Udy染料染色法测定真蛋白的方法介绍

Udy染料染色法采用蛋白与一定pH的橙酸12染料结合的原理测定乳中的氨基酸,如精氮酸、组氨酸和赖氨酸,其中蛋白质的多肽长度须在5个氨基酸以上。其红色的色泽随蛋白的含量增加,即结合的越多而减退,即色泽的强弱与蛋白的浓度呈反比,因此只要在一定的波长下测定其色泽的程度,即可计算得到真蛋白的浓度。用Udy染色法测定牛奶样品中的真蛋白含量只需不到1min的时间,1967年,该法得到AOAC认可。......阅读全文

Udy染料染色法测定真蛋白的方法介绍

Udy染料染色法采用蛋白与一定pH的橙酸12染料结合的原理测定乳中的氨基酸,如精氮酸、组氨酸和赖氨酸,其中蛋白质的多肽长度须在5个氨基酸以上。其红色的色泽随蛋白的含量增加,即结合的越多而减退,即色泽的强弱与蛋白的浓度呈反比,因此只要在一定的波长下测定其色泽的程度,即可计算得到真蛋白的浓度。用Udy染

直读法测定真蛋白的方法介绍

蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation),变性蛋白质一般易于沉淀,但也可不变性而使蛋白质沉淀。引起蛋白质沉淀的主要方法有盐析、重金属盐沉淀、生物碱试剂以及某些酸类沉淀、有机溶剂沉淀、加热凝固等。吴敏等人通过对生鲜牛乳进行脱脂和水浴加热后,加入蛋白质沉淀剂、离心分离

数字图像法测定真蛋白的方法介绍

该方法是基于双缩脲反应原理,通过一次性采集标样和试样乳粉处理液的图像信息,得出试样乳粉的蛋白质含量。王旭等人利用凯氏定氮法和数字图像法测定添加了不同NPN的乳粉蛋白质含量,分析非蛋白态氮对凯氏定氮法和数字图像法测定乳粉蛋白质含量的影响。结果表明,对于没有人为添加非蛋白态氮的乳粉来说,用凯氏定氮法和数

凝胶柱层析——考马斯亮蓝染色法测定真蛋白的方法介绍

考马斯亮蓝染色测定蛋白质是一种经典的方法,但按传统方法配成的显色剂却存在着溶解不完全、比色池上极易沉积等问题,实际操作时对测定的准确性干扰较大。为此2010年张弘等人对考马斯亮蓝显色剂中进行了改良,加入了大分子的醇类和酚类物质,新研制的显色剂溶液溶解度好,比色池上沉积很少,且稳定,存放一年不影响测定

电位滴定法测定真蛋白的方法介绍

基本原理为:蛋白质的两端有游离的具有酸性的羧基(-COOH)和碱性的氨基(-NH2),当加入甲醛溶液时,氨基上的两个氢原子被次甲基所取代,于是便失去了氨基的碱性特性,从而使其呈酸性的羧基释放出来,使溶液的电化学特性发生变化。再用氢氧化钠标准溶液滴定游离的羧基(-COOH),从而用经验公式计算其蛋白质

毛细管电泳法测定真蛋白的方法介绍

电泳是指在电场作用下,带电粒子向着与其所带电荷电性相反的电极移动的现象。电泳法,就是指带电荷的供试品(如蛋白质、核苷酸等) 在惰性支持介质(如滤纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等) 中,在电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,由于各组分之间的移动速度不同,各组分分离成狭窄的

染料染色法测定细胞数

结晶紫检测法: 1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。 2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3

紫外分光光度法测定真蛋白的方法介绍

紫外分光光度法的基本原理为:蛋白质中含带共轭双键的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基,使蛋白质具有吸收紫外光的性质,其吸收峰在280 nm 处,吸光度与蛋白质含量成线性关系,因此,通过测蛋白质溶液的吸光度,即可测得样品中蛋白质的含量。该方法测得蛋白质量浓度的回收率在94.0%~106.7%之间,通过精密度

细胞生长检测方法:染料染色法测定细胞数

一、结晶紫检测法1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104 ~104 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2 的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递

考马斯亮蓝G250法测定真蛋白的方法介绍

考马斯亮蓝法是由考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质通过范德华引力结合,使蛋白质染色,通过比色测定蛋白质含量的方法。该方法精密度高,RSD为1.70%,结果准确, 相对误差较小,回收率98.2%~100.3%。考马斯亮蓝G-250 与蛋白质结合的反应十分迅速且稳定,这一方法具有灵敏度高、干扰物质少、测定

红外光谱分析法测定真蛋白的方法介绍

近红外光谱是介于可见光(VIS)和中红外光(MIR 或IR)之间的电磁波,美国材料检测协会(ASTM)将近红外光谱区定义为波长780~2526nm的光谱区。通过分子振动、转动的状态变化在不同能级间产生跃迁,当其能量与近红外光谱区内某一波长处光子的能量相当时,可产生近红外光谱吸收。食品中蛋白质和多肽在

三氯乙酸双缩脲比色法测定真蛋白的方法介绍

该方法的基本原理为:采用150g/L的三氯乙酸溶液(在混合物中的最终浓度约为120g/L )沉淀乳中的蛋白质,用过滤法分离沉淀和溶液,沉淀部分含蛋白态氮,非沉淀部分(溶液)含非蛋白态氮。将滤渣收集起来,再用双缩脲法进行定氮。即可得出样品中的真蛋白含量。三氯乙酸-双缩脲比色法可以较好地检测出乳中的真蛋

细胞生长检测9:染料染色法测定细胞数

染料染色法测定细胞数1)结晶紫检测法1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,

真核生物的间期染色质的介绍

  在细胞不分裂的间期,存在两种类型的染色质:常染色质,由具有活性的DNA组成;异染色质,主要由无活性的DNA组成,似乎在染色体阶段起到结构性作用。异染色质可进一步区分为两种类型:组成型异染色质,位于着丝粒周围,通常包含重复序列,从未表达;兼性异染色质,有时表达。

细菌染色标本检查的常用染料

  细菌染色标本检查的常用染料是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助:  细菌染色标本在普通光学显微镜下可以观察细菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构(芽胞、荚膜、鞭毛)、异染颗粒等。  因为在接近中性的环境中细菌都带有负电荷,易与带正电荷的碱性染料

真核生物中染色体的数量介绍

  无性繁殖物种所有体细胞中都具有一套相同的染色体,但无性繁殖物种可以是单倍体或二倍体。 有性繁殖物种的体细胞是二倍体,有两套染色体,一套来自母亲,一套来自父亲。配子即生殖细胞是单倍体:它们只有一套染色体。配子由二倍体生殖细胞减数分裂产生。减数分裂过程中,父母匹配的染色体可以通过交会发生一小部分遗传

关于真核生物的中期染色质的介绍

  在有丝分裂或减数分裂(细胞分裂)的早期,染色质双螺旋变得越来越浓缩。此时的染色体不再是可以进入的遗传物质(转录停止),而是一种紧凑的可运输的结构,形成经典的四臂结构,一对姐妹染色单体在着丝粒处相互连接。较短的手臂被称为p臂,较长的手臂称为q手臂 。这个时期是用光学显微镜观察单个染色体的最佳时间。

比色方法测定蛋白质介绍

比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。Lowry 法:以最早期的Biuret 反应为基础,并有所改进。蛋白质与Cu2 反应,产生蓝色的反应物。但是与Biuret 相比,Lowry 法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂;反应需要的时间较长;容易受到非蛋白物质的影

细胞染色技术中常用的碱性染料和酸性染料有哪些

1、酸性染料这类染料电离后染料离子带负电,如伊红、刚果红、藻红、苯胺黑、苦味酸和酸性复红等,可与碱性物质结合成盐。当培养基因糖类分解产酸使pH值下降时,细菌所带的正电荷增加,这时选择酸性染料,易被染色。2、碱性染料这类染料电离后染料离子带正电,可与酸性物质结合成盐。微生物实验室一般常用的碱性染料有美

比重瓶法测定粉末真密度的原理及方法

1. 了解粉体真密度的概念及其在科研与生产中的作用;2. 掌握浸液法 —— 比重瓶法测定粉末真密度的原理及方法实验原理:测试技术概述粉体真密度是粉体质量与其真体积之比值,其真体积不包括存在于粉体颗粒内部的封闭空洞。所以,测定粉体的真密度必须采用无孔材料。根据测定介质的不同,粉体真密度的主要测定方法可

脂蛋白染色介绍

1.油红O(oil red)染色将凝胶先置于平皿中,用5%乙酸固定20min,用H2O漂洗吹干后,再用油红O应用液染色18h,在乙醇∶水=5∶3中浸洗5min,最后用蒸馏水洗去底色。必要时可用氨基黑复染,以证明是脂蛋白区带。2.苏丹黑B(sudan black B)将2g苏丹黑B加60ml吡啶和40

真核生物的染色体类型

真核生物中的染色体由染色质丝组成。染色质丝由核小体组成(组蛋白八聚体,DNA链的一部分附着并包裹在其周围)。染色质丝被蛋白质包装成称为染色质的浓缩结构。染色质含有绝大多数的DNA和少量的母系遗传获得的如线粒体DNA。染色质存在于大多数细胞中,除少数例外,例如红细胞。染色质允许非常长的DNA分子进入细

瑞氏染色法:瑞氏染料

  由酸性染料伊红(E-)和碱性染料亚甲蓝(M+)组成。伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。亚甲蓝(又名美蓝)为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐,即氯化美蓝,有色部分为阳离子。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)。将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染料。甲醇的作

关于芽孢染色的染色方法介绍

  (1)芽孢染色— 将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌,作涂片、干燥、固定。  (2)芽孢染色— 滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。  (3)芽孢染色— 用木夹夹住载玻片在火焰上加热,使染液冒蒸汽但勿沸腾,切忌使染液蒸干,必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—

关于真核生物的基因调控—染色质活化的介绍

  染色质处在固缩的状态称为异染色质化。在异染色质化部位的基因的转录活性显著降低。真核生物可以改变染色体某一区域的异染色质化的程度而控制基因的表达。雌性哺乳动物细胞中的一个 X染色体的失活便是高度异染色质化的结果(见剂量补偿效应)。基因由于改变位置而处在异染色质区附近时,转录作用也会受到阻碍(见位置

关于真核生物的基因调控—染色质丢失的介绍

  染色质丢失— 在发育过程中一些体细胞失去了某些基因,这些基因便永不表达,这是一种极端形式的不可逆的基因调控。  在某些线虫、原生动物、甲壳动物发育过程中的体细胞有遗传物质丢失现象。在这些生物中,只有生殖细胞才保留着该种生物基因组的全套基因。例如在马副蛔虫(Ascaris megacephala)

蛋白质染色介绍

染色液种类繁多,各种染色液染色原理不同,灵敏度各异。使用时可根据需要加以选择。常用的染色液有:1.氨基黑10B(amino black 10B又称为amidoschwarz 10B或naphthalene blueblack,2B 200)氨基黑10B分子式为C22H13N6S3Na3,MW=7

饲料中真蛋白的测定

方案优势       1、替代进口的尖端产品:集合了业内顶级科研精英,强大的核心控制系统、高度自动化和无可挑剔的整机部件使Kll00成为了国内功能最丰富的全自动凯氏定氮仪,可替代进口产品和”98”系列。 2、强大的ARM系统:基于海能公司对凯氏定氮仪的多年开发经验,通过市场调研,根据用户需求特别

真蛋白的概念和来源

真蛋白(true protein,TP)即真正的蛋白质,在测定方面可定义为除了非蛋白质氮以外的蛋白态氮所计算得到的蛋白,正常情况下,天然乳中真蛋白的含量少于粗蛋白。酪蛋白是乳品真蛋白中最重要的蛋白质,主要以胶束状态存在于乳中,它是以含磷蛋白质为主体的几种蛋白质的复合体,主要分为αs12酪蛋白、αs2

染色质蛋白非组蛋白的介绍

  非组蛋白主要是指与特异DNA序列相结合的蛋白质,所以又称序列特异性DNA结合蛋白(sequence specific DNA binding protein)。利用凝胶延滞实验(gel retardation assay),可以在细胞抽提物中进行检测。首先制备一段带有放射性标记的已知特异序列的D