westernblot二抗时间要多久

37度1h,二抗浓度不要过高,否则,背景颜色太深,还可能出现非特异条带。......阅读全文

二抗孵育时间

二抗孵育时间为1至2小时。参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温在摇床上缓慢摇动孵育1至2小时。回收二抗。二抗的浓度一般要参照抗体说明书选择最适当的比例。一抗二抗的选择直接影响实验结果以及背景的深浅。要严格保证反应时间,

western-blot-二抗时间要多久

37度1h,二抗浓度不要过高,否则,背景颜色太深,还可能出现非特异条带。

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一般是室温下一个小时即可。也可适当长些时间!

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37度1h,二抗浓度不要过高,否则,背景颜色太深,还可能出现非特异条带。

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37度1h,二抗浓度不要过高,否则,背景颜色太深,还可能出现非特异条带。

二抗孵育时间及注意事项

  参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。    吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3

二抗孵育时间及注意事项

二抗孵育(Secondary antibody inucubation)    参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。    吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动

一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

流式做简标抗体一抗,二抗分别孵多长时间

(1)单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色。本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体,经洗涤后加入含有抗原之待测样品,如待检样品中有相应抗原存在,即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合,经保温孵育洗涤后,即可加入酶标记特异性抗体,再经孵育洗涤后,加底物显色进行测定,底物降解的量即为欲测抗原的量。(2)单

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(1)单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色。本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体,经洗涤后加入含有抗原之待测样品,如待检样品中有相应抗原存在,即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合,经保温孵育洗涤后,即可加入酶标记特异性抗体,再经孵育洗涤后,加底物显色进行测定,底物降解的量即为欲测抗原的量。(2)单

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elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响

  二抗孵育  参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。  吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如

elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响

  二抗孵育  参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。  吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如

免疫组化二抗和显色时间过长会怎样

血清封闭时间过长会降低阳性率,过短非特异性染色易于出现。增强阳性率的表达,最主要的是抗原修复方法、一抗二抗浓度的恰当选择而不是楼主所说的盲目增加一抗浓度。DAB的浓度与阳性率没有明确的关系,但是低浓度的DAB有助于确定恰当的终止时间。当然,对于组织抗原降低或者一抗敏感性太差,可考虑选择增强型DAB显

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。

免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求

一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,4度过夜(从冰箱拿出后37度复温45min)。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h,浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。