电位滴定法测定真蛋白的方法介绍
基本原理为:蛋白质的两端有游离的具有酸性的羧基(-COOH)和碱性的氨基(-NH2),当加入甲醛溶液时,氨基上的两个氢原子被次甲基所取代,于是便失去了氨基的碱性特性,从而使其呈酸性的羧基释放出来,使溶液的电化学特性发生变化。再用氢氧化钠标准溶液滴定游离的羧基(-COOH),从而用经验公式计算其蛋白质含量。与凯式定氮法相比,该法可以排除三聚氰胺、尿素对牛乳中蛋白质测定的干扰,其次该方法所需检测仪器及试剂常规,操作简便,而且大大缩短了测定时间,提高了工作效率,具有一定的推广使用价值。但从其原理中不难得出此法不能排除铵态氮(氯化铵、硫酸铵、碳酸铵等)的干扰,有一定的局限性。针对这一漏洞唐英伟等人在2009年提出了改进方法即:在测定前在试样中加入浓碱液加热检查有无氨气放出,验证有无铵态氮。若有,则先将铵态氮分离出去,再用电位滴定法测定;若没有,则可直接用电位滴定法测定。......阅读全文
电位滴定法测定真蛋白的方法介绍
基本原理为:蛋白质的两端有游离的具有酸性的羧基(-COOH)和碱性的氨基(-NH2),当加入甲醛溶液时,氨基上的两个氢原子被次甲基所取代,于是便失去了氨基的碱性特性,从而使其呈酸性的羧基释放出来,使溶液的电化学特性发生变化。再用氢氧化钠标准溶液滴定游离的羧基(-COOH),从而用经验公式计算其蛋白质
直读法测定真蛋白的方法介绍
蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀。引起蛋白质沉淀的主要方法有盐析、重金属盐沉淀、生物碱试剂以及某些酸类沉淀、有机溶剂沉淀、加热凝固等。吴敏等人通过对生鲜牛乳进行脱脂和水浴加热后,加入蛋白质沉淀剂、离心分离
电位滴定法测定解离常数的方法介绍
电位滴定法是测定物质解离常数pK最常用的方法之一。以一元弱酸为例,其在水中的解离平衡式为:根据上式,将加入碱的体积V和测得的溶液pH代入后就能得到物质的pKa,通常将溶液pH对 作图就得到物质的pKa。因此,实验过程中只需记录一定温度下,累积加入碱的体积和每加入一定体积的碱后所测得的溶液pH值。为了
数字图像法测定真蛋白的方法介绍
该方法是基于双缩脲反应原理,通过一次性采集标样和试样乳粉处理液的图像信息,得出试样乳粉的蛋白质含量。王旭等人利用凯氏定氮法和数字图像法测定添加了不同NPN的乳粉蛋白质含量,分析非蛋白态氮对凯氏定氮法和数字图像法测定乳粉蛋白质含量的影响。结果表明,对于没有人为添加非蛋白态氮的乳粉来说,用凯氏定氮法和数
Udy染料染色法测定真蛋白的方法介绍
Udy染料染色法采用蛋白与一定pH的橙酸12染料结合的原理测定乳中的氨基酸,如精氮酸、组氨酸和赖氨酸,其中蛋白质的多肽长度须在5个氨基酸以上。其红色的色泽随蛋白的含量增加,即结合的越多而减退,即色泽的强弱与蛋白的浓度呈反比,因此只要在一定的波长下测定其色泽的程度,即可计算得到真蛋白的浓度。用Udy染
毛细管电泳法测定真蛋白的方法介绍
电泳是指在电场作用下,带电粒子向着与其所带电荷电性相反的电极移动的现象。电泳法,就是指带电荷的供试品(如蛋白质、核苷酸等) 在惰性支持介质(如滤纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等) 中,在电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,由于各组分之间的移动速度不同,各组分分离成狭窄的
电位滴定法测定食品中氨基酸的方法介绍
氨基酸的测定——电位滴定法1、原理氨基酸具有酸性基团—COOH和碱性基团—NH2,利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测液中构成电池,用氢氧化钠标准溶液滴定,依据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。2、仪器①酸度计。②磁力搅拌器。
紫外分光光度法测定真蛋白的方法介绍
紫外分光光度法的基本原理为:蛋白质中含带共轭双键的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基,使蛋白质具有吸收紫外光的性质,其吸收峰在280 nm 处,吸光度与蛋白质含量成线性关系,因此,通过测蛋白质溶液的吸光度,即可测得样品中蛋白质的含量。该方法测得蛋白质量浓度的回收率在94.0%~106.7%之间,通过精密度
电位滴定的类型介绍
按照滴定反应的类型,电位滴定可用于中和滴定(酸碱滴定)沉淀滴定,络合滴定,氧化还原滴定。酸碱滴定一般酸碱滴定都可以采用电位滴定法;特别适合于弱酸(碱)的滴定;可在非水溶液中滴定极弱酸;指示电极:玻璃电极,锑电极;参比电极:甘汞电极;(1) 在醋酸介质中用HClO₄滴定吡啶;(2) 在乙醇介质中用 H
考马斯亮蓝G250法测定真蛋白的方法介绍
考马斯亮蓝法是由考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质通过范德华引力结合,使蛋白质染色,通过比色测定蛋白质含量的方法。该方法精密度高,RSD为1.70%,结果准确, 相对误差较小,回收率98.2%~100.3%。考马斯亮蓝G-250 与蛋白质结合的反应十分迅速且稳定,这一方法具有灵敏度高、干扰物质少、测定
红外光谱分析法测定真蛋白的方法介绍
近红外光谱是介于可见光(VIS)和中红外光(MIR 或IR)之间的电磁波,美国材料检测协会(ASTM)将近红外光谱区定义为波长780~2526nm的光谱区。通过分子振动、转动的状态变化在不同能级间产生跃迁,当其能量与近红外光谱区内某一波长处光子的能量相当时,可产生近红外光谱吸收。食品中蛋白质和多肽在
酸值的测定方法介绍电位滴定法
电位滴定法是一种经典的分析方法,具有设备简单、操作简便、精确度高等优点。自20世纪60年代以来,离子选择电极的迅速发展为电位滴定提供了一批良好的指示电极,提高了灵敏度和选择性。电位滴定法测定酸度或酸价的准确度比一般的滴定法高,对有色溶液、混浊溶液或没有合适指示剂判断终点的滴定分析较为适宜 。其测定
电位滴定仪滴定方式介绍
1、直接滴定法 凡是能具备上述四个反应条件的反应,可以用标准溶液直接滴定被测物质,这类滴定称为直接滴定法。直接滴定法是滴定分析中最常用最基本的滴定方式。例如以HCl标准溶液滴定NaOH。 2、返滴定法 也称为剩余滴定,对于反应物是固体或反应速度慢,加入标准溶液后不能立即定量完成
电位滴定仪确定滴定终点的方法
(1)手动电位滴定仪终点的确定进行手动电位滴定时,先要称取一定量试样并将其制备成试液。然后选择一对合适的电极,经适当的预处理后,浸入待测试液中,并连接组装好装置。开动电磁搅拌器和毫伏计,先读取滴定前试液的电位值(读数前要关闭搅拌器),然后开始滴定。滴定过程中,每加一次一定量的滴定溶液就应测量一次电动
电位滴定法测定食品中氨基酸方法原理
氨基酸具有酸性基团—COOH和碱性基团—NH2,利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测液中构成电池,用氢氧化钠标准溶液滴定,依据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。
电位滴定法测定石油产品酸值的标准试验方法
使用范围1.1本测试方法详述了在甲苯和异丙醇的混合物中可溶或微溶的石油产品和润滑油中酸性成分的测定步骤。它适用于所测的酸在水中的电离常数大于10-9;水解常数小于10-9的弱酸不干扰测定。水解常数大于10-9的盐会发生反应。包括在此精密度酸值范围是0.1mg/g KOH到150mg/g KOH。注
电位滴定仪的介绍
电位滴定仪是通过测量电位变化以确定滴定终点的方法的仪器。主要用于高等院校、科研机构、石油化工、制药、药检、冶金等各行业的各种成分的化学分析。本文主要针对电位滴定仪的结构、工作原理及应用做简单介绍
电位滴定法测定氨基酸含量
1、原理氨基酸具有酸性基团—COOH和碱性基团—NH2,利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测液中构成电池,用氢氧化钠标准溶液滴定,依据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。2、仪器①酸度计。②磁力搅拌器。③微量滴定管(10mL)。
三氯乙酸双缩脲比色法测定真蛋白的方法介绍
该方法的基本原理为:采用150g/L的三氯乙酸溶液(在混合物中的最终浓度约为120g/L )沉淀乳中的蛋白质,用过滤法分离沉淀和溶液,沉淀部分含蛋白态氮,非沉淀部分(溶液)含非蛋白态氮。将滤渣收集起来,再用双缩脲法进行定氮。即可得出样品中的真蛋白含量。三氯乙酸-双缩脲比色法可以较好地检测出乳中的真蛋
电位滴定法测定食品中氨基酸操作方法
吸取含氨基酸约20mg的试样溶液于10mL容量瓶中,加水定容,混匀后吸取20.0mL,置于200mL烧杯中,加水60mL,插入酸度计的指示电极和参比电极,开动磁力搅拌器,用氢氧化钠标准溶液(0.0500mol/L)滴定至酸度计指示pH=8.2,记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积(mL),供计算总酸度含量
高氯酸滴定-电位滴定
原理就是酸碱滴定,高氯酸和吡啶二者发生中和反应。吡啶是很弱的碱,无法在水溶液中精确滴定。而在冰醋酸中吡啶成为强碱,可以用高氯酸进行精确滴定了。滴定误差大的可能原因包括:仪器没有充分干燥,或者高氯酸标准液配制时没有用醋酸酐去水中和反应放热较大,没有进行温度校正;或者标准液标定时的温度与样品测定时温度有
滴定仪电位滴定仪使用方法
A、接通电源,仪器预热 10 分钟。B、仪器在测量被测溶液前,先要标定,在连续使用时,每天标定一次即可,标定分一点标定法和二点标定法,常规测量时采用一点标定 法,精确测量时要采用二点标定法。C 一点标定法: 仪器电极插拔去 Q9 短路插头,接上复合电极,用蒸馏水冲洗电 极, 然后浸入缓冲溶液中, (
滴定仪电位滴定仪使用方法
A、接通电源,仪器预热 10 分钟。B、仪器在测量被测溶液前,先要标定,在连续使用时,每天标定一次即可,标定分一点标定法和二点标定法,常规测量时采用一点标定 法,精确测量时要采用二点标定法。C 一点标定法: 仪器电极插拔去 Q9 短路插头,接上复合电极,用蒸馏水冲洗电 极, 然后浸入缓冲溶液中, (
电位滴定法测定样本钡含量的结果计算
计算钡含量C(mg/L)用下式计算:式中:T——滴定度,每毫升四苯硼钠相当于钡的质量(mg);V1——四苯硼钠滴定液用量(ml);V——水样体积(ml)。精密度和准确度六个实验室分析统一的365 mg/L钡标准溶液,五个实验室稀释后分析统一的36.5 mg/L钡标准溶液结果如下:①重复性:相对标准偏
电位滴定法测定样本钡含量的干扰因素
干扰因素锶离子含量超过钡含量2倍时,钙离子含量超过钡含量150倍时,对测定有干扰,使终点电位突跃不明显。锂、钾、铵离子含量超过钡含量50倍时,产生干扰。
电位滴定法测定样本钡含量的操作步骤
操作步骤(1)试样的制备本法测定可溶性钡,水样采集后,立即用0.45 μm微孔滤膜过滤,然后用氢氧化钠溶液或硝酸溶液调节pH至6,并将该水样存放于聚乙烯瓶中,室温下保存。(2)试样体积的选择视试样中含钡量而定,最低可检测至28 μg。(3)空白试验取试样同样量的纯水,以试样测定完全和同的步骤、试剂和
凝胶柱层析——考马斯亮蓝染色法测定真蛋白的方法介绍
考马斯亮蓝染色测定蛋白质是一种经典的方法,但按传统方法配成的显色剂却存在着溶解不完全、比色池上极易沉积等问题,实际操作时对测定的准确性干扰较大。为此2010年张弘等人对考马斯亮蓝显色剂中进行了改良,加入了大分子的醇类和酚类物质,新研制的显色剂溶液溶解度好,比色池上沉积很少,且稳定,存放一年不影响测定
电位滴定法测定羟苯甲酯含量
一.实验原理及方法使用电位滴定仪,采用酸碱滴定,《中国药典》2010年版二部第1226页(附录ⅦA)电位滴定法(《中国药典》2010年版二部新增)。【含量测定】取本品约1g,精密称定,置锥形瓶中,精密加氢氧化钠滴定液(1mol/L)20ml,70℃水浴1小时,立即置冰浴中放冷,照电位滴定法(附录ⅦA
电位滴定仪确定终点的方法
电位滴定法是通过电位的变化来确定滴定终点的方法,特别适用于化学反应的平衡常数较小、滴定突跃不明显或试液有色、呈现浑浊的情况。通常确定终点的有以下3种方法。电位滴定的仪器装置如图1 所示。试液中插入指示电极和参比电极构成工作电池,滴定过程不断测量工作电池电动势的变化,达化学计量点时,由于浓度的突变,引
卡托普利自动电位滴定检测分析方法
卡托普利:人工合成的非肽类血管紧张素转化酶(ACEI)抑制剂,是一种降血压药,价格低廉,能为国内众多低收入病人所接受,也是临床医生的药品之一,除肾性高血压外适用于治疗各种类型高血压。应用领域医药 样品卡托普利(市售) 检测项目卡托普利 参考标准《中华人民共和国药典-2010版》 仪器配置仪器:CT-