毛细管电泳实验讲义(二)

表1 6种CE分离模式的分离依据及应用范围全屏显示表格分离模式分离依据应用范围毛细管区带电泳(CZE)溶质在自由溶液中的淌度差异可解离的或离子化合物、手性化合物及蛋白质、多肽等毛细管胶束电动色谱(MECC)溶质在胶束与水相间分配系数的差异中性或强疏水性化合物、核酸、多环芳烃、结构相似的肽段毛细管凝胶电泳(CGE)溶质分子大小与电荷/质量比差异蛋白质和核酸等生物大分子毛细管等电聚焦(CIEF)等电点差异蛋白质、多肽毛细管等速电泳(CITP)溶质在电场梯度下的分布差异(移动界面)同CZE,电泳分离的预浓缩毛细管电色谱(CEC)电渗流驱动的色谱分离机制同HPLC毛细管区带电泳(CZE)是最简单的CE模式,因为毛细管中的分离介质只是缓冲液。在电场的作用下,样品组分以不同的速率在分立的区带内进行迁移而被分离。由于电渗流的作用,正负离子均可以实现分离。在正极进样的情况下,正离子首先流出毛细管,负离子最后流出。中性物质在电场中不迁......阅读全文

微量制备毛细管电泳实验

多次分离 单次分离             实验方法原理 实验材料 多肽:ACTH 4-10

毛细管电泳实验讲义(一)

实验目的:1 进一步理解毛细管电泳的基本原理;2 熟悉毛细管电泳仪器的构成;3 了解影响毛细管电泳分离的主要操作参数。实验原理:1.电泳淌度毛细管电泳(CE)是以电渗流 (EOF)为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种液相微分离技术。离子在自由溶液中的

毛细管电泳实验讲义(二)

表1  6种CE分离模式的分离依据及应用范围全屏显示表格分离模式分离依据应用范围毛细管区带电泳(CZE)溶质在自由溶液中的淌度差异可解离的或离子化合物、手性化合物及蛋白质、多肽等毛细管胶束电动色谱(MECC)溶质在胶束与水相间分配系数的差异中性或强疏水性化合物、核酸、多环芳烃、结构相似的肽段毛细管凝

微量制备毛细管电泳实验

实验方法原理 实验材料 多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒 血管紧缩素I和血管紧缩素II 0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤 1. 低压

毛细管电泳芯片毛细管凝胶电泳

芯片毛细管凝胶电泳在蛋白质组学和蛋白质分离研究中,凝胶电泳是广泛使用的分离技术。它是以凝胶等聚合物作为分离介质,利用其网络结构并依据被测组分的分子体积不同而进行分离的一种分离模式。在芯片上采用凝胶电泳模式分离蛋白质,更有利于实现分离操作的高速度和高效率。Yao等采用十二烷基磺酸钠(SDS)凝胶电泳分

微量制备毛细管电泳实验——多次分离

实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒血管紧缩素I和血管紧缩素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 低压下(0.5 lb/in2

毛细管电泳仪毛细管电泳应用

应用      (1)高速DNA测序:由于人类基因组工程的提出,高速DNA测序引起了广泛注意,由于对核苷酸及其聚合物极高的分辨率,毛细管电泳在DNA测序中的应用潜力也受到重视。在高电场和使用阵列毛细管条件下,其潜在的测序能力远远超过了现有方法。  (2)手性分离现代社会中,手性分析常牵涉到人类生命、

毛细管电泳芯片毛细管区带电泳

芯片毛细管区带电泳毛细管区带电泳是芯片毛细管电泳分离蛋白质的一种最基本的分离模式。它基于不同的蛋白质分子在电场中的迁移速率不同而实现分离,是一种简单、快速的分离方法。采用区带电泳分离模式已成功地分离了多种蛋白质样品。Colyer等采用毛细管电泳芯片,以区带电泳模式对人血清蛋白样品进行了分离,可分辨出

毛细管电泳芯片胶束电动毛细管电泳

芯片胶束电动毛细管电泳胶束电动毛细管电泳是毛细管电泳与胶束增溶色谱相结合的分离技术,其原理是在装有胶束溶液的通道内,溶质组分在电场力的作用下根据其在胶束相和水相之问的分配不同而产生分离。Jin等在玻璃芯片上采用胶束电动色谱的分离模式,以Bio-Rad公司的CE·SDS缓冲液作为分离介质,成功实现了相

毛细管电泳仪毛细管电泳分类

分类1、按分离目的可分:实验室毛细管电泳仪和工业毛细管电泳仪。2、按分离对象的离子属性可分:无机离子毛细管电泳仪和有机离子毛细管电泳仪。3、按作用可分:毛细管定量分析电泳仪和毛细管定性分析电泳仪。4、按分离原理可分:毛细管色谱电泳仪、毛细管区带电泳仪和毛细管凝胶电泳仪等。5、按分离特征可分:高效毛细

毛细管电泳仪毛细管电泳的概念

毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化

毛细管电泳仪毛细管电泳工作原理

毛细管电泳所用的石英毛细管柱,在pH>3情况下,其内表面带负电,和溶液接触时形成一双电层。在高电压作用下,双电层中的水合阳离子引起流体整体朝负极方向移动的现象叫电渗。粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和。正离子的运动方向和电渗流一致,故最先流出;中性粒子的电泳速

微量制备毛细管电泳实验——单次分离

实验材料多肽:ACTH 4-10试剂、试剂盒4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.50)/乙烯乙二醇0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材150 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤1. 制备多肽混合物和预处理柱子(见多次分离步骤 1 和 2)。2. 在 0.

毛细管电泳芯片自由流电泳

芯片自由流电泳除上述分离模式外,芯片自由流电泳也是芯片电泳分离蛋白质的重要方法。芯片自由流电泳是指在芯片中通过外加电场使样品随缓冲液连续流动的同时沿电场方向进行电迁移,从而按照电泳淌度不同实现分离的电泳分离模式。Raymond等采用芯片自由流电泳模式分离了人血清蛋白、缓激肽和核糖核酸酶A,其分离长度

高效毛细管电泳法的毛细管电泳的特点

柱效高,可达105~106/m分离速度快,几十秒~几十分钟溶剂和试样消耗极少没有高压泵,仪器成本比HPLC更低选择性强

毛细管电泳仪毛细管电泳维护保养方法

维护保养清洁制冷槽的步骤1. 用螺丝启讲制冷槽holder松开,从底部取出槽。2. 用制冷清洁压力器尽可能的取尽其中的液体,用羊毛刷刷净槽内。3. 托盘内的卡槽归位,关好门。压缩机托盘的清洁在电泳仪设备的底部有一个托盘,它收集来自制冷器的废液,每周应检查是否已满,尤其是潮湿的情况下需进行检查,如果内

毛细管电泳法的毛细管电泳的分离模式

毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)最常见的模式,用以分析带电溶质。样品中各个组分因为迁移率不同而分成不同的区带。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁做化学修饰。毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis,CGE

关于毛细管电泳

  毛细管电泳: 是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。  主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测

毛细管电泳类型

毛细管电泳类型类型缩写说明1 单根毛细管毛细管区带电泳CZE毛细管和电极槽灌有相同的缓冲液毛细管等速电泳CITP使用两种不同的CZE 缓冲液毛细管等电聚焦CIEF管内装pH 梯度介质,相当于pH 梯度CZE胶束电动毛细管色谱MEKC在CZE 缓冲液中加入一种或多种胶束微乳液毛细管电动色谱MEEKC在

毛细管电泳概述

毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE), 是近年来发展 快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力

蛋白质的毛细管电泳分析实验

毛细管电泳的主要特点是柱效高(N>105~106)、分析时间短,所用样品量和试剂消耗少,操作模式多,更容易改变背景电解质,在线检测和自动化,使其成为同 HPLC 互补的分析技术,在生命科学领域显示出很好的应用前景。对肽和蛋白质的分析已经从对标准样品混合物的初步优化研究朝着应用方向发展,如定量测定重组

毛细管电泳实验常见问题解答

  一、无样品峰出现  A、检查电流是否稳定:  ①没有电流。  可能原因——毛细管堵塞或断裂。  解决方法——用水冲洗毛细管,并观察是否有水流出,若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂;毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。缓冲溶液需要过滤,将样品过滤或者离心去除其中的

蛋白质的毛细管电泳分析实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 蛋白质溶液

蛋白质的毛细管电泳分析实验

实验方法原理 实验材料 蛋白质溶液仪器、耗材 毛细管电泳仪实验步骤 「操作条件选择」具体见「其他」1. 毛细管电泳柱的制备:清洗、反应与柱平衡;2. 移开进样端的缓冲溶液池,换上样品管;3. 使用低压或电迁移方式进样;4. 再换上缓冲溶液池;5. 施加分离所需的电压。 进行电泳分析。收起 注意事项

毛细管电泳仪毛细管电泳仪选型指南

选型指南1-最大压力。2-制冷效果,效果液冷要好于空冷。3-缓冲盘和样品盘的设置,哪个更符合使用需要。4-安全性。5-检测器种类和可扩展性。总之,看你做什么样的研究,如果只做小分子或者经费不太多,低配置就可以了。但是如果要想做大分子或者今后还可能用CE做更多方面的研究,还是高配置的电泳能给你提供更多

毛细管电泳仪毛细管电泳仪使用操作

毛细管电泳仪使用操作:  1.电极不要和毛细管接触,样品贮器和缓冲液贮器液面的高度应保持平衡。  2.使系统尽可能保持恒温。因温度直接影响粘度,而影响进样量的恒定。  3.样品溶液中的溶剂需要与缓冲液互溶,前者的离子强度应低于后者。  4.防止样品溶液和缓冲液蒸发、损耗。

毛细管电泳和毛细管电色谱

毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE):以高压电场为驱动力,以电解质为电泳介质,以毛细管为分离通道,样品组分依据淌度和分配行为的差异而实现分离的一种色谱方法。它有多种分离模式,可以采用液相色谱中的各种检测方法。CE既可以分离带电荷的溶质,也可以通过毛细管胶束电动色谱

毛细管电泳仪毛细管电泳仪的选择方法

毛细管电泳仪需要用到高压电源,它能提供高压直流电场驱动力的直流电源。应该具有工作稳定、性能可靠、操作方便、测量准确、数据显示清晰和高性价比等优点。可以与光学仪器和分析仪器配套使用。

毛细管电泳微流控芯片毛细管电泳技术展望

微流控芯片毛细管电泳系统应用于蛋白质的分离分析具有突出的优越性,特别是在临床检验及现场监测等方面的应用具有良好的发展前景,同时,其对分析仪器的集成化、微型化与便携化的发展也具有重要意义。据文献报道,Renzi等已经研制出手持式的微流控芯片电泳分离蛋白质装置。该装置由电泳芯片、小型激光诱导荧光检测系统

芯片毛细管凝胶电泳

在蛋白质组学和蛋白质分离研究中,凝胶电泳是广泛使用的分离技术。它是以凝胶等聚合物作为分离介质,利用其网络结构并依据被测组分的分子体积不同而进行分离的一种分离模式。在芯片上采用凝胶电泳模式分离蛋白质,更有利于实现分离操作的高速度和高效率。Yao等采用十二烷基磺酸钠(SDS)凝胶电泳分离模式,对比了芯片