔滤去,因此共聚焦系统的景深近似为零,沿Z轴方向的扫描可以实现光学断......阅读全文

激光扫描共聚焦显微镜系统及其在细胞生物学中的应用

激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning Confocal Microscopy ,简称LSCM)是近代生物医学图像仪器的最重要发展之一,它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针,利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,以及在亚

激光扫描共聚焦显微镜的应用

  应用功能  激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激光荧光探针,利用计算机进行图像处理,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活

激光扫描共聚焦显微镜技术的主要应用范围

  激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。目前,激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究,并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段,结合其他相关生物技术,在

激光扫描共聚焦显微镜在生命科学中的应用

实验目的与要求1. 掌握激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理及其在生命科学中的应用。一、激光扫描共聚焦显微镜的成像基本原理1.普通荧光显微镜的不足 使用荧光物质标记细胞中的特定成分或结构,不仅图像与对比度增强,而且由于许多荧光显微镜的光源使用短波长的紫外光,大大提高了分辩率(δ=0.61 λ/ N

显微成像小课堂丨告别非焦平面信息干扰

  虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率(即XY方向),决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径,但是其实在宽场荧光显微镜中,样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光,这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光,也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰,这也可以理解为在Z方向上,也是有分辨率的

挑战更高效的高内涵分析:In Cell Analyzer高内涵分析系统

高内涵成像技术已成为不可缺少的工具,推进我们在细胞水平了解人体是如何工作的。——Anthony Davies,都柏林大学圣三一学院 高内涵研究中心主管  高内涵分析(High Content Analysis,简称HCA)是对高分辨率显微镜所拍摄细胞图像的自动提取和分析。高内涵,意味着丰富

共聚焦显微镜介绍

  一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展   科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低,传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细

共聚焦显微镜与普通光学显微镜的比较

 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。普通光学显微镜与激光共聚焦显微镜同属于光学显微镜。  一、普通光学显微镜  普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,

共聚焦显微镜

一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理和发展科学研究工作对更高图像分辨率的追求产生了激光扫描共聚焦显微镜。随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用,研究人员注意到,荧光显微照片的分辨率较低,传统的荧光显微镜使用场光源,因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰,使标本中细微结构的成像

科研中的尖兵利器浅析——共聚焦篇(上)

在科研的战场上,你是否还在苦于寻找更出色的成像技术与手段?你是否还在纠结观察到的实验现象能否真实的反映样品的情况?你是否还在为图像质量差而不能发表高质量的论文而苦恼?“工欲善其事必先利其器”,共聚焦将为你更好的解决这些问题。与传统的宽场成像相比,共聚焦作为一种高端的显微成像术,以其出色的成像质量及三

剖析扫描电镜的类型使用方法及工作原理

  目前,已经成功研制出的扫描电镜包括了:典型的扫描电镜、扫描透射电镜(STEM)、场发射扫描电镜(FESEM)、冷冻扫描电镜(Cryo-SEM),低压扫描电镜( LVSEM)、环境扫描电镜( ESEM)、扫描隧道显微镜(STM )、扫描探针显微镜( SPM ),原子力显微镜(AFM)等,以下介绍几

激光器应用——激光扫描共聚焦显微

iFLEX激光器应用——激光扫描共聚焦显微1,什么是激光扫描共聚焦显微共聚焦显微技术是近十几年迅速发展起来的一项高新研究技术,目前应用领域扩展到细胞学、微生物学、发育生物学、遗传学、神经生物学、生理和病理学等学科的研究工作中,成为现代生物学微观研究的重要工具。激光扫描共聚焦显微镜的主要是利用激光扫描

扫描电镜的类型及其使用方法和工作原理

  目前,已经成功研制出的扫描电镜包括:典型的扫描电镜、扫描透射电镜(STEM)、场发射扫描电镜(FESEM)、冷冻扫描电镜(Cryo-SEM),低压扫描电镜( LVSEM)、环境扫描电镜( ESEM)、扫描隧道显微镜(STM )、扫描探针显微镜( SPM ),原子力显微镜(AFM)等,以下介绍几种

扫描电镜的类型及其使用方法和工作原理

  目前,已经成功研制出的扫描电镜包括:典型的扫描电镜、扫描透射电镜(STEM)、场发射扫描电镜(FESEM)、冷冻扫描电镜(Cryo-SEM),低压扫描电镜( LVSEM)、环境扫描电镜( ESEM)、扫描隧道显微镜(STM )、扫描探针显微镜( SPM ),原子力显微镜(AFM)等,以下介绍几种

激光共聚焦显微镜、扫描电镜、原子力显微镜的区别和关...

激光共聚焦显微镜、扫描电镜、原子力显微镜的区别和关联成像进展激光共聚焦显微镜,扫描电镜,原子力显微镜是目前科研领域用的比较多的成像系统。近年来,随着技术的不断发展,各种系统关联应用成为一个趋势,本文简单整理一下各种显微镜的区别及关联进展情况。一、极限分辨率不同, 缘于放大信号源的差异激光共聚焦:极限

细胞研究用的显微镜分类和工作原理

  显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。   —、光学显微镜   (一)、普通光学显微镜   普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,由物镜和目镜组

细胞研究用的显微镜分类和工作原理

  显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。   —、光学显微镜   (一)、普通光学显微镜   普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,由物镜和目镜组

光学显微镜分类

显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器,是人类进入原子时代的标志。主要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。显微镜分光学显微镜和电子显微镜:光学显微镜是在1590年由荷兰的杨森父子所创。现在的光学显微镜可把物体放大1600倍,分辨的小极限达0.1微米,国内显微镜机械筒长度一般是1

激光扫描共聚焦荧光显微镜的成像原理和基本结构

    激光扫描共聚焦荧光显微镜是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。   成像原理   采用点光源照射标本,在焦平

超分辨显微技术浅析

光学显微成像的衍射极限 生物医学成像技术是基础生物学研究和临床医学最重要的工具之一。回顾历史,已有多位科学家凭借在成像技术方面的突破获得诺贝尔奖。其中,Roentgen 因发现 X 射线获得 1901 年诺贝尔物理学奖; Zernike 因发明相衬显微镜获得 1953 年诺贝尔

激光扫描共聚焦原理和样品前期处理

  1、激光扫描共聚焦显微镜用途  激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。目前,激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究,并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研

超分辨显微技术浅析

光学显微成像的衍射极限生物医学成像技术是基础生物学研究和临床医学最重要的工具之一。回顾历史,已有多位科学家凭借在成像技术方面的突破获得诺贝尔奖。其中,Roentgen 因发现 X 射线获得 1901 年诺贝尔物理学奖; Zernike 因发明相衬显微镜获得 1953 年诺贝尔物理学奖; Ruska

聚焦离子束系统知多少?

纳米科技是当今国际上的一个热点。纳米测量学在纳米科技中起着信息采集和分析的不可替代的重要作用,纳米加工是纳米尺度制造业的核心,发展纳米测量学和纳米加工的一个重要方法就是电子束,离子束技术。近年来发展起来的聚焦离子束纳米加工系统用高强度聚焦离子束对材料进行纳米加工,结合扫描电子显微镜实时观察,开辟了从

为什么激光共聚焦显微镜拍出来的是灰度图

真实色共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同。1、激光扫描共焦显微镜激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光。其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的。由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,

激光扫描共聚焦显微镜技术原理

光学显微镜作为细胞生物学的研究工具,可以分辨出小于其照明光源波长一半的细胞结构。随着光学、视频、计算机等技术飞速发展而诞生的激光扫描共聚焦显微镜 (Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM),则使现代显微镜有能力研究和分析细胞在变化过程中的结构。特别是

激光共聚焦显微镜的分辨率是多少

真实色共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同.1、激光扫描共焦显微镜激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光.其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的.由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,

激光扫描共聚焦显微镜使用说明

激光扫描共聚焦显微镜可以:(1)光切片扫描、3D图像处理、时间序列拍摄成像;(2)细胞、绿荧光蛋白、生物荧光样品观察分析;(3)荧光原位杂交分析。实验方法原理激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫

原子力激光共焦显微镜的使用需求判断

原子力激光共焦显微镜的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描,采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管,再经过信号处理,在计算机监视屏上形成图像。对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好的会聚,可以全部通过针孔被探测器接收。而在焦平面上下位置发出的

徕卡:探索显微科技极限 提供生命研究新工具

  分析测试百科网讯 中国细胞生物学学会2021年全国学术大会在重庆召开。来自细胞生物学相关领域的2000余位专家、学者齐聚一堂,交流学科发展,更有众多企业,带来了领域前沿的创新技术。分析测试百科网采访了徕卡生命科学应用经理方策博士,他为我们介绍了徕卡在宽场、共聚焦、纳米显微镜、光电联用等多款创新产

生物显微镜--激光扫描共聚焦显微镜概述

生物显微镜--激光扫描共聚焦显微镜概述激光扫描共聚焦显微镜(laser sconningconfocal microscope,LSCM)在生物医学领域的主要应用是通过一种或多种荧光探针标记后可对固定的组织或活体标本进行观察研究。当这些标本用普通荧光光学显微镜观察时,来自焦点以外的其他区域的荧光对结