放射免疫分析含有特异性抗体的抗血清检定
含有特异性抗体的抗血清是放射免疫分析的主要试剂,常以抗原免疫小动物诱发产生多克隆抗体而得。抗血清的质量直接影响分析的灵敏度和特异性。抗血清质量的指标主要有亲和常数、交叉反应率和滴度。①亲和常数(affinityconstant):常用K值表示。它反映抗体与相应抗原的结合能力。K 值的单位为 mol/L,即表示 1mol 抗体稀释至若干升溶液中时,与相应抗原的结合率达到50%。抗血清K值越大,放射免疫分析的灵敏度、精密度和准确度越佳。抗血清的K值达到 109~1012mol/L 才适合用于放射免疫分析。②交叉反应率:放射免疫分析测定的物质有些具有极为相似的结构,例如甲状腺素的 T3、T4,雌激素中的雌二醇、雌三醇等。针对一种抗原的抗血清往往对于其类似物会发生交叉反应。因此,交叉反应率反映抗血清的特异性,交叉反应率过大将影响分析方法的准确性。交叉反应率的测定方法为:用与抗血清相应抗原及其类似物用同法进行测定,观察置换零标准管50%时......阅读全文
放射免疫分析含有特异性抗体的抗血清检定
含有特异性抗体的抗血清是放射免疫分析的主要试剂,常以抗原免疫小动物诱发产生多克隆抗体而得。抗血清的质量直接影响分析的灵敏度和特异性。抗血清质量的指标主要有亲和常数、交叉反应率和滴度。①亲和常数(affinityconstant):常用K值表示。它反映抗体与相应抗原的结合能力。K 值的单位为 mol/
放射免疫分析法的建立1
一、放射免疫分析的基本试剂(一)标准品标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。按实验要求,将标准
放射免疫分析(RIA)中影响标准曲线建立的因素(一)
放射免疫分析(RIA)是由美国生物学家Yalow和Berson于1959年创建的一种体外放射分析技术,该技术有其结果可靠。简便易行,成本低廉,高灵敏度,高特异性的优点。其超微量测定可达ng至pg水平,目前可测物质已达300余种,对临床的诊断和治疗起着积极而重要的作用。在实际工作实践中,标准曲线的制做
概述抗原抗体反应的抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清,对其中所含抗体的浓度,特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清,在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测,对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析,如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀,EL
抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清,对其中所含抗体的浓度,特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清,在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测,对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析,如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀,EL
概述抗原抗体反应的抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清,对其中所含抗体的浓度,特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清,在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测,对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析,如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀,EL
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 封闭试剂 抗体 LB 顶层琼脂糖 LB 平板琼脂培养基 仪器、耗材
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L NaCl
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L N
抗血清中去除交叉反应性抗体实验
本方案介绍一种通过抗血清与细菌裂解液共同温育而从多克隆抗血清中去除与细菌编码蛋白质发生反应抗体的方法。本节介绍的吸收方法仅仅适用于制备含有低滴度抗大肠杆菌抗体的抗血清。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒封闭缓冲液封闭液细胞悬浮缓冲
抗血清中去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 封闭液 细胞悬浮缓冲液 抗体 LB 培养基 仪器、耗材
抗血清中去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液封闭液细胞悬浮缓冲液抗体LB 培养基仪器、耗材 Sorval GSA 转子或相当转子适用于处理细菌的超声波破碎仪大肠杆菌 Y1090 hsdR实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存缓冲液和试剂的组分请见时录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl
关于抗原抗体反应的抗血清的纯化与保存
(1)采血:加强免疫的动物2—3次后,可通过耳静脉或眼球(小鼠)采血,进行抗血清效价测定。当效价达到理想的高度后,可以采血。采血方式可以从心脏直接取血,也可通过动脉放血。待血液凝固后用针筒或吸管吸取血清。 (2)抗血清的纯化与保存:除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体
放射免疫分析平衡饱和加样程序
1.基本原理所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。2.加样程序一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合,提高
放射免疫分析平衡饱和加样程序
一、基本原理所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。二、加样程序一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合,提高
放射免疫分析法的建立
一、放射免疫分析的基本试剂 (一)标准品 标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实
抗体的特异性鉴定
抗体的特异性鉴定 抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在 IC50时的浓度,并按下列公式计算交叉反应率。 如果所用
单克隆抗体与常规抗血清的性质比较
单克隆 抗体与常规抗血清的性质比较免疫球蛋白 性质 常规 血清抗体 单克隆
药物特异性抗体的介绍
抗体(antibody)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于 脊椎动物的血液等体液中,及其 B细胞的细胞膜表面 。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为 抗原。药物特异性抗体即能够特定识别某种或某类药物的抗
双特异性抗体的应用
双特异性抗体的应用:1.在体外免疫检测中的应用2.在体内免疫治疗中的应用3.在体内肿瘤放射免疫显像诊断中的应用
药物特异性抗体的定义
抗体(antibody)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于 脊椎动物的血液等体液中,及其 B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为 抗原。药物特异性抗体即能够特定识别某种或某类药物的抗体
什么是抗体的特异性
抗体是动物接种疫苗后产生的免疫球蛋白。通过一定方法制备的抗血清或高免卵黄抗体均是含有大量抗体的生物制剂。给动物注射抗体制剂后,对于传染病既有预防作用,也有治疗作用。由于动物接种疫苗后,一般需要3~5天,甚至7~10天才会有明显的保护作用,对于发病日龄较早的鸭病,最好在免疫母鸭的基础上,用抗血清或高免
详细介绍放射免疫分析的测定方法有哪些种?
1、液相放射免疫测定方法用放射免疫分析进行测定时分三个步骤,即抗原抗体的竞争抑制反应、B 和 F 的分离及放射性的测量。(1)抗原抗体反应将抗原(标准品和受检标本)、标记抗原和抗血清按顺序定量加入小试管中,在一定的温度下反应一定时间,使竞争抑制反应达到平衡。不同质量的抗体和不同含量的抗原对温育的温度
单克隆抗体培养—含有单克隆抗体的腹水制备
实验步骤材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)裸 鼠 , 6〜8 周龄,无 特 殊 病 原(SPF),或者是同基因型宿主(注射小鼠-小鼠杂交瘤时)姥 鲛 焼(Pristane, 2,6,10,14-四甲基十五焼; Aldrich 公司提供)杂 交 瘤(单 元 1.3)添 加 10 mmol/L H
iScience最新研究:母乳含有新冠抗体
图片来源:《科学家》杂志 根据一项针对15名女性的新研究,哺乳期母亲的乳汁可能具有抵抗新冠感染的强大抗体。研究人员在11月出版的iScience上报告说,所有从新冠肺炎中康复的女性和其他哺乳期女性的母乳样本都含有对新冠病毒刺突蛋白产生反应的抗体。 在母乳中检测到病毒抗体表明母亲可能将病毒免疫力传
双特异性抗体讲解
近年来,随着科技的发展,PD-1、CAR-T细胞疗法均获得了不小的成就,也由此为癌症患者打通了另一条生命之路。与此同时,在免疫治疗领域,还有一项研发同样值得关注,它就是双特异性抗体。双特异性抗体(Bispecific antibody, BsAb)又称双功能抗体,是一种可以同时识别和结合两种不同的抗
抗原与抗体反应的特异性
而抗体抗原结合区的空间构象是由该区的氨基酸序列来决定。氨基酸的序列则由基因序列决定。产生抗体的B细胞在成熟过程中,编码抗体高变区的序列发生随机的突变。如果突变产生的抗体正好能和抗原提呈细胞表面所提呈的抗原结合,那这株B细胞就得以分化,分裂。这个过程叫做阳性筛选。 所以,所谓抗体的特异性,并不是
放射免疫分析的基本试剂是什么
1、标准品标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量来表示被测物质的量,故标准品与被测物质的化学结构应当一致并具有相同的免疫活性。标准品作为定量的基准,应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。按实验要求,将标准品用缓冲液配成含不同剂量的
蛋白质与多肽激素的放射免疫分析3
(四)磁性分离法 1975年,Hersh报道了用磁化分离技术分离血清狄高辛放免测定的B、F后,受到了广泛的重视。近年来国内外许多学者对磁化颗粒的制备进行了系统地研究,应用于B与F的分离,并取得了引人注目的进展,使放免的B、F分离不再使用离心,缩短了放免操作时间,便于放免自动化测量。磁性分离的具体
抗血清的制备
一、目的:1、了解抗血清制备的基本过程:2、掌握抗血清的收集和保存方法。二、原理:抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一种抗原能否引起抗体生成反应,一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇(A