wb二抗怎么融化

wb 二抗融化,wb 抗体用5%的脱脂奶粉或者1%的BSA (千分之一的TBST的溶液 )配置,可以先让抗体和奶粉或者BSA 蛋白非特异结合,这样就不会与PVDF 膜上的蛋白结合了。......阅读全文

wb二抗怎么融化

wb 二抗融化,wb 抗体用5%的脱脂奶粉或者1%的BSA (千分之一的TBST的溶液 )配置,可以先让抗体和奶粉或者BSA 蛋白非特异结合,这样就不会与PVDF 膜上的蛋白结合了。

wb二抗室温几小时

二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。

wb二抗室温几小时

二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或

WB检测中二抗的选择方法

  WB检测之二抗   二抗选择    二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二

WB检测中二抗的选择方法

WB检测之二抗二抗选择二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗选择要考虑的问

做wb时,一抗和二抗浓度是怎么确定的

一抗的用量和样品中的目标分子含量相关,如果含量较高,就不需要用太多一抗,以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度(义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果),如果样品与厂家的不是一种细胞,可以尝试上下摸索一两个浓度梯度;二抗的用量,和你所在实验室常规的用量就可以,如果出现效果不理想的状态

做wb时,一抗和二抗浓度是怎么确定的

一抗的用量和样品中的目标分子含量相关,如果含量较高,就不需要用太多一抗,以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度(义翘神州会提供抗体用量、天然细胞株检测结果),如果样品与厂家的不是一种细胞,可以尝试上下摸索一两个浓度梯度;二抗的用量,和你所在实验室常规的用量就可以,如果出现效果不理想的状态

做WB时羊抗鼠二抗的稀释比例一般是多少

【1】抗体的说明上,都给出了一个范围,可以以这个范围为根据摸索。开始的时候可以把膜剪成几小块,每一块用不同的一抗二抗浓度,这样就可以比较快的摸出适宜的浓度。有些时候也有一定的经验的:我用的是SANTA CRUZ的抗体,一抗建议的稀释比是1:200-1000,我用的是1:400效果挺好的。周围的人用的

做WB时羊抗鼠二抗的稀释比例一般是多少

【1】抗体的说明上,都给出了一个范围,可以以这个范围为根据摸索。开始的时候可以把膜剪成几小块,每一块用不同的一抗二抗浓度,这样就可以比较快的摸出适宜的浓度。有些时候也有一定的经验的:我用的是SANTA CRUZ的抗体,一抗建议的稀释比是1:200-1000,我用的是1:400效果挺好的。周围的人用的

WB一抗用什么稀释

建议起始浓度1:200开始(当然你也可以1:100,如果你的背景不高的话),倍比稀释,不是再做1:100-1:1000稀释,注意了。其实没有必要分装,一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装,建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下,可以溶解

WB一抗用什么稀释

建议起始浓度1:200开始(当然你也可以1:100,如果你的背景不高的话),倍比稀释,不是再做1:100-1:1000稀释,注意了。其实没有必要分装,一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装,建议原液分装或是10稀释后分装。溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下,可以溶解

一抗、二抗如何保存

工作液根据需要稀释在5%奶粉里,再加入少量叠氮化钠(大约0.01% w/v),4度保存。Alisa_lin(站内联系TA)分装,-20度保存。不要反复冻融,没有用过粉末的二抗,按说明书呗石头2011(站内联系TA)液体的一抗没加甘油的话尽量不要放在负二十,因为用的时候反复冻融不好。粉末状的二抗负二十

IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IPWB实验的验...

IPKine™新型二抗解决方案在免疫共沉淀法后IP-WB实验的验证方法免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在

怎样稀释一抗和二抗

一抗的确比二抗贵,我们实验室1:500~1:1000稀释一抗体都可以,杂交袋尽量小,一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以

一抗/二抗该选谁?

   我们在生活中经常会面临做选择这样的一个难题,其实做选择本身并不是多么困难的事情,关键在于您是否了解自己内心真正需要的是什么。就好比我们的实验者在选择产品的品牌、质量、规格等,根据这些信息再去做相关的判断。比如zui简单的一个例子,不少的伙伴都对一抗、二抗的选择方面甚是苦恼,那如何选择呢,技术教

一抗二抗的制备方法

方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或

一抗二抗的制备方法

方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 包被:用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 5%脱脂乳(SMP)或者BSA 37℃(或

AMCA荧光二抗?EarthOx新型DyLight-405荧光二抗

中英文品名品牌货号规格详情  山羊抗小鼠IgG二抗, 黄红色DyLight 549荧光标记 -DyLight 549 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L)  EarthOx  E032310  ¥200/100μl   ¥800/500μl详情  山羊抗兔IgG二抗

二抗如何选择论一抗与二抗种属及类型区别

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般

二抗的选择

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC或发光团。

如何选择二抗

二抗选择(1)种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。免疫组化,WB二抗主要选择HRP,Biotin标记的二抗,而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、

二抗孵育时间

二抗孵育时间为1至2小时。参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温在摇床上缓慢摇动孵育1至2小时。回收二抗。二抗的浓度一般要参照抗体说明书选择最适当的比例。一抗二抗的选择直接影响实验结果以及背景的深浅。要严格保证反应时间,

一抗和二抗用什么稀释

一抗的确比二抗贵,我们实验室1:500~1:1000稀释一抗体都可以,杂交袋尽量小,一抗稀释液其实只要能覆盖完整个条带的用量就可以

ELISA如何选一抗与二抗

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般

为什么一抗可以回收二抗不能

因为一抗我们是用BSA加叠氮钠稀释的,要回收,一般只要不长细菌就一直用,但是中间要补一些抗体,不然太稀了曝不出来,二抗是用脱脂奶粉稀释的,不回收。

如何选择适合实验的一抗和二抗?

小编今天给大家分享一些抗体选择的经验~检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素:分析或应用的类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于 WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗体说明书没有提及的

一抗二抗不同倍数稀释有影响吗

有。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体,一抗二抗不同倍数稀释有影响,稀释倍数过高或抗体品质差均可造成高背景。

western-glut4一抗,二抗怎么配置

配制抗体的时候有两样东西比较关键:溶解抗体的溶液或稀释液,通常如果只是溶解抗体,可能会建议用PBS或者TBS,提供中性环境,以帮助抗体的保存。如果已经是液体,只是需要稀释做实验的话,一般会用封闭液(BSA溶液,脱脂奶粉,注脱脂奶粉稀释后的抗体无法再次使用),或者是洗液(TBST或PBST)。抗体的浓

二抗用水稀释能用吗

不能。二抗用水稀释后,抗体会随之减弱,直到没有效果,不能使用。二抗是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。