液相色谱方法论证中的问题
液相色谱方法论证中的问题随着方法建立的进行，可能会出现各种问题，表2中列出其中的一些问题及可能的原因。其他问题还包括：①开始时色谱图中有的谱峰可能比所期望的要宽（塔板数低），或谱峰严重拖尾；②在方法应用中还会发现用同一（或不同）厂家的“规格相同”色谱柱替代原柱后，分离情况会变得难以接受；③常规实验室无法用（规格相同的）另柱重复方法；色谱柱寿命短（如进样不足100次即不能再用）；④（同一色谱柱）重复进样的色谱图不一样，定量精度较差；⑤保留时间从一系列运行的开始直至结束一直漂移；⑥在后面样品的色谱图中可能出现其他峰干扰被测物测定。......阅读全文
液相色谱柱的选择方法
在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。2.聚合物基质：应用pH值范围宽，
选择液相色谱柱的方法
1)硅胶基质填料 1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其它具有极性官能团，如胺基和氰基的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其它极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份zui先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低
液相色谱柱的保养方法
此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇
液相色谱柱的保养方法
此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇
液相色谱柱的保养方法
一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇溶剂备用，所有进入HPLC仪器的溶剂必须经过0.2um或者0.45um过滤膜过滤并脱气；再按柱子的正确方向连接柱子进口端(连接时注意
液相色谱柱的保养方法
此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇
液相色谱柱的保养方法
此法适用于成都摩尔科学仪器有限公司GP-C18、HP-C18、BR-C18、Bio-C18和GP-C8或者其他公司品牌的类似色谱柱。一、 新柱活化由于色谱柱由生产厂家实验室测试完毕密封好后到达您的手中可能经过了一段时间，因此必须对您刚拿到手的柱子进行活化处理：首先，配好65%乙腈/水或者纯甲醇
液相色谱的制备拆分方法
制备规模的拆分方法通常是用于共价非对映异构体混合物的分离，在许多情况中，甚至通过快捷和简便的快速色谱技术(flash chromatography)，用硅胶成功地拆分非对映异构体；而在这种情况下也只需将薄层层析(TLC)的展开系统稍做改动，就可以扩大到较大规模的柱层析拆分之中去。例如用棉酚(104)
高效液相色谱中洗脱溶剂
组别溶剂名称Ⅰ脂肪族醚、三级烷胺、四甲基胍、六甲基磷酰胺Ⅱ脂肪醇Ⅲ吡啶衍生物、四氢呋喃、酰胺（除甲酰胺外）、乙二醇醚、亚砜Ⅳ乙二醇、苯甲醇、甲酰胺、乙酸Ⅴ二氯甲烷、二氯乙烷Ⅵa磷酸三甲苯酯、脂肪族酮和酯、聚醚、二氧六环Ⅵb腈、砜、碳酸丙烯酯Ⅶ硝基化合物、芳香醚、芳烃、卤代芳烃Ⅷ氟烷醇、间甲苯酚、氯仿
液相色谱柱选择方法
一、液相色谱柱选择方法|液相色谱柱选择的简单思路 1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理和化学性质。
液相色谱常用洗脱方法
进行液相色谱分析时，常用两种洗脱方式，一种为等度洗脱，另一种为梯度洗脱。 用等度洗脱进行色谱分离时，由不同溶剂构成的流动相的组成，如流动相的极性、离子强度、pH值等，在分离的全过程中皆保持不变。用梯度洗脱进行色谱分离时，在洗脱过程中含2种或两种以上不同极性溶剂的流动相组成会连续或间歇地改变，其间可
液相色谱柱选择方法
液相色谱柱选择方法 一、液相色谱柱选择方法|液相色谱柱选择的简单思路 1.确定分离目的确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操纵本钱等等。 2.评估分析物的化学性质评估分析物的化学性质..诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。 3.选择合适的色谱柱了解色谱填料的物理
高速液相色谱方法解析
在生物工程中，作为代谢产生的物质群种在分离、精制过程中，生理物质容易失去活性，而且被分离物的分布范围甚广，如在水相溶液中时，性质相类似的蛋白质、氨基酸、核酸（DNA、NRA），抗体以及含有遗传基因结构的生物物质，用通常的化学方法很难进行分离。 80年代中期，采用高速液相色谱方法，便有效地解决了这
高效液相色谱定性方法
与气相色谱相比，高效液相色谱定性的难度更大。HPLC过程中影响待测组分迁移的因素较多，同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下，同一组分在不同色谱柱上的保留值也可能有很大差别。因此，在高效液相色谱分析过程中，对定性分析方法提出了更高的要求。 （1）利用检测器的选择性进
液相色谱操作方法
准备与开机 1．打开主机箱门，在进样阀和检测器间安装合适的色谱柱。 2．打开计算机电源开关，打开LC电源开关。 3．打开柱箱电源开关，设定分析温度。 4．双击计算机桌面上的Instrument online图标进入工作站系统。 二、编辑LC分析方法 1．在Instrument online主界
液相色谱分析时的气泡问题
在我们进行液相色谱分析时，有时会遇到这样一个问题：系统的流路中存在气泡。 由于气泡的存在，会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。 造成上述现象的主要原因有三条： 一是流动相溶液中往往因溶解有氧
液相色谱样品预处理的常见问题
1、色谱图中出现无关的峰，原因有可能是样品过滤器带来污染，解决方法如下： （1）将过滤器浸泡在样品溶剂中并进样试验； （2）改变过滤器类型； （3）采用交替清洗技术； 2、一些或全部化合物的峰比预期的小，尤其是低浓度的样品，原因可能是样品过滤器表面吸附下降，解决方法如下： （1）改变过
液相色谱常见问题及处理办法
一、问：用HPLC进行分析时，保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？ 关于漂移问题： 1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。 2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。 3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。 关于快速变化问题：
液相色谱常见问题及处理办法
问:用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？答:关于漂移问题：1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡 关于快速变化问题 1． 流速发生变化
液相色谱常见问题及处理办法
一、问：用HPLC进行分析时，保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？关于漂移问题：1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。关于快速变化问题：1． 流速发
液相色谱进样前应注意问题
应当注意以下几个问题：(1)样品在流动相中最好是可溶的，如果可能的话，应当用流动相溶解样品，它可使色谱图中低k’段的虚假峰尽可能减少。(2)选择合适的进样阀或注射器。一般说来只要选择适当，都能获得很好的重复性。在选择进样阀时，要考虑它应有较好的清洗条件，并能减少而不是加剧近样过程中通过柱和检测器的紊
液相色谱流动相的优化组合方法
液相色谱应用广泛的是反相色谱，其流动相的优化组合直接关系到分离效果。八十年代二元流动相组成优化依赖于容量因子(k’)的对数值与极性溶剂的摩尔分数关系，根据两者线性关系，可以估算溶质的保留值。曾有人确定过14种二元溶剂系统的容量因子与流动相的关系。Scott,Snyder和Soczeuinski的色谱
液相色谱中反相系统换正相系统
例：反相换正相有些柱子只能用做反相就得换一根正相柱有些正反通用的柱子就不用了，改变流动相就可以了。在更换流动相过程中要冲柱
液相色谱作为常规分析方法在药物分析中的应用
现代药学的迅速发展促进药物及其代谢物在机体内处置过程的研究不断深入，一方面对体内药物分析研究方法和手段提出了越来越高的要求，另一方面也推动了体内药物分析研究方法的蓬勃发展。如今，液相色谱法已成为反映世界各国药典水平先进性的指标之一。 液相色谱法作为药物分析中的zui主要的分析方法，常被作为常规分
高效液相色谱中理论塔板数的计算方法
高效液相色谱中理论塔板数（N）的计算方法主要依据色谱峰的宽度和保留时间来进行。理论塔板数是定量表示色谱柱分离效率的重要参数，其计算方式主要基于峰形的几何特性。下面将详细解释理论塔板数的计算方法，并探讨其与色谱分析相关的其他重要概念：基本计算公式峰宽和保留时间：理论塔板数N可以通过峰宽（W）和保留时间
色谱柱维护保养在液相色谱中的应用
摘要：科学技术的发展，使得色谱技术也得到进一步的发展，不断有新的联用的技术得到应用。生物医学的发展，也不断要求高灵敏和高选择性的方法对研究的对象进行定性和定量的研究。关键词：色谱柱维护与保养高压液相色谱应用引言色谱作为一种分离技术与方法，自本世纪初起已经有100多年的历史了，现在已经成为分析化学学科
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时，流动相在恢复到室温前，基线水平很难稳定，特别是发生漂移，也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时，混合液变化大，往往会与室温相差很大，务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水，水相流动相需经常更换，防止长菌变质。使用去
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时，流动相在恢复到室温前，基线水平很难稳定，特别是发生漂移，也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时，混合液变化大，往往会与室温相差很大，务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水，水相流动相需经常更换，防止长菌变质。使用去
液相色谱使用流动相时需要注意哪些问题
1.色谱柱中的流动相是否会会排干的问题： 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相泵将溶剂瓶中的流动相吸干了HPLC系统由此而停止工作了这会损坏色谱柱吗?泵是否排出了塔中的所有流动相？色谱柱还能用吗事实上，如果泵吸收了溶剂瓶中的流动相，就不会对色谱柱造成损坏,即使泵
液相色谱所用流动相使用时应注意哪些问题
1、流动相恢复到室温后使用。流动相温度与室温相差时，流动相在恢复到室温前，基线水平很难稳定，特别是发生漂移，也容易产生气泡等现象。水与有机溶剂混合时，混合液变化大，往往会与室温相差很大，务必注意。2、做HPLC流动相的试剂应用HPLC级的、水应用二次蒸馏水，水相流动相需经常更换，防止长菌变质。使用去