常用DAN探针制备的方法介绍末端标记
末端标记(end labeling)是利用酶学方法或化学方法将标记物,如同位素、生物素、荧光素等标记到核苷酸链的5'或3'端制备探针。酶学方法中常用的酶有:经枯草杆菌蛋白酶水解大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ形成具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性而缺乏5'→3'外切酶活性的 Klenow 片段;具有5'→3'聚合酶活性和较强的3'→5'外切酶活性的 T4 DNA 聚合酶;具有催化 ATP 的磷酸转移到 DNA 或 RNA 5'-OH 末端的T4多核苷酸激酶;具有催化单链 DNA 或 RNA 5'-磷酸基团与单链 DNA 或 RNA 3'-羟基连接的 T4 RNA 连接酶等。采用化学方法将 RNA 3'端用过碘酸盐氧化,以一个二胺(或多胺)或细胞色素 c 为桥连接生物素,制备生物......阅读全文
关于扁桃酸的制备方法介绍
扁桃酸有三种合成方法： 1）苯甲醛相转移法：苯甲醛在季铵盐相转移催化剂作用下，依次加入氯仿、50%的氢氧化钠水溶液，经加热反应后，冷却、搅拌、分离、硫酸酸化、乙酸乙酯分三次抽提得到产物； 2）苯乙酮法：苯乙酮与硝基苯在碱催化剂作用下反应得到。苯乙酮、硝基苯和氢氧化钠在160--170℃反应温
青蒿素的制备方法介绍
化学合成以 R －（+）－ 香茅醛为原料合成青蒿素过程 1983年，化学家HofheinzW等通过化学研究发现了青蒿素的化学合成方法，以（－）－2－异薄勒醇为原料，利用光氧化反应引进氧基得到中间体，再经过环合反应合成了最终产物。合成倍半萜内酯，主要有两个限速步骤：倍半萜母核的折叠和环化；含过氧桥的倍
神经酰胺的制备方法介绍
神经酰胺的获取方式主要有三种：1.天然提取法天然提取的神经酰胺来源于动物和植物。动物中来源于有致病风险的动物脑部，所以不可应用于化妆品中。植物提取方法受植物生长周期和季节的限制，产量较低。2.化学合成法化学合成的主要是拟神经酰胺，其结构与神经酰胺相似，功能相似，可应用于化妆品中，已有多种拟神经酰胺成
关于盐桥的制备方法介绍
1．琼脂－饱和KCl盐桥：烧杯中加入3g琼脂和97ml蒸馏水，使用水浴加热法将琼脂加热至完全溶解。然后加入30克KCl充分搅拌，KCl完全溶解后趁热用滴管或虹吸将此溶液加入已事先弯好的玻璃管中，静置待琼脂凝结后便可使用。 多余的琼脂－饱和KCl用磨口塞塞好，使用时重新加热。 若无琼脂，也可以
关于半缩酮的制备方法介绍
缩酮传统的合成方法是在酸催化下，加热回流，醛酮与醇直接反应生成缩酮，但存在反应时间长、副反应多、后处理复杂等缺点；随后各种新的合成缩酮的催化体系被不断发现，如离子液体、纳米TiO等。这些催化剂体系有效地催化了羰基缩酮反应的发生，但仍存在反应时间较长、需加热回流、工艺复杂等缺点。20世纪20年代，
关于藜芦醛的制备方法介绍
一、性质与稳定性： 1. 避免与强氧化剂接触。 2. 存在于白肋烟烟叶中。 3. 天然少量存在于香茅油等精油里。 二、贮存方法：储存于阴凉、通风的库房。远离火种，水源。应与氧化剂分开存放，切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。 三、制备方法： 1、以相应的羟基甲氧基苯甲醛为原料，在
关于赤藓糖醇的制备方法介绍
赤藓糖醇的生产可分为微生物发酵法和化学合成法2种。 1、微生物发酵法 发酵法生产赤藓糖醇始于20世纪90年代,国际上均采用微生物发酵法大批量生产赤藓糖醇。生产赤藓糖醇的碳源有烷烃、单糖和双糖等,葡萄糖、果糖、甘露糖和蔗糖都是生产赤藓糖醇的良好碳源,其中D-甘露糖的转化率最高,达31.5%。但
实验常用试剂的制备与储藏（三）
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 电泳缓冲液 50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液 5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液 染料 1％溴酚蓝（bromophenol blue） 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1％二甲苯青FF（xylene
常用试剂的性质与制备纯化（三）
17．高碘酸商品的高碘酸一般有95%和50%两种规格。高碘酸可对相邻碳原子上有两个羟基或一个羟基和一个氨基的化合物进行选择性氧化。即：C－C键断裂。RCH（OH）CH（OH）R'+ HIO4 → RCHO + R'CHO + HIO3 + H2ORCH（OH）CH（NH2）R'
常用试剂的性质与制备纯化（四）
21．钾在处理钾时必须非常小心，要在装有石油醚的研钵中切金属钾，不要用易碎的烧杯或培养皿。切开外面的氧化层，然后用镊子将碎屑放入另一装有石油醚的研钵中。用镊子将刚切的钾夹到滤纸上，快速吸干，然后加到已知质量的装有石油醚的烧杯中，称量。将称量后的钾加到反应物中。钾碎屑不应久置，应立即分解掉，可将装有钾
实验常用试剂的制备与储藏（一）
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（amm
实验常用试剂的制备与储藏（二）
100×Denhardt试剂（Denhardt's regent） 依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。 10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） 将配制好的缓冲
实验常用试剂的制备与储藏（四）
三.常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 用水补足体积到1L。分成100
常用试剂的性质与制备纯化（二）
9．N,N-二甲基甲酰胺（DMF） 沸点149～156℃，密度d＝0.9487，折光率n 20D ＝1. 4305，无色液体，能与多数有机溶剂和水互溶，是优良的有机溶剂。市售的DMF含有少量水、胺和甲醛等杂质。在常压蒸馏时有些分解，产生二甲胺与一氧化碳，若有酸或碱存在时，分解加快，在加入固体氢氧化
Northern杂交试验指导手册（5）－RNA探针制备
五、RNA探针制备（根据the DIG system user's guide）A． 地高辛标记的体外转录试剂及其配制（试剂盒提供）：10× NTP标记混合物：in Tris-HCl (pH 7.5)10mmol ATP10mmol CTP10mmol GTP6.5mmol UTP3.5mm
关于比浊法的常用方法介绍
（1）目视比浊法 目视比浊法就是指用眼睛观， 比较悬浊液浊茺以确定物质含量的方吱。其操作是先配制一系列浊度逐渐增加的标准，然后在同样的实验条件下，将被测液的浊度与标准进行比较比而获得测量结果。 （2）免疫比浊法 免疫比浊法包括透射比浊法和散射比浊法两种。 （3）光电比浊法 当光束通过悬
关于细菌染色技术常用的方法介绍
细菌染色技术常用方法有： ①革兰氏染色法，是一种复染色方法，即选用结晶紫和石碳酸复红两种染液染色的方法，依此将细菌分成革兰氏阳性菌(记G+)和革兰氏阴性菌(记G-)。 ②简单染色法，是用一种染液染色的方法，如美兰或石碳酸复红等，此法只能显示细菌的形态及大小。 ③特殊结构染色法，是染色细菌细
几种基因克隆的常用方法介绍（一）
基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1 根据已知序列克隆基因对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最
常用的指示性生物监测方法介绍
常用的指示性生物监测方法：藻类监测：通过对水体中藻类的种类、数量、群落结构和生理特性的分析来评估水质。例如，绿藻在清洁水中常见，而蓝藻在富营养化的水中易大量繁殖。底栖动物监测：底栖无脊椎动物（如螺蛳、河蚌、水蚯蚓等）对水体污染和底质变化较为敏感。常用的方法有物种多样性指数、优势种分析等。鱼类监测：观
几种基因克隆的常用方法介绍（二）
3.2 Differential display PCR(DD-PCR) DD-PCR是在AP-PCR基础上发明的一种RT-PCR方法,主要用于 2种或多种类似生物个体在基因表达上的差异分析。其基本原理是:所有真核生物的成熟mRNA都含有不同长度的poly+(A)尾部序列,根据poly+ (
简述探针标记方法
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´；端核苷酸，同时在3´；端修复加入被标记核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀，多用于大分
李峰团队发展新型蛋白质AIE纳米点光学探针制备方法
2001年，香港科技大学教授唐本忠团队发现了一种与传统聚集淬灭相反的现象，称为聚集诱导发光（aggregation-induced emission, AIE）现象，其主要原理是由于分子内运动受到限制，导致非辐射衰减渠道被抑制，辐射衰变增强而发光。与传统的有机染料相比，AIE荧光材料具有抗光漂白
生物芯片制备
载体材料及要求作为载体必须是固体片状或者膜、表面带有活性基因，以便于连接并有效固定各种生物分子。目前制备芯片的固相材料有玻片、硅片、金属片、尼龙膜等。目前较为常用的支持材料是玻片，因为玻片适合多种合成方法，而且在制备芯片前对玻片的预处理也相对简单易行。载体种类玻璃片、PVDF膜、聚丙烯酰氨凝胶、聚苯
生物芯片的制备方法
载体材料及要求作为载体必须是固体片状或者膜、表面带有活性基因，以便于连接并有效固定各种生物分子。目前制备芯片的固相材料有玻片、硅片、金属片、尼龙膜等。目前较为常用的支持材料是玻片，因为玻片适合多种合成方法，而且在制备芯片前对玻片的预处理也相对简单易行。载体种类玻璃片、PVDF膜、聚丙烯酰氨凝胶、聚苯
生物芯片的制备方法
载体材料及要求作为载体必须是固体片状或者膜、表面带有活性基因，以便于连接并有效固定各种生物分子。目前制备芯片的固相材料有玻片、硅片、金属片、尼龙膜等。目前较为常用的支持材料是玻片，因为玻片适合多种合成方法，而且在制备芯片前对玻片的预处理也相对简单易行。载体种类玻璃片、PVDF膜、聚丙烯酰氨凝胶、聚苯
多酶饲料制备方法介绍
多酶饲料制备的工艺主要有以下两种：加酶法，即通过外加现成的饲料酶的方式制备多酶饲料，这一种方式较为常见;发酵法，即利用微生物发酵产酶的方式制备多酶饲料。联合使用外加酶的酶解作用和微生物的发酵作用的方式制备多酶饲料，也归为发酵法一类。
引物设计和末端标记实验
试剂、试剂盒 激酶缓冲液MgCl2二硫苏糖醇牛血清白蛋白ddH20TE 缓冲液EDTA聚核苷酸激酶引物放射性化合物仪器、耗材 放射性化合物离心机和转子丙烯酸防护板离心管架废弃物容器盖革计数器QuickSpin 柱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂5X 激酶缓冲液0.25mol/LTris-H
引物设计和末端标记实验
对 SSCP 解析能力和局限性的系统分析揭示灵敏度和片段长度有显著的相关性。当DNA 长度为 150~200bp 时，突变的检出率最高。本方案应用了高专一性的放射性同位素，并且包含一个纯化步骤用于去除未利用的核苷酸，从而降低了整个反应的放射能量。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，
引物设计和末端标记实验
试剂、试剂盒 激酶缓冲液 MgCl2 二硫苏糖醇 牛血清白蛋白 ddH20 TE 缓冲液 EDTA 聚核苷
生物素酰化探针的制备实验——切口平移法
在标准的切口平移实验体系中，生物素-11-dNTP取代了dNTP，DNA酶I 的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围，其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材注射器电