elisa二抗孵育过夜影响结果吗
孵育过夜一般多见于封闭液。二抗孵育过夜比较少见。因为二抗中酶的活性可能容易受到影响,并且如果在二抗孵育阶段有微生物滋生,后续洗涤步骤少,容易干扰显色。......阅读全文
ELISA如何选一抗与二抗
二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般
elisa二抗孵育过夜影响结果吗
孵育过夜一般多见于封闭液。二抗孵育过夜比较少见。因为二抗中酶的活性可能容易受到影响,并且如果在二抗孵育阶段有微生物滋生,后续洗涤步骤少,容易干扰显色。
elisa筛选时需要到多少酶标二抗
酶标二抗常规包装为100ul(都是浓缩液).用于ELISA的时候,稀释比为一万到十万,最低的也可以达到一千.就以最低的算,100ul也可以稀释成100ml.(当然一般是用多少稀释多少,不要一次配完).这样一个孔加入100ul.可以用十块板.这都是以最低的量计算.实际上应该可以做更多的板子.如果你不是
elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响
二抗孵育 参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。 吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如
elisa检测中二抗时间延长会造成什么影响
二抗孵育 参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶标记的二抗。 吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。回收二抗。然后加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后,再加入洗涤液,洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如
双抗夹心-ELISA
实验概要夹心 ELISA 法是应用两种抗体协同测定抗原含量的方法(即:捕获抗体和检测抗体)。因此抗原必须包含至少 2 个能被抗体识别的抗原位点。在夹心 ELISA 中,单克隆抗体和多克隆抗体都可以被用作捕获抗体和检测抗体。单抗识别单一的抗原表位,可以区别抗原的微小差别,使抗原得到更精确地检测和
双抗夹心-ELISA
实验概要夹心 ELISA 法是应用两种抗体协同测定抗原含量的方法(即:捕获抗体和检测抗体)。因此抗原必须包含至少 2 个能被抗体识别的抗原位点。在夹心 ELISA 中,单克隆抗体和多克隆抗体都可以被用作捕获抗体和检测抗体。单抗识别单一的抗原表位,可以区别抗原的微小差别,使抗原得到更精确地检测和
ASA抗精子抗体ELISA试剂盒使用说明(二)
c)质控血清,在每支冻干的质控血清中加入1ml即用型的洗涤液。4.3.4酶联物,在15μl浓缩的酶联物中加入9ml稀释液,混合均匀。4.4准备好试剂的储存与稳定性4.4.1配置好的洗涤液在2-8℃的环境下可稳定存放4周。冷藏时溶液会出现磷酸盐沉淀物,室温下又会溶解。4.4.2样品稀释液,配置好的稀释
一抗、二抗如何保存
工作液根据需要稀释在5%奶粉里,再加入少量叠氮化钠(大约0.01% w/v),4度保存。Alisa_lin(站内联系TA)分装,-20度保存。不要反复冻融,没有用过粉末的二抗,按说明书呗石头2011(站内联系TA)液体的一抗没加甘油的话尽量不要放在负二十,因为用的时候反复冻融不好。粉末状的二抗负二十
一抗/二抗该选谁?
我们在生活中经常会面临做选择这样的一个难题,其实做选择本身并不是多么困难的事情,关键在于您是否了解自己内心真正需要的是什么。就好比我们的实验者在选择产品的品牌、质量、规格等,根据这些信息再去做相关的判断。比如zui简单的一个例子,不少的伙伴都对一抗、二抗的选择方面甚是苦恼,那如何选择呢,技术教
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或
一抗二抗的制备方法
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或
怎样稀释一抗和二抗
一抗的确比二抗贵,我们实验室1:500~1:1000稀释一抗体都可以,杂交袋尽量小,一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以
AMCA荧光二抗?EarthOx新型DyLight-405荧光二抗
中英文品名品牌货号规格详情 山羊抗小鼠IgG二抗, 黄红色DyLight 549荧光标记 -DyLight 549 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) EarthOx E032310 ¥200/100μl ¥800/500μl详情 山羊抗兔IgG二抗
二抗如何选择论一抗与二抗种属及类型区别
二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般
ELISA操作要点(二)
6 显色和比色6.1 显色 显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性
ELISA操作要点(二)
6 显色和比色 (1) 显色显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测
ELISA技术综述(二)
ELISA的商品化试剂盒成分和分类:在临床检验或者科研检测中,ELISA 实验通常有商品试剂盒提供。ELISA试剂盒中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的
ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。 1 试剂影响因素
ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。 1 试剂影响因
ELISA检测抗HCV影响因素分析
ELISA检测抗HCV已是血站、医院的常规检测项目,虽然该方法操作简单,灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,该临床诊断给治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗HCV因素众多[1]。现就比较常见的影响因素加以分析总结。 1 试剂影响因素 目
二抗的选择
二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC或发光团。
如何选择二抗
二抗选择(1)种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。免疫组化,WB二抗主要选择HRP,Biotin标记的二抗,而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、
二抗孵育时间
二抗孵育时间为1至2小时。参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温在摇床上缓慢摇动孵育1至2小时。回收二抗。二抗的浓度一般要参照抗体说明书选择最适当的比例。一抗二抗的选择直接影响实验结果以及背景的深浅。要严格保证反应时间,
一抗和二抗用什么稀释
一抗的确比二抗贵,我们实验室1:500~1:1000稀释一抗体都可以,杂交袋尽量小,一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以
计算ELISA结果教程(二)
第四步:查看标准曲线信息(如参数值,R-Square等)第五步:设置坐标轴类型为对数。双击第四步中的拟合曲线图,对其进行编辑。双击X轴、Y轴设置坐标类型为“Log10”。 第六步:根据标准曲线计算样本浓度选择第四个工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左列输入样本的OD值,对应的
ELISA的操作要点(二)
六、显色和比色(一) 显色显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定
ELISA检-测-抗-体-的-含-量
实验步骤基 本 方案材 料展开
为什么一抗可以回收二抗不能
因为一抗我们是用BSA加叠氮钠稀释的,要回收,一般只要不长细菌就一直用,但是中间要补一些抗体,不然太稀了曝不出来,二抗是用脱脂奶粉稀释的,不回收。
wb二抗怎么融化
wb 二抗融化,wb 抗体用5%的脱脂奶粉或者1%的BSA (千分之一的TBST的溶液 )配置,可以先让抗体和奶粉或者BSA 蛋白非特异结合,这样就不会与PVDF 膜上的蛋白结合了。