蛋白质染色的几种方法
蛋白质可以跟许多试剂发生颜色反应.例如在鸡蛋白溶液中滴入浓硝酸,则鸡蛋白溶液呈黄色.这是由于蛋白质(含苯环结构)与浓硝酸发生了颜色反应. 还可以用双缩脲试剂对其进行检验,该试剂遇蛋白质变紫......阅读全文
转印到膜上的蛋白质检测实验_金染色
实验材料蛋白质试剂、试剂盒金染料溶液仪器、耗材摇床实验步骤1. 如”印度墨汁染色“之第1步操作洗涤转印膜。 2. 在AuroDye胶体金染料溶液中染色3 h,或连续摇动过夜。3. 用水冲冼膜,晾干。
蛋白质硝酸银染色试剂盒使用说明
主要用途YIJI蛋白质硝酸银染色试剂是一种旨在使用硝酸银通过固着、清洗和染色,直接在聚丙烯酰胺凝胶上显色,在清晰背景上产生灵敏度10 纳克以下蛋白质的银色条带的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于蛋白电泳包括 IEF 的检测。产品即到即用,性能稳定,操作便捷,
方案11-胶内蛋白质的硝酸银染色实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒乙酸显影液固定液甲醇硫酸银水溶液终止反应液仪器、耗材塑料皿摇床实验步骤1.将凝胶放在塑料皿中(用一次性的塑料皿或者彻底洗过的塑料皿),加入足量的固定液以覆盖凝胶。固定 20 min, 并轻轻摇动。2.弃掉固定液,加人足量的 50% 甲醇覆盖胶,轻轻摇动
方案10-胶内蛋白质的锌/咪唑负染色实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒固定液咪唑硫酸锌仪器、耗材摇床实验步骤方法 1: 直接用咪唑、SDS 和锌负染色1.将胶浸放在固定液中 20 min,并轻轻摇动。2.弃掉固定液,用去离子水洗胶 2 次,轻轻摇动 15 min。3.将胶与含有0.1%SDS 的 0.2mol/L 咪唑共孵
蛋白质硝酸银染色试剂盒产品说明书
主要用途 YIJI蛋白质硝酸银染色试剂是一种旨在使用硝酸银通过固着、清洗和染色,直接在聚丙烯酰胺凝胶上显 色,在清晰背景上产生灵敏度10 纳克以下蛋白质的银色条带的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科 学家精心研制、成功实验证明的。其适用于蛋白电泳包括 IEF 的检测。产品即
转印到膜上的蛋白质检测实验_印度墨汁染色
实验材料蛋白质试剂、试剂盒PBSTween印度墨汁仪器、耗材摇床实验步骤1. 将转印膜置于塑料容器中,在旋转摇床中于37℃用Tween 20溶液洗涤3次,每次30 min,然后再于室温用Tween 20溶液洗2次,每次30 min。2. 用印度墨汁溶液染膜3 h或过夜。 3. 在Tween 2
方案9-胶内蛋白质的考马斯亮蓝染色实验
实验材料通过电泳分离的凝胶内蛋白质试剂、试剂盒考马斯亮蓝染色液脱色液仪器、耗材玻璃纸塑料制凝胶干燥框机械摇床塑料皿塑料包装纸高级纸巾实验步骤一、染胶除非特别提到,否则应在室温下进行染色。1.把含有目标蛋白质的凝胶放到装有考马斯亮蓝染色液的塑料皿中,使染色液覆盖凝胶。把塑料皿放到机械摇床上,在室温下染
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水
人类染色体姊妹染色单体差别染色
姊妹染色单体区分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt(1973)在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),当用Hoechst33258 荧光染料染色时,发现了姊妹染色单体的色差反映和它们
体内甲醛交联及染色质免疫沉淀研究DNA和蛋白质作用
染色质由真核基因组包装而成,它参与了转录、复制、重组、修复等许多以DNA一蛋白质相互作用为基础的生化过程。研究者感兴趣的是这些过程涉及到哪些特异的基因或DNA序列,有哪些蛋白质参与。尽管有许多人对染色质进行分类,就像Holde将其分为转录活性或非活性位点,但染色质构本身是动态的,并且DNA与非组蛋白
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
姐妹染色单体分化染色方法
姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体,能借以观察姐妹染色单体互换(SCE)现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化(有生理波动),也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
革兰氏染色液染色法
1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2.结晶紫染色液。 3.革兰氏碘液。 4.95%酒精。 5.番红染液。 6.载玻片。方 法 一、涂片标本的制备(见实验一) 二、革兰氏染色法 1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗
间接染色步骤(细胞表面染色)
实验概要间接标记需要两个孵育步骤,先与一抗再与合适的第二抗体孵育,二抗(不是一抗)结合了荧光染料(FITC、PE、Cy5 等)。请注意这是一个普遍的程序,您可以根据自己的使用情况进行调整。实验步骤1. 收集并洗涤细胞,然后确定细胞总数。细胞通常在聚苯乙烯的圆底 12 x 75 mm2 Falcon
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体D
染色质染色体和染色单体的区别
(1)、染色质和染色体的主要成分都是DNA和蛋白质,它们之间的不同,不过是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。 染色质出现于间期,呈丝状。它们在核内的螺旋程度不一,螺旋紧密的部分,染色较深,有的螺旋松疏染色较浅,染色质在光镜下呈现颗粒状,不均匀地分布于细胞核中。细胞分裂时染色质细
血细胞化学染色的染色法—铁染色的介绍
(1)血细胞化学染色的染色法—铁染色的原理:人体内有一定量的以铁蛋白和含铁血黄素形式贮存的铁元素,这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应,生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀(普鲁士蓝),定位于含铁的部位。 (2)血细胞化学染色的染色法—铁染色的操作方法:将染色液滴加在骨髓小粒丰富的骨髓涂片上,室温20~30
血细胞化学染色的染色方法—-糖原染色(PAS)的介绍
(1)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。 (2)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液
分离血清蛋白质的凝胶电泳实验中常用染色剂有哪些
血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋原白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。
从总细胞抽提物中确定与染色质结合的蛋白质实验
免疫共沉淀的方法实验方法原理完整的细胞经甲醛处理通过蛋白质-DNA 和蛋白质-蛋白质之间的交联固定体内染色质的结构。抽得细胞总抽提物并进 超声破碎使染色质溶解并将 DNA 剪切为适当长度的片段。可溶的染色质与感兴趣蛋 白质的一抗孵育,蛋白质-抗体复合物可以通过与偶联到 Sepharose 上的 G
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中取
姐妹染色单体分化染色法
1. 实验原理 姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处理技术。1973年Latt在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromode Oxyurdine,BrdU),用Hoechst 3
细菌的简单染色和革兰氏染色
(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。(二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
细菌的简单染色和革兰氏染色
(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。(二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
细菌的简单染色和革兰氏染色
(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 (二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或
脂质染色实验_苏丹-III-染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒苏丹 III乙醇蒸馏水自来水甘油明胶盐酸乙醇Harris 苏木精仪器、耗材弯钩玻璃棒载玻片实验步骤苏丹 III 染色液:苏丹 III 2.5 g,70% 乙醇 500 ml,充分溶解后,室温下形成饱和溶液,可存放较长时间。1. 冰冻组织切片厚 10~20 μm 左右,采用
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。实验步骤碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)一、实验试剂:1. 萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液:10ml5%石炭酸溶液: 90m
革兰氏染色法的染色原理
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由