揭示人类端粒DNA合成关键分子机制

近日,大连化物所所分子模拟与设计研究组(1106组)李国辉研究员团队与上海交通大学医学院精准医学研究院雷鸣教授、武健教授团队合作,在揭示人类端粒DNA合成关键分子机制研究方面取得新进展。 端粒是位于真核生物染色体末端的DNA—蛋白复合体,用于保护染色体在细胞分裂过程中的完整性。端粒的DNA会随着细胞的每次分裂而逐渐缩短,一旦染色体末端端粒DNA消化殆尽,染色体将被降解或发生融合,细胞则会立即启动凋亡机制。因此,端粒被认为与细胞衰老密切相关,是人类抗衰老研究的重点。 在细胞分裂的过程中,端粒酶也将被同时激活用于合成端粒DNA,以补偿端粒在该过程中的损失。人类端粒酶是一种具有逆转录酶活性的多亚基核糖核蛋白复合物,其功能缺失与人类多种端粒综合症有关,例如先天性角化不良(dyskeratosis congenita, DC)和小脑发育不全综合症(Hoyrara Hreidarsson syndrome,HHS)等。在传统逆转录酶......阅读全文

研究阐释人类端粒DNA合成关键分子机制

近日,中国科学院大连化学物理研究所分子模拟与设计研究组研究员李国辉团队与上海交通大学医学院精准医学研究院教授雷鸣、武健团队等合作,在人类端粒DNA合成关键分子机制研究方面取得新进展。  端粒是位于真核生物染色体末端的DNA-蛋白复合体,用于保护染色体在细胞分裂过程中的完整性。端粒的DNA会随着细胞的

揭示人类端粒DNA合成关键分子机制

  近日,大连化物所所分子模拟与设计研究组(1106组)李国辉研究员团队与上海交通大学医学院精准医学研究院雷鸣教授、武健教授团队合作,在揭示人类端粒DNA合成关键分子机制研究方面取得新进展。  端粒是位于真核生物染色体末端的DNA—蛋白复合体,用于保护染色体在细胞分裂过程中的完整性。端粒的DNA会随

我所揭示人类端粒DNA合成关键分子机制

近日,我所分子模拟与设计研究组(1106组)李国辉研究员团队与上海交通大学医学院精准医学研究院雷鸣教授、武健教授团队合作,在揭示人类端粒DNA合成关键分子机制研究方面取得新进展。  端粒是位于真核生物染色体末端的DNA—蛋白复合体,用于保护染色体在细胞分裂过程中的完整性。端粒的DNA会随着细胞的每次

DNA合成仪合成原理

DNA的:即DNA3'端固定于基质上,然后沿3'向5'方向依次添加直至合成所需的DNA片段。不同于应用的DNA合成。合成过程:第一个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用保护,然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。1

DNA合成仪合成原理介绍

DNA合成仪合成原理:DNA的固相合成:即DNA3'端固定于基质上,然后沿3'向5'方向依次添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。合成过程:第一个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯

DNA合成(DNA-synthesis-)技术介绍

蛋白质概念提出:DNA多肽合成(DNA synthesis ):按照预定核苷酸的顺序,将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法,即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸,可自动化操作。)目前,oligo DNA合成一般都采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,此方法具有高效

DNA合成仪简介

  设计用于合成结构上类似DNA或RNA的寡核苷酸的自动化仪器。一般应用于固相合成法,每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上,加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。所用化学反应和操作细节随不同的仪器而改变,最广泛应用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。

DNA合成仪原理

DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基质上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。合成过程个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯甲酸保护,然后对3‘-OH用

DNA合成的概念

中文名称DNA合成英文名称DNA synthesis定  义按照预定核苷酸的顺序,将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法,即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸,可自动化操作。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

互补DNA的合成步骤

1.cDNA第一链的合成所有合成cDNA第一条链的方法都要用依赖于RNA的DNA聚合酶(反转录酶)来催化反应,主要有两个关键因素,一个是mRNA模板,另一个是反转录酶 [3]  。商品化反转录酶有从禽类成髓细胞瘤病毒纯化到的禽类成髓细胞病毒(AMV)逆转录酶和从表达克隆化的Moloney鼠白血病病毒

DNA合成仪的发展

  当前DNA合成仪的主要生产厂商都致力于机器性能的完善和应用领域的开拓以及高效率、高产率的仪器的开发与研究。  台湾科学委员会“基因医药卫生科技尖端研究计划”中的基因生物技术组已经成功研发全世界第一台高密度复制DNA合成仪,可以同时合成384条不同DNA,每日可合成768条DNA,并可以配合聚合酶

DNA合成仪如何分类

DNA合成仪可分为实验室型,工业型和大规模合成三种主要类型。1,实验室型:主要指合成通量较小,且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪,一般为合成柱数低于48柱(含)的DNA合成仪,主要适用于化学生物学实验室,或某些刚起步的商业机构。2, 工业型工业型合成仪,主要指合成通量大,且单柱合成

DNA合成仪的发展

当前DNA合成仪的主要生产厂商都致力于机器性能的完善和应用领域的开拓以及率、高产率的仪器的开发与研究。中国台湾科学委员会“基因医药卫生科技研究计划”中的基因生物技术组已经成功研发**台高密度复制DNA合成仪,可以同时合成384条不同DNA,每日可合成768条DNA,并可以配合聚合酶连锁反应装置,大量

程序外DNA合成试验

  基本方法是测定S期以外3H-胸苷掺入胞核的量,这一掺入量可反映DNA损伤后修复合成的量。由于此种合成发生在DNA正常复制合成主要时期以外,故称为程序外DNA合成(unschedule DNA synthesis UDS)试验或DNA修复合成试验。一般使用人淋巴细胞或啮齿动物肝细胞等不处于正在增殖

DNA合成仪日常维护

1.瓶塞“O”形环一月检查一次“O”形环,最少1年更换1次。将新的备用“O”形环与仪器上的相比较,如果在“O”形环上出现白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,进行清洗。更换“O”形环的步骤如下:用止血钳夹住“O”形环,从槽中取下(或用牙签钩下),注意不要损坏托住“O”形环的白色聚氟乙烯插塞(tefloninse

互补DNA的合成步骤

1.cDNA第一链的合成所有合成cDNA第一条链的方法都要用依赖于RNA的DNA聚合酶(反转录酶)来催化反应,主要有两个关键因素,一个是mRNA模板,另一个是反转录酶 [3]  。商品化反转录酶有从禽类成髓细胞瘤病毒纯化到的禽类成髓细胞病毒(AMV)逆转录酶和从表达克隆化的Moloney鼠白血病病毒

DNA合成仪的合成柱的相关介绍

  起始结合在载体(一般为CPG)上的核苷酸是装在一次性的柱子中,除柱体外,还有2个固定过滤板和2个接头,所有的部件都由惰性材料制成。固定过滤板是多孑L性聚苯乙烯固定在两端盖子中。入口和出口都是母路厄氏(1uer)接头,与仪器的公路厄氏接头配对。柱子是对称的(没有顶端和底部、前后之分),可以以任何方

DNA合成仪的日常维护

 DNA合成仪 -日常维护    1.瓶塞“O”形环  一月检查一次“O”形环,zui少1年更换1次。将新的备用“O”形环与仪器上的相比较,如果在“O”形环上出现白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,进行清洗。更换“O”形环的步骤如下:用止血钳夹住“O”形环,从槽中取下(或用牙签钩下),注意不要损坏托住“O”形

DNA合成仪的日常维护

  1.瓶塞“O”形环  一月检查一次“O”形环,最少1年更换1次。将新的备用“O”形环与仪器上的相比较,如果在“O”形环上出现白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,进行清洗。更换“O”形环的步骤如下:用止血钳夹住“O”形环,从槽中取下(或用牙签钩下),注意不要损坏托住“O”形环的白色聚氟乙烯插塞(teflon

DNA化学合成的应用

 随着DNA合成技术的发展,特别是自动化合成技术的引入,人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DNA片段。目前,DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段,并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中的应用1.1合成基因 

DNA合成仪操作方法

以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤如下:1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的

互补DNA的合成方法

(1)取第一链反应液20uL,再依次加入:10X第二链缓冲液20uLDNA聚合酶123ul。RNaseH0.8ulH2O加至终体积为100/uL(2)轻轻混匀,如需进行第二链同位素掺入放射性活性测定,可取出10uL至另一eppendorf管,加入2~5uLCi[α一32P]dCTP。(3)14℃温浴

DNA化学合成的应用

   随着DNA合成技术的发展,特别是自动化合成技术的引入,人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DNA片段。目前,DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段,并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。   1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中的应用

DNA化学合成的应用

   随着DNA合成技术的发展,特别是自动化合成技术的引入,人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DNA片段。目前,DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段,并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。   1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中的应用

DNA化学合成的应用

随着DNA合成技术的发展,特别是自动化合成技术的引入,人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DNA片段。目前,DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段,并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中的应用1.1合成基因目

DNA合成仪结构和性能

试剂驱动系统一般地,DNA 合成仪采用一定压力的惰性气体(氩气)或氮气及电磁阀组驱动液体试剂,也可采用氦气驱动试剂。某些合成仪采用slider block滑块系统及精密蠕动泵,可不采用气体为驱动系统。采用气体及电磁阀驱动液体试剂时,需首先将管路系统电磁阀前段,含试剂瓶组中压力加压到规定气压,通过合成

非程序DNA合成检测实验

实验方法原理非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis:UDS)即S期外的DNA合成。在一般情况下细胞内DNA合成只见于S期,但当处于非S期细胞DNA受损伤时,随着DNA损伤的修复也将发生DNA合成现象,即UDS。在化学致突变物、致癌物作用诱发细胞DNA损伤时,也诱导DNA

DNA合成仪结构和性能

(一)压力管路及输送管路每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞,对于亚磷酰胺,1—8号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上,而输送管却伸到瓶的底部。当阀门正确设置打开时,储液瓶上部空间由氩气加压,液体被推进输送管,流到其目的地。(二)压力系统   系统压力由超纯氩(99.

非程序DNA合成检测实验

实验方法原理 非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis:UDS)即S期外的DNA合成。在一般情况下细胞内DNA合成只见于S期,但当处于非S期细胞DNA受损伤时,随着DNA损伤的修复也将发生DNA合成现象,即UDS。在化学致突变物、致癌物作用诱发细胞DNA损伤时,也诱导DN

DNA化学合成的应用

    随着DNA合成技术的发展,特别是自动化合成技术的引入,人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DN**段。目前,DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段,并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中的应用1.1合