什么是毛细管电泳

毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。......阅读全文

毛细管电泳的优缺点

体内药物分析又称生物药物分析,主要指利用现代分析仪器及方法对人或动物血样、尿样及组织等样品中的药物进行定性、定量分析。广义的体内药物分析包括通过了解药物在体内的变化情况,从而获得各种药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄等信息,有助于药物的实验研究、生产控制以及临床合理应用。体内药物分析方法的完善与提高

毛细管电泳的分离原理

电泳和电渗流并存,在不考虑相互作用的前提下,粒子在毛细管内电介质中的迁移速率是两种速率的矢量和,在典型的毛细管电泳分离中,溶质的分离基于溶质间电泳速率的差异。电渗流的速率绝对值一般大于粒子的电泳速率,并有效地成为毛细管电泳的驱动力。溶质从毛细管的正极端进样,带正电的粒子最先流出,中性粒子次之,带负电

毛细管电泳的优缺点

体内药物分析又称生物药物分析,主要指利用现代分析仪器及方法对人或动物血样、尿样及组织等样品中的药物进行定性、定量分析。广义的体内药物分析包括通过了解药物在体内的变化情况,从而获得各种药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄等信息,有助于药物的实验研究、生产控制以及临床合理应用。体内药物分析方法的完善与提高

毛细管电泳实验讲义(一)

实验目的:1 进一步理解毛细管电泳的基本原理;2 熟悉毛细管电泳仪器的构成;3 了解影响毛细管电泳分离的主要操作参数。实验原理:1.电泳淌度毛细管电泳(CE)是以电渗流 (EOF)为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种液相微分离技术。离子在自由溶液中的

毛细管电泳的仪器系统

毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。1-温度控制系统;2-高压电源;3-高压电极槽;4-毛细管;5-检测器;6-低压电极槽;7-铂丝电极;8-记录/数据处理由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检

毛细管电泳影响分离因素

  毛细管电泳影响分离因素  1.缓冲液  缓冲试剂的选择主要由所需的pH决定,在相同的pH下,不同缓冲试剂的分离效果不尽相同,有的可能相差甚远。CE中常用的缓冲试剂有:磷酸盐、硼砂或硼酸、醋酸盐等。  缓冲盐的浓度直接影响到电泳介质的离子强度,从而影响Zeta电势,而Zeta电势的变化又会影响到电

毛细管电泳实验讲义(二)

表1  6种CE分离模式的分离依据及应用范围全屏显示表格分离模式分离依据应用范围毛细管区带电泳(CZE)溶质在自由溶液中的淌度差异可解离的或离子化合物、手性化合物及蛋白质、多肽等毛细管胶束电动色谱(MECC)溶质在胶束与水相间分配系数的差异中性或强疏水性化合物、核酸、多环芳烃、结构相似的肽段毛细管凝

毛细管电泳法的特点

1、电泳柱效更高,可达105m-1~106m-1,分离速度更快,在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。2、溶剂和试样消耗极少,试样用量仅为纳升级。3、没有高压泵输液,因此仪器成本更低。4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分,毛细管电泳有很大的选择性,可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。

毛细管电泳的技术缺点

毛细管电泳的缺点是:(1) 由于进样量少,因而制备能力差;(2) 由于毛细管直径小,使光路太短,用一些检测方法(如紫外吸收光谱法)时,灵敏度较低;(3)电渗会因样品组成而变化,进而影响分离重现性。

毛细管电泳的技术优点

毛细管电泳具备如下优点:(1)高效塔板数目在105-106 片/m 间,当采用CGE 时毛细管电泳色谱图,塔板数目可达107 片/m 以上;(2)快速一般在十几分钟内完成分离;(3)微量进样所需的样品体积为nL 级;(4)多模式可根据需要选用不同的分离模式且仅需一台仪器;(5)经济实验消耗不过几毫升

毛细管电泳技术缺点

毛细管电泳的缺点是:(1) 由于进样量少,因而制备能力差;(2) 由于毛细管直径小,使光路太短,用一些检测方法(如紫外吸收光谱法)时,灵敏度较低;(3)电渗会因样品组成而变化,进而影响分离重现性。

毛细管电泳法的特点

1、电泳柱效更高,可达105m-1~106m-1,分离速度更快,在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。2、溶剂和试样消耗极少,试样用量仅为纳升级。3、没有高压泵输液,因此仪器成本更低。4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分,毛细管电泳有很大的选择性,可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。毛

毛细管电泳分离因素温度

温度温度影响分离重现性和分离效率,控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高,缓冲液粘度降低,管壁硅轻基解离能力增强,电渗速度变大,分析时间减短,分析效率提高。但温度过高,会引起毛细管柱内径向温差增大,焦耳热效应增强,柱效降低,分离效率也会降低。

毛细管电泳的结合常数

生物体内,蛋白质是必不可少的生命物质,是药物的重要靶点之一。研究药物与蛋白质之间的相互作用,有助于了解药物在体内的运输和分布的情况,对于阐明药物的作用机制、药代动力学以及药物的毒性都有非常重要的意义。药物分子与蛋白质分子相互结合的主要部位是蛋白质上的碱性氨基酸残基,相互作用力主要有静电作用、氢键、疏

微量制备毛细管电泳实验

多次分离 单次分离             实验方法原理 实验材料 多肽:ACTH 4-10

毛细管电泳法的特点

1、电泳柱效更高,可达105m-1~106m-1,分离速度更快,在几十秒至几十分钟内即可完成一个试样的分析。2、溶剂和试样消耗极少,试样用量仅为纳升级。3、没有高压泵输液,因此仪器成本更低。4、通过改变操作模式和缓冲溶液的成分,毛细管电泳有很大的选择性,可以对性质不同的各种分离对象进行有效的分离。

毛细管电泳仪毛细管电泳仪运行期间的清洁处理方法

毛细管电泳仪(以下简称仪器)是根据在电解质溶液中,带电粒子在高压电场作用下,以不同的速度定向迁移的现象来达到组分分离的目的。各组分分离后通过检测器进行检测,并根据各组分的迁移时间和响应值进行定性、定量分析。电泳的支持物是弹性石英毛细管。  毛细管电泳仪每次运行间毛细管的清洁处理:  ·在相同实验条件

毛细管电泳要loading-buffer么

loading buffer的作用不仅仅是有染色,loading buffer的成分往往还有甘油或者蔗糖这是最关键的一点是要将你的样的密度加大,只有加大密度才能在你点样的时候,使得你的样品比TAE的密度大,从而沉的点样孔里边.所以你的问题就可以解释了,如果是6X的,那么应该是5ul的样+1ul的lo

毛细管电泳的质谱联用

Olivares,Smith和Henion等分别在1987-1988年提出毛细管电泳-质谱联用(CE-MS)技术,在CE中,紫外检测器由于通过样品的光程较短导致灵敏度较低,特别对一些紫外吸收较弱的化合物的检测。近年由于大气压电离(API)、电喷雾电离(ESI)及新型质谱仪的快速扫描等新技术的出现,足

毛细管电泳的质谱联用

Olivares,Smith和Henion等分别在1987-1988年提出毛细管电泳-质谱联用(CE-MS)技术,在CE中,紫外检测器由于通过样品的光程较短导致灵敏度较低,特别对一些紫外吸收较弱的化合物的检测。近年由于大气压电离(API)、电喷雾电离(ESI)及新型质谱仪的快速扫描等新技术的出现,足

毛细管电泳的定义和应用

毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,

毛细管电泳分离因素进样

进样CE的常规进样方式有两种:流体力学和电迁移进样。电迁移进样是在电场作用下,依靠样品离子的电迁移和(或)电渗流将样品注入,故会产生电歧视现象,会降低分析的准确性和可靠性,但此法尤其适用于粘度大的缓冲液和CGE情况。流体力学进样是普适方法,可以通过虹吸、在进样端加压或检测器端抽空等方法来实现,但选择

毛细管电泳仪的保养

  卡槽的清洁   松开固定卡槽前方Holder的螺丝,用羊毛刷及ddH2O清洁卡槽,然后用干净的刷子将其擦干,如果可以的话,可以用异丙醇,甲醇或者乙醇代替水进行清洁,这样保存的时间较长。   压力电极的清洁   吸入端电极的清理非常重要,利用甲醇,异丙醇,或者乙醇清洁内部及其顶端。在电极内部

毛细管电泳的分离模式介绍

  (1)毛细管区带电泳,用以分析带电溶质。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁涂层。  (2)毛细管凝胶电泳,在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶,主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质,如葡聚糖、聚环氧乙烷,装入毛细管中进行分析,称毛细管无胶筛分电泳,

高效毛细管电泳(HPLC)的特点

高效毛细管电泳(HPLC)亦即毛细管电泳(CE),是一种发展迅猛的新型的分离分析技术,与常用的高效液相色谱法(HPLC)相比,具有分析时间短,分离效率高,适应性广,检测限低,进样量小,溶剂消耗少,自动化程度高等优点,近十多年来已广泛应用于蛋白质、氨基酸、无机离子、有机化合物、药物的分离分析,在生物医

毛细管电泳的应用前景(一)

一, 毛细管电泳的兴起与发展毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE),又称高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展最快的分析化学研究领域之一.1981年Jorgenson等[1]在75μm内径的毛细管内用高电压进行分离,创立了现代毛细管电泳.1984年Terabe等

毛细管电泳的微全分析

  1990年瑞士Ciba-Geigy公司的Manz和Widmer首次提出微全分析系统(Miniaturized total chemical analysis system,μ-TAS)的概念和设计,把微全分析系统的主要构型定位为一般厚度不超过5 mm,面积为数平方厘米至十几平方厘米的平板芯片(包

毛细管电泳仪电渗相关

  电渗是推动样品迁移的另一种重要动力。所谓电渗是指毛细管中的溶剂因轴向直流电场作用而发生的定向流动。电渗是由定域电荷引起。定域电荷是指牢固结合在管壁上、在电场作用下不能迁移的离子或带电基团。在定域电荷对溶液中的 反号离子吸引下形成了所谓的双电层,致使溶剂在电场作用(以及碰撞作用)下整体定向移动而形

毛细管电泳仪分析优点

毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。一、柱效高:理论塔

毛细管电泳的分离因素介绍

  温度  温度影响分离重现性和分离效率,控制温度可以调控电渗流的大小。温度升高,缓冲液粘度降低,管壁硅轻基解离能力增强,电渗速度变大,分析时间减短,分析效率提高。但温度过高,会引起毛细管柱内径向温差增大,焦耳热效应增强,柱效降低,分离效率也会降低。  添加剂  在电解质溶液中加入添加剂,例如中性盐