抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法
抗原特异性对T细胞功能至关重要，但由于技术局限，其在T细胞高通量多组学分析中常常被忽略。美国德克萨斯大学奥斯汀分校的研究团队揭示了一种用于抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法。该研究成果于近日发表在《Nature Immunology》上，题为：High-throughput and high-dimensional single-cell analysis of antigen-specific CD8+ T cells。 研究人员提出了一种对T细胞抗原受体（TCR）高通量、高维度的测序方法（TetTCR-SeqHD），该方法可同时分析数万个单细胞的同源抗原特异性、TCR序列、靶向基因表达和表面蛋白表达。研究人员使用已知抗原特异性、TCR序列的人类多克隆CD8+T细胞，验证该方法对抗原特异性的检测准确度超过98%。研究还评估了抗原特异性的CD8+T细胞、带有病原体靶点表型特征的CD8+T细胞的基因表达水......阅读全文
单细胞分选效率的分析
引言在单克隆细胞培养时，手动有限稀释法是最经典的分离单细胞手段之一。这种方式分离单细胞，每个孔中落进去的细胞数目符合泊松分布。依靠单细胞分选仪器分离单细胞的效率，无论从分选能力还是重复性都要明显优于手动的有限稀释方法。测定一款设备分选效率的标准方法，是用荧光校准微球来分选检验。实验方法Namocel
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
实验概要本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（或同种异体细胞）抗原刺激后，能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖，而其他T细胞克隆则逐渐死亡；经3~4次刺激后，存活的均为识别特异
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定主要应用于（1）免疫细胞功能的测定（2）临床自身免疫性疾病的诊断（3）多克隆次级信号转导分子。实验方法原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL，然后再进行细胞毒试验。其原理为：外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆，在体外经某一特定（
特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
实验试剂丝裂霉素C（Sigma）：用培养液或PBS配制300μg/ml含20%的新生牛血清的RPMI 1640实验材料EB病毒转化的B淋巴母细胞株实验步骤1. 特异性CTL的诱导和制备1) 取作者外周血分离PBMC，无血清1640洗两遍，用含20%的新生牛血清的RPMI 1640调成1.5×
抗原特异性免疫应答的B细胞应答介绍
1. B细胞对胸腺依赖性抗原（TD-Ag）免疫应答 感应阶段。抗原初次进入机体一般由树突状细胞摄取、加工处理后提呈给CD4+Th细胞。抗原再次进入机体时则主要由单核-巨噬细胞或B细胞提呈给CD4+Th细胞。B细胞可通过BCR直接识别抗原决定簇，获取抗原信息。 反应阶段。B细胞在CD4+Th细
Nat.－Methods:－更精细！多维度！单细胞RNA测序又往前一步
美国纽约基因组中心的科学家开发出了一种新技术，在单细胞的RNA测序方面向前迈出重要的一步，推进了为了解单个细胞的基因组学领域的发展，让在单个细胞水平上区分不同类型的细胞和研究疾病的机制成为可能。 CITE-seq叫做细胞转录组和表位抗原通过测序的索引（Cellular Indexing of
CD8+T细胞的功能
IgV 状胞外的CD8 α与I类MHC分子的α 3部分进行交互。这亲和保持T细胞受体的细胞毒性T细胞和抗原特异性激活期间紧密绑定的目标单元格。细胞毒性T细胞和CD8表面蛋白被称为CD8 +T细胞。主要识别站点是一个灵活的循环在MHC分子的α 3域。这被发现的做基因突变分析。灵活的α 3域位于之间
CD8+T细胞的定义
CD8（群集分化8）是作为协同受体的T细胞受体（TCR）的跨膜糖蛋白。像TCRCD8将绑定到一个主要组织相容性（MHC）的复杂分子，而是特定的类我MHC蛋白。[2]有的蛋白，α和β两种异构体，每个由不同的基因编码。在人类中，这两个基因位于位置2 p 122号染色体上。 组织中的分布： CD8
单细胞分选对于高通量需求具有重要意义
单细胞分选可以依据荧光信号的强度挑出特定生物学属性的细胞，相比起其他单细胞分离技术(如有限稀释法、激光捕获显微切割、显微操作等)，其特定类型的单细胞获取更具准确性。 另外，依赖于精确的液滴分析模式，采用32等份液滴分选模式，实现液滴的精确分析，可以准确判断相应液滴中目标细胞的数量，因此可以准确
狙击肿瘤，PD1与GITR抗体联用事半功倍（二）
图2. 单细胞测序绘制CD8+ T细胞独特的基因图谱及分析 进一步研究揭示，抗PD-1抗体与抗GITR抗体联合免疫治疗介导形成独特的肿瘤特异性CD8+ T细胞群如图3A所示，取经抗PD-1抗体、抗GITR抗体以及两种抗体联合分别处理的荷瘤小鼠，在处理后的9天和12天，取瘤内T细胞，进行相关maker
单细胞分离技术应用于众多领域的单细胞分析
单细胞分离目前主要有三种选择：手动分离、荧光激活细胞分选和微流体技术。当然，除了成熟的方法，巧妙的新方法也在不断涌现，能以更高的准确性和特异性来分离单细胞。 将细胞分散到悬液中，会失去它们在组织里的位置信息。如果想了解单细胞所处的环境，就需要用到激光捕获显微切割技术，这种技术通过扫描组织切片来
单细胞测序方法汇总
单细胞生物学研究一直是当今的热门话题，而且-前沿的领域就是单细胞RNA测序了（scRNA-seq）。常规RNA测序方法一次性能够对成千上万个细胞进行加工测序，并给出平均差异，但并没有两个细胞是完全一样的，而新型的scRNA-seq方法就能够揭示出制造每一种特异性的微小改变，甚至这种技术还能够阐明完整
纳米抗体制备新平台：羊驼VHH－SingleB®快速发现
羊驼等骆驼科动物体内天然存在缺失轻链及重链CH1结构但完全保留抗原结合活性的重链抗体（HCAb），其中特异性结合抗原的重链可变区称为单域抗体（sdAbs），即纳米抗体（Nanobody），简称VHH，是最小单元抗原结合片段。纳米抗体集传统抗体与小分子药物的优点于一体，并在诸多方面克服了传统抗体的缺陷
高通量细胞分析设备简介
仪器主要用途：可用于细胞的定性和定量分析（包括检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞因子、细胞内DNA、RNA含量等，定量分析细胞内pH值，蛋白总含量、DNA及RNA含量、免疫表现、细胞周期动力学、细胞特殊配体、细胞生物活性鉴定、细胞凋亡研究、细胞功能分析、钙流等），并将具有将特定形状或功能的细胞从混合
专家解析单细胞分析技术：简单的染色成像方法
在这项研究中，Nakauchi教授采用了一种简单的免疫染色技术：单细胞磷酸成像分析（single-cell imaging of phosphorylation assay，SCIPhos）。先将大约50个细胞想排列在载玻片上，然后进行染色，通过共聚焦显微镜进行观察，通过这些染色了的磷酸化修饰蛋白，
特异性高雪氏症的治疗方法介绍
美国食品药品监督管理局于 1991 年批准上市了由胎盘中提取的葡萄糖脑苷脂酶，后于 1994 年又批准了以基因重组方法研制的葡萄糖脑苷脂酶[注射用伊米苷酶（Imiglucerase）]，用于戈谢病的 ERT治疗。临床实践显示，伊米苷酶可明显改善Ⅰ型戈谢病患者的临床症状体征，维持正常生长发育，提高
ELISPOT（酶联免疫斑点法）技术
酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay, ELISPOT)是细胞免疫学研究中最敏感的检测方法之一，可以在单细胞水平对抗体分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK) 分泌细胞进行检测。由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA 和有限稀释法等具有更高的灵敏性，能
高通量单细胞测序助力寻找新冠肺炎全人源抗体
日前，在北京市科委协调推进下，北京大学生物医学前沿创新中心（BIOPIC）发挥所长，联合首都医科大学附属北京佑安医院、北京义翘神州科技有限公司等单位，用高通量单细胞测序找到了新冠肺炎多种全人源抗体，有望为大规模疫情防控提供解决方案。 新冠肺炎（COVID-19）亟需特效治疗药物。日前利用康复期
肿瘤特异性抗原的定义
肿瘤特异性抗原(TSA)指仅表达于肿瘤组织，而不存在于正常组织的肿瘤抗原。
肿瘤特异性抗原的概念
肿瘤特异性抗原（tumor specific antigen）指仅表达于某种肿瘤细胞表面而不存在于正常细胞上的新抗原，故又称独特肿瘤抗原（unique tumor antigen）。
肿瘤特异性抗原的简介
此类抗原可存在于不同个体同一组织类型的肿瘤中，如人恶性黑色素瘤基因编码的黑色素瘤特异性抗原可存在于不同个体的黑色素瘤细胞，但正常黑色素细胞不表达。TSA也可为不同组织学类型的肿瘤所共有，如突变的ras癌基因产物可见于消化道、肺癌等，但由于其氨基酸顺序与正常原癌基因ras表达产物存在差异，可被机体
抗原的特异性取决什么
抗原的免疫原性与特异性 一．异物性 二．抗原的特异性 抗原特异性决定抗原特异性的因素：抗原决定基抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团,又称表位,是与TCR/BCR及抗体结合的基本单位。抗原决定基的结构：构象决定基与线性决定基T细胞识别线性决定基B细胞识别构象与线性决定基功能性决定基：存在于抗
马潇潇：仪器创新助原创－好马更需配好鞍
许多伟大的原创研究，离不开仪器的创新。清华大学精密仪器系，正吸引着一批既懂仪器又懂应用的年轻人，开展原创性的研究工作。从清华到普渡再回到清华精仪系的马潇潇正是其中一员。他的团队开展了原创性的脂质组学研究，并正在改进现有质谱仪器设计、方法和算法，推动单细胞质谱和质谱成像朝着“非靶向、高通量、高内涵”进
技术强则药物强单个B细胞抗体制备技术
如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点，目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。 1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。
肿瘤抗原根据肿瘤抗原特异性的分类介绍
（一）肿瘤特异性抗原 肿瘤特异性抗原（tumor specific antigen,TSA)是肿瘤细胞特有的或只存在于某种肿瘤细胞而不存在于正常细胞的新抗原。 此类抗原乃通过肿瘤在同种系动物间的移植而被证实，故也称为肿瘤特异性移植抗原（tumor specific transplantati
新型单细胞活性分析技术
近日，一项刊登在国际杂志Nature Biotechnology上的研究论文中，来自加利福尼亚大学的研究人员通过运用一种分析单一细胞基因活性的先进技术，鉴别出了人类大脑脑细胞的特性，该研究揭示，如今进行大规模的细胞调查分析比过去我们所认为的要更加高效，而且廉价。 研究者Arnold
单细胞分析重大突破
生物学家对单个细胞的行为而不是对整个细胞群体的行为越来越感兴趣。在一项新的研究中，来自瑞士联邦理工学院（ETH）的研究人员开发出一种新方法可能引发单细胞分析变革。这一技术利用世界上zui小的注射器来对单个细胞的内含物进行取样以便进行分子分析。相关研究结果发表在2016年7月14日那期Cell期刊上，
CD8+T细胞杀伤靶细胞的过程
CTL杀伤靶细胞是一个连续过程，可分为三个阶段，主要研究内容如下： 1、效应靶细胞结合：CTL是通过其膜上的受体TCR，即Ti-CD3分子与靶细胞结合，此时膜上的淋巴细胞功能相关抗原Ⅰ与靶细胞膜上的配基Ⅰ，又称细胞内粘附分子相互作用，即靶细胞与效应细胞初步接触。此时亲和力低，为非特异性的，但可