液相色谱最全故障总结
高效液相色谱仪系统主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 今天泰坦化学就列出几个常见故障现象，并附最全可能性建议，让你把故障挨个排除，重拾信心! 现象1：出现基线不平的现象，后经过冲洗正常，后又出现柱塞杆漏液，换了密封圈后正常，接着测样品时，泵发出很大的噪音，立即停止泵的运行，对泵进行了润滑后，噪音消失，进样后又发现出的峰峰高都特别低，又试了几次最后竟然什么峰也不出了，为什么? 建议： 1,检查液路是否正常,保证流量,密封性都对的 2,不接柱子进纯品看看检测器有没有响应,如果没有就是检测器出问题了 3,检查你的样品是不是正常的 现象2：液相色谱六合进样器，最近堵住了，启动泵进样阀就开始漏......阅读全文
液相色谱流动相不过滤
因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏，而常用的方法是滤过，可采用Millipore滤膜（0.2μm或0.45μm）等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒（或片）。输液泵的滤器应经常清洗或更换。
液相色谱流动相的贮存
液相色谱流动相的贮存流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1：由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况
液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内，不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂，导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统，可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化，也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应
液相色谱流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。
液相色谱维护误区
关于标示 1、色谱柱的流向不能改变 在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？ 其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流
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液相色谱维护误区
关于标示 1、色谱柱的流向不能改变 在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？ 其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那
液相色谱保养知识
1、 色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死(如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相)2、 对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。4、带seal-wash的1100，
如何使用液相色谱
1．电源准备打开稳压器电源开关，须待电压指示至220V后，才能开启其他有关设备。2．LC-600高效液相色谱仪的准备试剂：三氟乙酸乙腈超纯水（Millipore超纯水）冰乙酸溶液配置：贮液瓶与流动相的准备A液0.1%三氟乙酸（三氟乙酸1ml，超纯水999ml）室温保存B液60%乙腈（乙腈600ml，
简述液相色谱理论
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
液相色谱保养知识
1、 色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死(如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相)2、 对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌)。4、带seal-wash的1100，
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
现代液相色谱进展
色谱法最初仅仅是作为一种分离手段，是根据混合物中不同组分在流动相和固定相间具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些组分在两相间进行反复多次的分配，从而得到分离。直到五十年代，人们才开始把这种分离手段与检测系统连接起来，成为一种独特的分析方法，是几十年来分析化学中最富活力的领域之一，也是生命科
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级） 三氟乙酸（TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。（1）线性梯
液相色谱柱通论
选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的 确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命，低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质 评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱 了解色谱填料的物理和化学性
液相色谱的应用
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的
反相高效液相色谱
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合
高效液相色谱柱
一、怎样选择色谱柱 现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。 （1）硅胶基质填料： 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团（NH2，APS）和氰基团（
高效液相色谱技术
高效液相色谱（HPLC：High Performance Liquid Chromatography ）是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术，是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。国际市场
高效液相色谱原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪，具有常规HPLC的基本性能，并扩展了更多智能化的功能，能很好的满足用户的各类不同的应用要求，使用户能更加轻松的使用，并获得准确的分析数据。一、原理：高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论，色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径＞5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱
高效液相色谱原理
以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵，色谱柱，进样器，检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比，液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制，只要求把样品制成溶液即可，非常适合于分离生物大分子、离子型化合物，不稳定的天然产物以
高效液相色谱原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪，具有常规HPLC的基本性能，并扩展了更多智能化的功能，能很好的满足用户的各类不同的应用要求，使用户能更加轻松的使用，并获得准确的分析数据。一、原理：高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论，色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
液相色谱的用途
高效液相色谱应用很广泛，基本能对有机化合物中百分之七十到百分之八十的化合物进行分离与检测，下面以安捷伦液相色谱技术做为举例：应用液相色谱用途广泛，已经成为大多数化学行业和生命科学行业中的标准配置。安捷伦液相色谱和液－质联用系统正为各种客户群服务，如药物研制和生产、蛋白质、食品安全、环境、国土安全和石
高效液相色谱原理
以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵，色谱柱，进样器，检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比，液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制，只要求把样品制成溶液即可，非常适合于分离生物大分子、离子型化合物，不稳定的天然产物以
Waters液相色谱教程
本资料来自于Waters中国有限公司培训中心 包括4个文件： 液相色谱教程(一)液相色谱基础知识A 液相色谱教程(一)液相色谱基础知识B 液相色谱教程(三)液相色谱实验操作 液相色谱教程(四)液相色谱柱基础知识 下载：Waters液相色谱教程
液相色谱柱种类
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类 ①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；②窄径柱（narrow bore），内径1~2mm，柱长10~20cm； ③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm； ④半制备柱，内径＞5mm； ⑤实验室制备柱，内径20~4