荧光酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌的原理

一、简介荧光酶免疫分析筛选方法是在 EIA 基础上加入荧光标记的酶底物,用荧光计检测荧光度值来判断结果。AOAC989.15方法食品中沙门氏菌单克隆酶免疫荧光和比色筛选法(Q-Trol)》即为此方法。AOAC 公定方法 989.15是用于对存在于所有食品中沙门氏菌的推定方法,因为试验中使用的单克隆抗体可与少数非沙门氏菌产生交叉反应,故不是一个确证试验。用酶免疫分析(EIA)法测到的阳性样品增菌肉汤和M肉汤必须按常规标准方法划选择性平板对典型或可疑菌落进行鉴定。二、原理此方法是基于 EIA 测定食品中沙门氏菌抗原。沙门氏菌抗原的单克隆抗体附着在塑料微量板小孔的内表面上。将待检样品加到微量板的孔中,如果样品有沙门氏菌抗原存在,它们就与吸附在孔穴表面的抗体结合,样品中的其他物质则被冲洗掉。加入与碱性磷酸酶接合的沙门氏菌抗体。如果其与附着于孔表面吸附的抗体上的沙门氏菌抗原结合,这就形成了抗体抗原抗体复合物。洗去没有结合的接合......阅读全文

荧光酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌的原理

一、简介荧光酶免疫分析筛选方法是在 EIA 基础上加入荧光标记的酶底物,用荧光计检测荧光度值来判断结果。AOAC989.15方法食品中沙门氏菌单克隆酶免疫荧光和比色筛选法(Q-Trol)》即为此方法。AOAC 公定方法  989.15是用于对存在于所有食品中沙门氏菌的推定方法,因为试验中使用的单克隆

沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程酶免疫检测

  ①FS法  a.接通荧光计和打印机电源,至少预热1h。  b.从铝箔袋中取出所需数量的微孔测试板每个食品样品一个孔,另加4个孔做对照用。将板稳固地卡入托架中。各移取100μL 阴性对照抗原于A-1,A-2和A-3的每个孔中。移取100μL 阳性对照抗原于A-4中。移取每100μL 加热的M肉汤样

荧光酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌的实验过程

一、实验准备  以下试剂都必须在开始分析之前准备好。①PBS 吐温溶液。②对照抗原  移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。④终止液不需要复原。如果出现结晶可在35℃

沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂

  ①吸附有抗体的微量孔板 为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2~8℃贮存,可稳定28天。  ②微量板托架 足以固定单个孔杯或测试条。  ③对照抗原 阳性对照:1瓶(煮沸后冻干的鼠伤寒沙门氏菌悬液)可与沙门氏菌抗体反应;阴性对照:1瓶(煮沸后冻干的奇异变形杆菌悬液)不与沙门氏菌

沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂介绍

  荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂   所用试剂均可购自 Dynatech Laboratories Inc。Q-Trol Salmonella MICRO -ELISAK 检验盒(ME)法和Q-Trol目测检验盒(VI和VR法)包括①~⑦,⑧a.和⑩。   ①吸附有抗体的微量孔板 为8行带有沙

酶标仪沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程

  一、实验准备   以下试剂都必须在开始分析之前准备好。   ①PBS 吐温溶液。   ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。   ③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。   ④

多克隆酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌

多克隆酶免疫分析筛选方法本方法由酶免疫分析方法(EIA)测得的阳性样品的增菌肉汤和 M 肉汤必须依照常规标准方法中所指示的,在选择性培养基上做划线接种,并必须将典型或可疑菌落按标准方法进行生化和血清学鉴定。对于阳性结果的确定①可借助比色计卡进行视觉检查,当判断阴性和阳性对照符合卡上所描述的标准时,阳

沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程实验准备

  以下试剂都必须在开始分析之前准备好。  ①PBS 吐温溶液。  ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。  ③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。  ④终止液不需要复原。如果出现结晶可在35

沙门氏菌多克隆酶免疫分析筛选方法

  本方法由酶免疫分析方法(EIA)测得的阳性样品的增菌肉汤和 M 肉汤必须依照常规标准方法中所指示的,在选择性培养基上做划线接种,并必须将典型或可疑菌落按标准方法进行生化和血清学鉴定。   对于阳性结果的确定   ①可借助比色计卡进行视觉检查,当判断阴性和阳性对照符合卡上所描述的标准时,阳性结

荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂

①吸附有抗体的微量孔板  为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2~8℃贮存,可稳定28天。②微量板托架  足以固定单个孔杯或测试条。③对照抗原  阳性对照:1瓶(煮沸后冻干的鼠伤寒沙门氏菌悬液)可与沙门氏菌抗体反应;阴性对照:1瓶(煮沸后冻干的奇异变形杆菌悬液)不与沙门氏菌抗体反

沙门氏菌单克隆酶免疫色度分析筛选方法

  单克隆酶免疫色度分析筛选方法  AOAC 方法:986.35,987.11,993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek)》为例做一介绍。  该方法阳性的检测结果应是客观的,必须用配有450nm 滤光片的光度计来进行测试

沙门氏菌自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法

  自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法   VIDAS 和 mini-VIDAS 是一种全自动免疫分析仪,如下图所示,它集合计算机、键盘、打印机于一身,应用酶联免疫分析原理,应用夹心技术,最终检测蓝色荧光(4-甲基伞形基磷酸盐,ELFA),所测的荧光与抗原成正比。此方法已通过 AOAC

荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂有哪些?

所用试剂均可购自 Dynatech Laboratories Inc。Q-Trol Salmonella MICRO- ELISAK 检验盒(ME)法和Q-Trol目测检验盒(VI和VR法)包括①~⑦,⑧a.和⑩。①吸附有抗体的微量孔板  为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2~

荧光酶免疫分析筛选方法所用样品制备过程

一、仪器①微量孔板的洗孔器或移液器  有12个管可以洗整个的板。②微量移液器  能够吸移5~200μL 液体。③水浴  能够于100℃恒温,亦可用调至100℃的高压灭菌器代替作为流动蒸汽发生器。④荧光计  用于 FS 检测。测量微量孔内容物的相对荧光量(MicroFLUOR Reader Dynat

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法的原理

此沙门氏菌的抗原鉴别是基于在 VIDAS 仪器内进行的酶联荧光免疫分析。像吸液管的装置是固相容器(SPR),在分析中既作为固相也作为吸液器。SPR 包被有高特异的单克隆抗体混合物。分析的每一步都是自动进行的。在前增菌、选择性增菌和部分试验的后增菌后,煮沸一定量的增菌肉汤加入试剂条,肉汤中的混合物在特

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法的原理

此沙门氏菌的抗原鉴别是基于在 VIDAS 仪器内进行的酶联荧光免疫分析。像吸液管的装置是固相容器(SPR),在分析中既作为固相也作为吸液器。SPR 包被有高特异的单克隆抗体混合物。分析的每一步都是自动进行的。在前增菌、选择性增菌和部分试验的后增菌后,煮沸一定量的增菌肉汤加入试剂条,肉汤中的混合物在特

单克隆酶免疫色度筛选法分析沙门氏菌

单克隆酶免疫色度分析筛选方法AOAC 方法:986.35,987.11,993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek)》为例做一介绍。该方法阳性的检测结果应是客观的,必须用配有450nm 滤光片的光度计来进行测试。只有当阴性

单克隆酶免疫色度分析筛选方法

  单克隆酶免疫色度分析筛选方法   AOAC 方法:986.35,987.11,993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek)》为例做一介绍。   该方法阳性的检测结果应是客观的,必须用配有450nm 滤光片的光度计来

单克隆酶免疫色度分析筛选方法

  (1)原理   沙门氏菌抗原的检测是基于用特异性单克隆抗体进行的酶免疫分析(EIA)用抗沙门氏菌抗原的单克隆抗体包被于聚苯乙烯微量小孔的内表面,将样品和对照加入中。样品中如有沙门氏菌抗原存在,则将被吸附在孔上的特异性抗体吸收。冲洗小孔后,加入接合剂与被抗体吸收的沙门氏菌抗原结合。再冲洗小孔,

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法酶免疫测定

①试剂条上标注有所需编码(1是食品测试样品)。试剂盒提供每一系列测试所需的阳性对照(C1),阴性对照(C2)和抗原标准液(S1)。试剂条需恢复至室温。②混合均匀每一阳性对照、阴性对照和抗原标准液。③各吸取0.5mL 阳性对照、阴性对照、抗原标准液和按(5)④步骤煮沸的M肉汤加入到试剂条的测试孔中。④

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法介绍

  自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法   VIDAS 和 mini-VIDAS 是一种全自动免疫分析仪,如下图所示,它集合计算机、键盘、打印机于一身,应用酶联免疫分析原理,应用夹心技术,最终检测蓝色荧光(4-甲基伞形基磷酸盐,ELFA),所测的荧光与抗原成正比。此方法已通过 AOAC

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法试剂准备

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法试剂准备①试剂条  六十条十个孔的聚丙烯条,每一条都由锡箔密封并都有固定的标签。②SPR  六十条,包被有抗沙门氏菌抗体。③抗原标准液  一瓶(3mL),含有纯净的无活性的沙门氏菌抗原及0.1%的叠氮化钠和蛋白质稳定剂。④阳性对照  一瓶(6mL),含有纯

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法试剂要求

①试剂条  六十条十个孔的聚丙烯条,每一条都由锡箔密封并都有固定的标签。②SPR  六十条,包被有抗沙门氏菌抗体。③抗原标准液  一瓶(3mL),含有纯净的无活性的沙门氏菌抗原及0.1%的叠氮化钠和蛋白质稳定剂。④阳性对照  一瓶(6mL),含有纯净的无活性的沙门氏菌抗原及0.1%的叠氮化钠和蛋白质

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法试剂准备

   自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法试剂准备  ①试剂条 六十条十个孔的聚丙烯条,每一条都由锡箔密封并都有固定的标签。  ②SPR 六十条,包被有抗沙门氏菌抗体。  ③抗原标准液 一瓶(3mL),含有纯净的无活性的沙门氏菌抗原及0.1%的叠氮化钠和蛋白质稳定剂。  ④阳性对照 一瓶(6

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法的仪器要求

①VIDAS 或 mini-VIDAS 全自动免疫分析系统。②培养箱  35℃±1℃和42℃±1℃。③水浴箱  100℃。

荧光免疫分析原理

  荧光免疫检测技术具有专一性强、灵敏度高、实用性好等优点,因此它被用于测量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白质(酶、接受体、抗体)、激素(甾族化合物、甲状腺激素、酞激素)、药物及微生物等  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原

单克隆酶免疫色度分析筛选方法需要哪些仪器?

①微量条板架  能放置1~8个微量条板的聚苯乙烯框架。②条板密封纸  覆盖微量板的粘合纸。③内嵌式包装物  (用于固定放置试剂)。④培养箱  能于35.0℃±0.1℃~37.0℃±0.1℃恒温。⑤水浴箱a.能于42.0℃±0.5℃和35.0℃±1.0℃恒温。b.能于100.0℃±0.1℃恒温。(注意

荧光免疫分析的原理

  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原理是基于未标记的抗原(Ag)和标记抗原(Ag-L)竞争结合有限的抗体(Ab)而实现的免疫分析法。检测时,Ab和Ag-L的浓度是固定的。当未标记的Ag加到Ab和Ag-L的免疫混合物中后,Ag

荧光免疫分析的原理

  作为免疫分析法的一种,FIA同样存在两种模式,即竞争型和夹心型。其中竞争型(以标记抗原的竞争型为例)的测定原理是基于未标记的抗原(Ag)和标记抗原(Ag-L)竞争结合有限的抗体(Ab)而实现的免疫分析法。检测时,Ab和Ag-L的浓度是固定的。当未标记的Ag加到Ab和Ag-L的免疫混合物中后,Ag

如何用酶标仪分析沙门氏菌荧光酶?

  一、实验准备   以下试剂都必须在开始分析之前准备好。   ①PBS 吐温溶液。   ②对照抗原 移取3mLPBS-吐温溶液放于阳性对照瓶中,充分混合。这些溶液分别为复原的阴性和阳性对照抗原。   ③酶接合剂10mL(1瓶)接合剂稀释液于接合剂瓶中,混合并使其在室温下再水化。   ④