自然界中首例exo选择性的分子间DielsAlder反应酶
药物中间体、农药和精细化学品在国计民生中占据重要地位。传统的化学合成工艺存在效率低和污染严重等瓶颈问题;基于酶催化的生物合成工艺具有过程绿色、选择性好等优势,目前特别在创新药物工业化生产中得到广泛应用。然而,目前酶催化反应的工具箱还非常有限,能够催化新颖化学转化的酶亟待被发现,从而推动酶催化在工业上更为广泛的应用,有助于实现化学品的“碳中和”生物绿色制造。 狄尔斯-阿尔德反应(Diels-Alder reaction,简称D-A反应)是共轭双烯(二烯体)与取代烯烃(亲二烯体)之间发生的[4+2]环加成反应,是合成化学中构建C-C键最常用的方法之一,已经在天然产物全合成,药物分子工业化生产以及材料化学等方面得到广泛应用。2021年诺贝尔化学奖授予的有机小分子催化所应用的第一个实例即为不对称D-A反应。为了实现某一个非对映异构体的高效合成,D-A反应过程中的区域、endo/exo以及对映立体选择性必须得到精准控制(图1a)。传......阅读全文
自然界中首例exo选择性的分子间DielsAlder反应酶
药物中间体、农药和精细化学品在国计民生中占据重要地位。传统的化学合成工艺存在效率低和污染严重等瓶颈问题;基于酶催化的生物合成工艺具有过程绿色、选择性好等优势,目前特别在创新药物工业化生产中得到广泛应用。然而,目前酶催化反应的工具箱还非常有限,能够催化新颖化学转化的酶亟待被发现,从而推动酶催化在工
EXO1基因编码功能及结构描述
该基因编码一种具有5'到3'外切酶活性和RNase H活性的蛋白质它类似于酿酒酵母蛋白外显子1,它与msh2相互作用,参与错配修复和重组。这个基因的选择性剪接导致三个转录变体编码两个不同的亚型[由RefSeq提供,2008年7月]This gene encodes a protein
EXO-1基因的结构特点及主要作用
该基因编码一种具有5'到3'外切酶活性和RNase H活性的蛋白质它类似于酿酒酵母蛋白外显子1,它与msh2相互作用,参与错配修复和重组。这个基因的选择性剪接导致三个转录变体编码两个不同的亚型。
北大教授发文Nature子刊,灵感来源与桑科植物
在国家自然科学基金项目(批准号:21625201、21961142010、91853202)等资助下,受到桑科植物中狄尔斯-阿尔德反应(Diels-Alder reaction,简称D-A反应)类型天然产物生物合成的启发,北京大学雷晓光课题组与美国加州大学洛杉矶分校化学系Ken N.Houk实验室
酶促反应的反应特点
一、酶促反应具有极高的效率二、酶促反应具有高度的特异性酶的特异性是指酶对底物的选择性,有以下三种类型:1.绝对特异性 酶只作用于特定结构的底物,生成一种特定结构的产物。如淀粉酶只作用淀粉。2.相对特异性 酶可作用于一类化合物或一种化学键。例如磷酸酶可作用于所有含磷酸酯键的化合物。3.立体异构特异性
EXO1基因突变与药物因子介绍
该基因编码一种具有5'到3'外切酶活性和RNase H活性的蛋白质它类似于酿酒酵母蛋白外显子1,它与msh2相互作用,参与错配修复和重组。这个基因的选择性剪接导致三个转录变体编码两个不同的亚型[由RefSeq提供,2008年7月]This gene encodes a protein
酶的反应特点
1 高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;2 专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;3多样性:酶的种类很多,迄今为止已发现约4000多种酶,在生物体中的酶远远大于这个数量;4 温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的;5 活性可调
DNA酶切反应
一、 DNA 酶切反应1、将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在管
酶切反应心得
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶的用
双酶切反应
双酶切buffer的选择: 1、U :Supplied with its own unique reaction buffer that is different from the four standard NEBuffers. Its compatibility with the fou
酶切反应建议
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶
双酶切反应酶活性分析
同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲
聚合酶链反应的反应特点
特异性强PCR反应的特异性决定因素为:①引物与模板DNA特异正确的结合;②碱基配对原则;③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;④靶基因的特异性与保守性。其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及TaqDNA聚合酶耐高温性,使反应中模
聚合酶链反应PCR反应体系
PCR是20世纪80年代由美国西特斯公司的一批科学家、技术人员和商人发明的,主要发明者凯利·穆利斯(Kary Mullis)因此获得了1993年的诺贝尔化学奖。其他科学家和技术人员,包括厄立克(Henry Erlieh)、安海姆(Norman Arnheim)、才木(Ran—daliSaiki)、霍
双脱氧法DNA测序实验——α标记核苷酸进行热循环测序反应
实验材料DNA试剂、试剂盒DNA测序缓冲液dATPDNA聚合酶仪器、耗材热心换反应装置离心机实验步骤1. 对应于毎个待测模板,分别以A、G、C、T 标记好4个微量离心管。2. 分别往标好A、G、C、T 的管子中,加A、G、C、T 测序混合液各3 μl。 3. 对于单链模板:在0.5 ml 微量
PCR的替代技术RPA全攻略疑难解答
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术(由英国公司TwistDx Inc开发)。以此为基础的TwistAmp® 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。
酶促反应的概念
由酶催化发生的化学反应。
影响酶反应的因素
酶反应动力学主要研究酶催化反应的过程与速率,以及各种影响酶催化速率的因素,定量时的观察对象是总单位时间内底物的减少或产物增加的量。影响酶作用的因素包括底物的浓度、酶反应的最适pH、最适温度、酶的抑制作用,另外还包括试剂中表面活性剂的作用等因素。
酶促反应的定义
酶促反应(Enzyme catalysis)又称酶催化或酵素催化作用,指的是由酶作为催化剂进行催化的化学反应。
酶电极的反应机理
酶电极是将- 种或一种以上的生物酶涂布在通常的离子选择性电极的敏感膜上,通过酶的催化作用,试液中待测物向酶膜扩散,并与酶层接触发生酶催化反应,引起待测物质活度发生变化,被电极响应;或使待测物产生能被该电极响应的离子,间接测定该物质。如尿素酶电极是以NH3 电极为指示电极,把脲酶固定在NH3电极的敏感
酶的反应特点介绍
1 高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;2 专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;3多样性:酶的种类很多,迄今为止已发现约4000多种酶,在生物体中的酶远远大于这个数量;4 温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的;5 活性可调
什么是酶促反应?
酶促反应(Enzyme catalysis)又称酶催化或酵素催化作用,指的是由酶作为催化剂催化进行的化学反应。
酶促反应的特点
特点1、酶促反应具有极高的效率2、酶促反应具有高度的特异性酶的特异性是指酶对底物的选择性,有以下三种类型:(1)绝对特异性酶只作用于特定结构的底物,生成一种特定结构的产物。如淀粉酶只作用淀粉。(2)相对特异性酶可作用于一类化合物或一种化学键。例如磷酸酶可作用于所有含磷酸酯键的化合物。(3)立体异构特
酶切反应的建议
酶切反应建议一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如
酶的反应特点介绍
1 高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;2 专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;3多样性:酶的种类很多,迄今为止已发现约4000多种酶,在生物体中的酶远远大于这个数量;4 温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的;5 活性可调
酶催化的反应简介
酶是一种具有特异性的高效生物催化剂,绝大多数的酶是活细胞产生的蛋白质。酶的催化条件温和,在常温、常压下即可进行。酶催化的反应称为酶促反应,要比相应的非催化反应快103-107倍。酶促反应动力学简称酶动力学,主要研究酶促反应的速度和底物(即反应物)浓度以及其他因素的关系。在底物浓度很低时酶促反应是一级
ATP酶的反应机制
ATP酶与ATP水解反应耦合的转运是一个严格的化学反应,即每分子ATP水解能够使一定数量的溶液分子被转运。例如,对于钠钾ATP酶,每分子ATP水解能够使3个钠离子被运出细胞,同时2个钾离子被运入。跨膜ATP酶需要ATP水解所产生的能量,因为这些酶需要做功:它们逆著热力学上更容易发生的方向来进行物质运
什么是酶促反应?
酶促反应(Enzyme catalysis)又称酶催化或酵素催化作用,指的是由酶作为催化剂进行催化的化学反应。生物体内的化学反应绝大多数属于酶促反应。酶作为一种生物催化剂在催化一个化学反应时,既具有一般的催化剂的特征,又具有不同于一般催化剂的特殊性。
酶促反应的概念
酶促反应(Enzyme catalysis)又称酶催化或酵素催化作用,指的是由酶作为催化剂进行催化的化学反应。生物体内的化学反应绝大多数属于酶促反应。酶作为一种生物催化剂在催化一个化学反应时,既具有一般的催化剂的特征,又具有不同于一般催化剂的特殊性。
研究发现催化竞争性2+2及4+2环加成反应的天然酶
中国科学院上海有机化学研究所研究员刘文、潘李锋,与美国加州大学洛杉矶分校化学系Ken. N. Houk实验室合作,在Nature Chemistry上,发表了题为A cyclase that catalyses competing 2+2 and 4+2cycloadditions的研究论文。该