凝胶过滤层析的应用

⑴脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。适用的凝胶为SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱长与直径之比为5-15,样品体积可达柱床体积的25%-30%,为了防止蛋白质脱盐后溶解度降低会形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸铵等挥发性盐类缓冲液使层析柱平衡,然后加入样品,再用同样缓冲液洗脱,收集的洗脱液用冷冻干燥法除去挥发性盐类。 ⑵用于分离提纯:凝胶层析法已广泛用于酶、蛋白质、氨基酸、多糖、激素、生物碱等物质的分离提纯。凝胶对热原有较强的吸附力,可用来去除无离子水中的致热原制备注射用水。 ⑶测定高分子物质的分子量:用一系列已知分子量的标准品放入同一凝胶柱内,在同一条件下层析,记录每一分钟成分的洗脱体积,并以洗脱体积对分子量的对数作图,在一定分子量范围内可得一直线,即分子量的标......阅读全文

影响凝胶过滤分离效果的有哪些因素

  (1)层析柱的选择  层析柱大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择。一般来讲,主要是层析柱的长度对分辨率影响较大,长的层析柱分辨率要比短的高;但层析柱长度不能过长,否则会引起柱子不均一、流速过慢等实验上的一些困难。一般柱长度不超过100cm,为得到高分辨率,可以将柱子串联使用。层

凝胶层析法分离蛋白质操作方法

  本实验通过SephadexG50层析柱,以蒸馏水为洗脱剂,分离血红蛋白(红色,分子量约64500)与硫酸铜(蓝色,分子量249.5)的混合物,从颜色的不同可观察到血红蛋白洗脱快,硫酸铜洗脱较慢。  三.材料  1.仪器 层析柱(直径0.8-1.5cm,长10-20cm);吸管;玻璃棒;小烧杯;2

离子交换层析的应用介绍

离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基氨基乙基

薄层层析的应用和发展

广泛应用于石油、化工、医药、生化等方面。样品用量一般为几至几百微克,是一种较实用、有效的微量分离分析方法。此法也可用于分离制备较大量的样品,即使用较大较厚的薄层板,将样品溶液在起始点处点成条带状,这样可以分离毫克量样品。

免疫亲和层析的应用实例

  抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原,经动物免

对流层析的概念和应用

中文名称对流层析英文名称countercurrent chromatography定  义根据对流分配原理设计的技术,进行无固体支持物的液液层析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

简述离子交换层析的应用

  离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。  离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。

亚基交换层析的原理和应用

中文名称亚基交换层析英文名称subunit-exchange chromatography定  义系将蛋白质的亚基共价连接在层析基质上的一种亲和层析技术。研究与该蛋白其他亚基的相互作用,也可用以纯化与之结合的蛋白质或DNA等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

气液层析的概念和应用

中文名称气液层析英文名称gas-liquid chromatography;GLC定  义固定相由固体的惰性载体和固定液构成,载体提供一个惰性表面,使基本不挥发的液体能够在其表面铺展成薄而均匀的液膜,成为分配平衡的一相,流动相为惰性气体的一种气相层析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与

简述免疫亲和层析的应用

  一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

免疫亲和层析的应用特点

免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。

离子交换层析的技术应用

离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。

液液层析的概念和应用

中文名称液液层析英文名称liquid-liquid chromatography;LLC定  义固定相和流动相皆为液体的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

简述亲和层析的特殊应用

  亲和色谱的用途很广泛,可以用来从细胞提取物中分离纯化核酸、蛋白,还可以从血浆中分离抗体。分离重组蛋白就经常使用亲和色谱。通过基因修饰为蛋白加上一些人为的特性,这些特性使蛋白选择性地与配体结合,从而达到分离的目的。亲和色谱的另一大用途是从血浆中分离抗体。

正相层析的概念和应用

中文名称正相层析英文名称normal-phase chromatography定  义固定相的极性大于流动相的一种液相层析类型。流动相极性越低,被分离的化合物在层析系统中的保留时间越长。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

液相层析的概念和应用

中文名称液相层析英文名称liquid chromatography;LC定  义以液体作为流动相的一种层析法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

离心柱层析的概念和应用

中文名称离心柱层析英文名称spun-column chromatography定  义将小型的层析柱置于离心管中以离心力代替重力进行小量样品的快速层析法。常用于小量样品凝胶过滤脱盐和吸附层析等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

气固层析的概念和应用

中文名称气固层析英文名称gas-solid chromatography;GSC定  义固定相是固体的活性吸附剂,流动相是气体的一种气相层析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

免疫亲和层析的应用实例

  抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原,经动物免

关于纸层析法的应用介绍

  在环境分析测试中,有时用纸层析法分离试样组分,它用于一些精度不高的分析,如3,4-苯并芘。但不如GC、HPLC应用普遍。在做叶绿体色素分离时用到,将叶片碾碎,浸出绿色液体,将液体与层析液(石油醚)混合,将滤纸一端浸入混合液体,四种色素在层析液中的溶解度不同,在滤纸上留下4条色素带。由此观查出各种

液固层析的概念和应用

中文名称液固层析英文名称liquid-solid chromatography;LSC定  义固定相为固体,流动相为液体的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

关于电子捕获层析的应用介绍

  电子捕获层析法具有选择性较好、灵敏度高、检测限低、易于操作和维修等特点,是分析痕量电负性有机化合物最有效的检测器,也是当今GC分析各种基质中PCBs广泛使用的一种检测器。美国EPA8080A方法将气相色谱电子捕获检测检测法作为检测多氯联苯的标准方法。然而,电子捕获层析法不能区分PCBs与象4-4

亲和层析(affinity-chromatography)的应用

亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。1.抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离

凝胶色谱法实验技术—层析柱的基本介绍

  层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高

血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定(凝胶层析法)1

目的要求1.了解蛋白质分离提纯的总体思路。2.掌握盐析法、分子筛层析法、离子交换层析等实验原理及操作技术。 实验原理 血清中蛋白质按电泳法一般可分为五类:清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白,其中γ-球蛋白含量约占16%,100ml血清中约含1.2g左右。

血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定(凝胶层析法)2

(5)20%磺基水杨酸溶液(6)奈氏(Nessler)试剂应用液贮存液;称取碘化钾(KI)7.58g于250ml三角烧瓶中,用蒸馏水5ml溶解,再加入碘(I2) 5.5g溶解,加7~7.5gHg用力振摇10min(此时产生高热,须冷却),直至棕红色的碘转变成带绿色的碘化汞钾液为止,过滤上清液倾入

解析蠕动泵在层析法中的应用

  层析法是一类混合物分离技术,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有广泛的应用。层析法利用混合物中各组分理化性质的差异,将多组分混合物进行分离及测定。按层析机理可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。   泵送和分配培养基、缓冲溶液或其他液体是实验室所执行的常见任务。确保液体以高

凝集素亲和层析法在免疫层析测试的应用

一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

凝胶成像系统应用

  广泛的应用范围:可用于DNA/RNA凝胶、蛋白质凝胶、印迹杂交膜(包括Western, Southern, Northern, Slot/点杂交膜)、放射自显影胶片、酶标板、细菌培养平板等图像的成像及分析处理。  凝胶图像分析软件有助于研究人员正确、迅速地得到电泳照片和分析结果。帮助广大从事分子

关于分子筛层析的基本信息介绍

  分子筛层析又称为凝胶过滤层析或体积排阻层析。分子筛层析是利用有一定孔径范围的多孔凝胶作为固定相。对混合物中各组分按分子大小进行分离的层析技术。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sephadex型号很多,从G10到G2