质谱裂解机理中的特征裂解方式

有机质谱中的裂解是极其复杂的,但是通过对其质谱裂解方式和机理的探讨研究,我们可以发现有一些特征结构裂解方式在有机质谱的裂解中是普遍存在的,是世界上的大量质谱学家通过对大量的有机质谱裂解方式进行观察、研究后的概括性总结。所以其具有很重要的参考价值和应用价值,所以在有机质谱解析过程中,必须予以遵循,如此方能得到合理的质谱裂解方式和解析结果。......阅读全文

纯化质粒(碱裂解法)

1. 单个大肠杆菌克隆接种到 2 ml 含适当抗生素的 LB 中。37℃ 剧烈振荡孵育 5~8 小时。或者可以培养过夜使饱和。2. 倒 1.5 ml 培养液到已作标记的微量离心管中。把剩下的培养液存放在 4℃。3. 在微量离心机上离心 2 分钟以沉淀大肠杆菌。吸掉培养液。4. 用 100 μl 葡萄

裂解器类型有哪些?

裂解器类型1、管式炉裂解器管式炉裂解器通常由一个外壁加热的石英管制成,采用电热丝加热,裂解温度在300~1000℃,恒温精度高。当炉温达到设定温度时,将样品置于铂金小舟内,用推杆将铂金小舟送人裂解炉,样品不与管壁接触。管式炉裂解器结构简单,可定量进样,操作方便,裂解温度连续可调。但升温速率不可调,死

菌体/细胞裂解法汇总

一、反复冻融法:1、将细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。2、至少3次以上冻溶。3、IFCC推荐法:收集细胞悬液,4℃低温离心(3000rpm,5min),弃上清,加入一定量PBS(200ul),轻轻吹打混匀,-200C 冷

核膜的裂解与重建

  准备期  在细胞间期的G2期,核膜表面积增加,核孔复合体数量增加一倍。在真核生物中,如酵母,在细胞分裂过程中,核膜保持完整。纺锤体纤维要么在膜内形成,要么穿透膜但不将其撕裂。在其他真核生物(动物和植物)中,核膜必须在有丝分裂的前期阶段分解,使有丝分裂纺锤体纤维能够进入其中的染色体。裂解和重建的具

细胞裂解决办法

  关于培养细胞样品:     1.融解ripa裂解液,混匀。取恰当量的裂解液,在运用前数分钟内参加pmsf,使pmsf的终浓度为1mm。     2.关于贴壁细胞:去除培养液,用pbs、生理盐水或无血清培养液洗一遍(假如血清中的蛋白没有干扰,能够不洗)。按照6孔板每孔参加150-250微升裂解液的

什么是蛋白裂解液

RIPA裂解液。RIPA裂解液(英语:Radioimmunoprecipitation assay buffer,全称放射免疫沉淀法缓冲液)是一种用于裂解细胞或组织的裂解缓冲液,常用于放射性免疫沉淀分析(RIPA)。此缓冲液的变性性能比NP-40裂解液或曲拉通X-100裂解缓冲液更强,因为它包含离子

细胞裂解液怎么配制

裂解细胞的话:新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:先配150 mM NaCL+ 1% NP-40 (去垢剂) + 0.1% SDS (去垢剂)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)或1 mM PMSF

培养细胞标记和裂解物的制备实验——温和去污裂解法

实验材料培养细胞试剂、试剂盒DMEMHClTBSTris仪器、耗材微量离心管Plexiglas盒吸头细胞刮子冷冻离心机实验步骤1.  培养待标记的细胞至适当的生长期。 对于贴壁细胞: 2a.  吸去培养液,用37℃的含血清不加标记物的标记培养液洗尽残存的含磷酸盐培养液,吸尽该培养液。 3a.  加入

免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_单层培养的细胞的裂解

实验方法原理培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充分裂解(如1%NP-40或1%TritonX-100),那么这对目标蛋白的影响可能比匀浆方法更温和。去垢剂的选择必须根据免疫沉淀所用的抗体的识别表位的性质来决定。实验材料单层细胞或悬浮细胞试剂、试剂盒裂解缓冲液PB

热裂解器的独特之处

    热裂解器的独特之处:      1.一般的热裂解温度都是500?600°C的高温,因此不能用手持方法进行操作,所以此前的热裂解设备只能固定在GC或GC/MS上使用。      与此相比,热裂解器由于是采用居里点方式加热不产生多余的热量,在导入气样时不会烫伤操作者。      2.机械

DNA裂解分析实验_JAM分析

实验材料 细胞 试剂、试剂盒 胸腺嘧啶脱氧核苷HBSSPBSEDTA 仪器、耗材 新鲜培养基组织培养板 实验步骤 1. 实验前一天,将细胞接种于新鲜培养基。对数生长期细胞可更好地渗入 [3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷。 2. 收获细胞,在新鲜培养基中以 1

热裂解器的独特之处

热裂解器的独特之处:     1.一般的热裂解温度都是500~600°C的高温,因此不能用手持方法进行操作,所以此前的热裂解设备只能固定在GC或GC/MS上使用。     与此相比,热裂解器由于是采用居里点方式加热不产生多余的热量,在导入气样时不会烫伤操作者。     2.机械部件的小型化加工和电子

RNA提取裂解液有哪些

CTAB ,异硫氰酸胍

裂解酶的基本信息

裂解酶的一种,狭义的指催化裂解1.6-二磷酸-D-果糖生成3-磷酸-D-甘油醛与α-二羟丙酮磷酸反应的酶(同时在糖异生中也可催化这个反应的逆反应),即指1.6-二磷酸-D-果糖醛缩酶(Ec 4.1.2.13)。(广义的指催化同形式反应的酶,例如亦有将鼠李糖磷酸醛缩酶等统称为醛缩酶)。

碱裂解法提取质粒DNA

实验目的1、掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法;2、了解制备原理及各种试剂的作用。实验原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。细菌质粒是一类双链、闭环

热裂解器的参数特点

   热裂解器具有廉价,长寿命的特点,并且在微炉裂解管中的温度保持一致。    这种热裂解器虽然更适合于毛细柱但同时裂解器还可以通过一个简单的锅炉—进样头连接件安装在一个已存的填充或毛细进样头上。    另外微锅炉可以被加温并保持到900摄氏度。    热裂解器的特点:    常规分析省

尿素裂解试验参考值

正常人HbA裂解为两条肽链,在pH8.5醋酸纤维膜电泳时,向阳极泳动的为β链,向阴极泳动的为α链。

什么是裂化?-什么是裂解?

裂化分为高温裂化和催化裂化,一般来说是将一大分子烃类一定条件下断裂成两个或者若干个较小的烃分子,做题的时候一般是均等断裂,比如十六烷变成辛烷和辛烯,而裂解是深度的裂化,裂化的产物有很多种,汽油,煤油等等,但是裂解的产物一般来说只有三种,乙烯,丙烯,1,3-丁二烯,裂解进行的条件更苛刻,温度更高,反应

蛋白的裂解与提取方法

10ml 三去污裂解液配方如下:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0): 0.07882g 150 mmol/L NaCl: 0.08775g0.2 g/L叠氮钠: 0.002g 1 g/LSDS 0.01g100 mg/L Aprotin 0.001g10 g/L NP-40 0.1

化学裂解错配碱基法介绍

  化学裂解错配碱基法(chemical cleavage mismatch,CCM) 通过化学修饰并切割异源DNA双链中错配碱基,达到检测点突变的目的。其原理是末端标记的DNA片段暴露于可以识别并修饰异源双链中错配碱基的化学试剂中(如错配的胞嘧啶可被羟胺修饰,错配的胸腺嘧啶可被四氧化锇修饰),被修

蛋白的裂解与提取步骤

这是偶整理的蛋白裂解和提取的protocol,希望对大家有所帮助。10ml 三去污裂解液配方如下:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0): 0.07882g 150 mmol/L NaCl: 0.08775g0.2 g/L叠氮钠: 0.002g 1 g/LSDS 0.01g100 mg

碱裂解法提取质粒DNA

实验目的      1、掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法;       2、了解制备原理及各种试剂的作用。      实验原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物

细胞/组织裂解液的制备

溶液准备 2×样品缓冲液:130mM Tris-HCl ( pH8.0 ) , 20% ( v/v ) 甘油 , 4.6% ( w/v ) SDS , 0.02% 溴酚蓝 , 2%DTT PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4 ,50

关于裂解疫苗的分类介绍

  疫苗有两种基本类型:减毒活疫苗和灭活疫苗。活疫苗和灭活疫苗的特点是不同的,这些特点决定着使用疫苗的方式。   减毒活疫苗   减毒活疫苗是在实验室里通过改进(“野”)病毒或细菌而制备。所得到的疫苗株微生物保留了复制(生长)和引起免疫的能力,但通常不致病。减毒活疫苗包括活病毒疫苗和活细菌疫苗。

溶原性细菌的自发裂解

  溶原性细菌正常繁殖时,通常不发生裂解现象,只有极少数(大约10-5)溶原性细菌中的原噬菌体会从宿主染色体上切割下来,进行大量复制,并成熟为噬菌体粒子,进而导致宿主细胞裂解,这种现象称为溶原性细菌的自发裂解。即少数溶原性细菌中的温和噬菌体变成了烈性噬菌体。用低剂量的紫外线照射或其他物理、化学方法处

溶原性细菌的自发裂解

  溶原性细菌正常繁殖时,通常不发生裂解现象,只有极少数(大约10-5)溶原性细菌中的原噬菌体会从宿主染色体上切割下来,进行大量复制,并成熟为噬菌体粒子,进而导致宿主细胞裂解,这种现象称为溶原性细菌的自发裂解。即少数溶原性细菌中的温和噬菌体变成了烈性噬菌体。用低剂量的紫外线照射或其他物理、化学方法处

碱裂解法提取质粒DNA

实验概要本实验介绍了碱裂解法提取质粒DNA的实验原理和操作步骤。实验原理碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大

急速裂解法去除红细胞

器材和试剂: 所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。1. 标注体积刻度的试管(圆锥形底);2. 巴斯德吸管(短型和长型);3. 台式离心机;4. 培养级纯净水;5. 2×Hanks平衡盐溶液;6. 储存培养基,含10%血清;实验方法:1. 1000r/min离心原代细胞悬液5min,弃上清;2. 向

常见细胞裂解液及其组分

  在许多细胞内蛋白表达、纯化及蛋白-蛋白互作等免疫实验(如WB、IP、Co-IP、ChIP)中,细胞裂解是关键一步。 图片源自于网络 基本介绍   根据不同细胞类型、蛋白定位及下游应用,需要不同的细胞裂解液进行细

32P标记裂解培养细胞—-温和去垢剂裂解法(对非贴壁)

实验材料待标记的培养细胞试剂、试剂盒37℃标记培养液1 Ci/ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡盐水(TBS) /磷酸盐平衡盐水(PBS)温和裂解缓冲液/RIPA 裂解缓冲液仪器、耗材树脂玻璃挡板(1 in 厚)取液器吸头树脂玻璃盒37℃微量离心管一次性吸管橡皮细胞刮子So