核酸电泳的指示剂与染色剂

指示剂 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似. 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液.载样缓冲液的作用有①增加样 品密度,使其比重增加,以确保DNA均匀沉入加样孔内.②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置.③使样品呈色,使加样操作更方便. 染色剂 核酸电泳后,需经染色后才能显现出带型,最常用的是溴化乙锭染色法,其 次是银染色. 溴化乙锭(ethidium bromide,EB)是一种荧光染料,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对 之间,在紫外线激发下,发出红色荧光.根据情况可在凝胶......阅读全文

实验室试剂其他国标试剂的介绍

国标试剂:该类试剂为我国国家标准所规定,适用于检验、鉴定、检测试剂级(RG,红标签):作为试剂的标准化学品。教学试剂:可以满足学生教学目的,不至于造成化学反应现象偏差的一类试剂。指定级 (ZD),该类试剂是按照用户要求的质量控制指标,为特定用户订做的化学试剂。高纯试剂(EP):包括超纯、特纯、高纯、

怎么理解蛋白与核酸的互作

如果是相互作用的话。我的理解是,核酸是细胞内携带遗传信息的物质。在生物蛋白质的合成中占有重要的作用。这就是为什么我们吃了猪肉没有长成猪,而是合成了自己的蛋白质。

简述核酸疫苗的注射途径与方法

  核酸疫苗免疫接种的方法主要分为三种:  ①可产生高转染效率的途径,如肌肉接种;  ②转染效率虽不高,但是经常被用于实验动物接种的途径,如皮下、腹腔内接种;  ③转染效率不高,但有高水平的局部免疫监视,如皮肤、呼吸道接种。  一般地,用注射器直接注射要求DNA为10~200ug枪注射要求的DNA量

核酸提取——RNA提取与DNA的提取

核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量极大,从数万到亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别,在一定浓

核酸提取——RNA提取与DNA的提取

核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量极大,从数万到亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别,在一定浓

质粒DNA的提取与电泳鉴定

质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法: 碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下: 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。 2、37℃振荡培养过夜。 3

电泳仪的维护与保养

  1 电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳仪电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳仪电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求电泳仪必须有良好接地端,以防漏电。  2 电泳仪通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然电泳仪内部附设有保险丝,但短路现象仍有可

凝胶电泳的原理与方法

凝胶电泳的原理比较简单。当一种分子被放置在电场当中时,它们就会以一定的速度移向适当的电极,这种电泳分子在电场作用下的迁移速度,叫做电泳的迁移率。它同电场的强度和电泳分子本身所携带的净电荷数成正比。也就是说,电场强度越大、电泳分子所携带的净电荷数量越多,其迁移的速度也就越快,反之则较慢。由于在电泳中使

凝胶电泳的原理与方法

凝胶电泳的原理比较简单。当一种分子被放置在电场当中时,它们就会以一定的速度移向适当的电极,这种电泳分子在电场作用下的迁移速度,叫做电泳的迁移率。它同电场的强度和电泳分子本身所携带的净电荷数成正比。也就是说,电场强度越大、电泳分子所携带的净电荷数量越多,其迁移的速度也就越快,反之则较慢。由于在电泳中使

电泳仪的维护与保养

1 电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳仪电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳仪电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求电泳仪必须有良好接地端,以防漏电。 2 电泳仪通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然电泳仪内部附设有

电泳仪的维护与保养

  电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳仪电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳仪电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求电泳仪必须有良好接地端,以防漏电。  电泳仪通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然电泳仪内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致电

质粒DNA的提取与电泳鉴定

质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法:碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2mlLB培养基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5

毛细管电泳为什么分不清小片段核酸?

因为核酸的组成只有ATGC四种毛细管电泳分离靠的是电荷质量比的差异可以想见这种荷质比差别是很小的,所以很难分开

核酸蛋白转移电泳及杂交(Southern-Blot、Northern-Blot和...2

(10)倒去预杂交液,加入含探针的杂交液封口,42℃ 6h或过夜。 (11)取出转移膜,按以下条件洗膜 1×SSC,0.1%SDS室温2×15分钟 0.25SSC,0.1%SDS,42℃ 2×15分钟,气中干燥。 (12)将杂交后的膜曝光于X光片,暗盒中放射自显影2~

核酸蛋白转移电泳及杂交(Southern-Blot、Northern-Blot和...1

一、DNA Southern Blot及杂交 本技术可用于基因组DNA特定序列定位,尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性,对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值,其过程包括:样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂糖凝胶电泳分离、分离后水解片断的转移(固定)、特异

全自动核酸电泳分析回收系统助力ccfDNA检测研究

循环游离DNA(circulating cell-free DNA,ccfDNA)是人及动植物体液中、在细胞外,处于游离状态的DNA 分子。作为一种非入侵性的疾病诊断标志物,ccfDNA的检测有望替代目前的侵入性方法,在早期实现疾病的诊断和监控。因此ccfDNA在在液体活检领域掀起一阵新风暴。

高效毛细管电泳仪在核酸分析中的应用

        高效毛细管电泳仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机

高效毛细管电泳仪在核酸分析中的应用

         高效毛细管电泳仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转

DNA的琼脂糖凝胶电泳实验

电泳法             实验方法原理 DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶

培养基的指示剂

 培养基的指示剂是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助:  在培养基中加入一定种类的指示剂,是为了便于观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国蓝等酸碱指示剂。美蓝常用作氧化还原指示剂。

吸附指示剂的作用原理

吸附指示剂是一类有机染料,用于沉淀法滴定。当它被吸附在胶粒表面后,可能是由于形成了某种化合物而导致指示剂分子结构的变化,从而引起颜色的变化。在沉淀滴定中,可以利用它的此种性质来指示滴定的终点。吸附指示剂可分为两大类:一类是酸性染料,如荧光黄及其衍生物,它们是有机弱酸,能解离出指示剂阴离子;另一类是碱

酸碱指示剂的用量要求

碱指示剂应该选用甲基橙作指示剂。酸碱指示剂1.双色指示剂的变色范围不受其用量的影响,但因指示剂本身就是酸或碱,指示剂的变色要消耗一定的滴定剂,从而增大测定的误差。对于单色指示剂而言,用量过多,会使用变色范围向pH值减小的方向发生移动,也会增大滴定的误差。例如:用0.1mol/L NaOH滴定0.1m

酸碱指示剂的制备方法

有许多植物色素在不同pH值的溶液里会呈现出不同的颜色。因此,每个地方都可以就地取材,自制一些酸碱指示剂。下面介绍一些自制的方法:1.从红萝卜皮中提取酸碱指示剂:刮下红萝卜的红皮后,用95%的酒精浸泡一天左右,过滤取出它的滤液即酸碱指示剂。按检验的需要制作pH1~14的标准液若干个,每个标准液取10m

滴定指示剂的选择方法

酸碱指示剂可在中和反应终点时出现颜色变化,因此终点判断须选择合适指示剂。酸碱恰好完全中和的时刻叫滴定终点,为准确判断滴定终点,须选用变色明显,变色范围的pH与恰好中和时的pH吻合的酸碱指示剂。指示剂的变色范围越窄越好,pH稍有变化,指示剂就能改变颜色。石蕊溶液由于变色范围较宽,且在滴定终点时颜色的变

酸碱指示剂的变色原理

  酸碱指示剂既然都是一些有机弱酸或有机弱碱,那么在不同的酸碱性溶液中,它们的电离程度就不同,于是会显示不同的颜色。pH试纸则是由多种指示剂混合液制成的,通常情况下pH试纸就显金黄色,pH≈5,可见在制作时,已将指示剂混合液调至弱酸性,并不是中性,这是为了减弱空气中CO2对测定的影响。此外,中和反应

酸碱指示剂的分类介绍

  常用的酸碱指示剂主要有以下四类:  1、 硝基酚类 这是一类酸性显著的指示剂,如对-硝基酚等。  2、 酚酞类 有酚酞、百里酚酞和α-萘酚酞等,它们都是有机弱酸。  3、磺代酚酞类 有酚红、甲酚红、溴酚蓝、百里酚蓝等,它们都是有机弱酸。  4、偶氮化合物类 有甲基橙、中性红等,它们都是两性指示剂

酸碱指示剂的影响因素

在实际中,影响酸碱指示剂变色范围的因素主要有两方面:一种是影响指示剂常数KHln的因素,包括温度、溶剂、溶液的离子强度等,其中温度的影响较大。另一种是影响变色范围宽度的因素,如指示剂用量、滴定程序等,现具体讨论如下。1.温度温度改变时,指示剂常数KHln及水的离子积KW均有改变,因此指示剂的变色范围

滴定反应的指示剂介绍

滴定反应需要灵敏的指示剂来指示反应的完成。指示剂在反应完成时,会迅速变成另一种颜色。这样实验者就可以根据指示剂的变色来确定反应的终止。中和滴定的指示剂是有机弱酸或弱碱,它们的变色范围在等电点附近。如弱酸的变色(以HIn代表):HIn(酸色形)=H++In-(碱色形)指示剂一般有两种形态,两种形态呈现

最全的生物指示剂知识

1.生物指示剂的历史19世纪末,一位英国医生使用鸡蛋作为生物指示剂,以鸡蛋的凝固来判定灭菌效果,首次从概念上引入了生物指示剂。1955年,美国国立卫生研究院(National Institutes of Health, NIH)使用嗜热脂肪芽孢杆菌制备生物指示剂,因为该菌无致病性、无热原、无

酸碱滴定指示剂的选择

指示剂的选择⑴酚酞:碱滴定酸时:颜色由无色恰好变为浅红色⑵甲基橙:酸滴定碱时:颜色由黄恰好变为橙色。一般不选用石蕊。酸碱中和和滴定指示剂的选择之二:为了减小方法误差,使滴定终点和等当点重合,需要选择适当的指示剂。强酸与弱碱相互滴定时,应选用甲基橙。强碱与弱酸相互滴定时,应选用酚酞。强酸与强碱相互滴定