PCR基因扩增中污染来源及污染防治措施介绍
1、测定分析前的污染源测定分析前实验材料的污染主要来自非病人标本来源的核酸。2、测定分析阶段的污染源通常,测定分析阶段的每一步都可能发生对样本的污染。反应混合液的任何成分及核酸的制备和反应建立阶段所涉及到的实验设备的任何部位都是可能的污染源。如受污染的试剂(例如牛血清白蛋白,明胶或矿物油)、商品酶制剂、消耗品(如反应管,吸头)和实验设备(如加样器、离心机)等。在前面三个工作区中,不当的实验操作会引起所使用的试剂、消耗品或实验设备的污染。而在产物分析区,当吸取扩增产物用于检测时,非常容易引起污染,因此必须制定标准操作程序(SOP),并严格执行。3、污染的避免要避免污染,首先应是预防而不是排除污染,前面所述对工作区的严格划分的目的即是为了预防污染。为避免以前测定中所产生的扩增产物的污染,可设法将其破坏掉。如在扩增反应中用dUTP取代部分dTTP,使得产生的特异扩增片段含有尿嘧啶,这样扩增前在反应混合液中加入尿嘧啶糖苷酶(UNG),可......阅读全文
PCR基因扩增中污染来源及污染防治措施介绍
1、测定分析前的污染源测定分析前实验材料的污染主要来自非病人标本来源的核酸。2、测定分析阶段的污染源通常,测定分析阶段的每一步都可能发生对样本的污染。反应混合液的任何成分及核酸的制备和反应建立阶段所涉及到的实验设备的任何部位都是可能的污染源。如受污染的试剂(例如牛血清白蛋白,明胶或矿物油)、商品酶制
土壤中金属污染来源及防治技术
随着我国的工业化和现代化的进程加快,环境问题日益显著,重金属污染进一步的加剧。其中汞的毒性是zui强的,汞污染对于土壤、农作物、人体和经济都有严重的影响。尤其是对于土壤的危害根治严重,该篇文章主要对汞污染的来源和防治做了简要的说明,进一步的说明土壤中汞金属的防治的紧迫性和实际意义。 重金属是指
水污染防治措施重金属污染防治
重金属污染防治由冶金、电镀,石油化、机械制造等废水排放出重金属而引起的水质污染,是最早被人们发现对人体健康和生态环境造成危害的。环境保护工作多是从防治水体重金属污染开始,排放有关重金属的企业必须有处理措施。目前我国重金属污染已基本得到控制,水环境重金属浓度已基本达标,仅个别时段、局部河段还不能完全达
水污染防治措施痕量有机污染物防治
痕量有机污染物防治世界发达国家正面临着这个问题。我们在解决了耗氧有机物污染之后,也会将重点转向痕量有毒有害有机物污染的防治。正如前述,这些污染物浓度虽低,但有致畸、致突变、致癌作用,有干扰内分泌效应,有生殖遗传毒性,有急性、慢性毒性等。为了保护人体健康,各国都花费很大代价去解决这个问题。目前我们已起
细胞污染的分类、来源及预防污染的措施
细胞污染是细胞培养的大敌,预防和避免污染是细胞培养成功的关键。一旦轻敌就会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。而且小编的童鞋也经常向我抱怨:每到毕业季,就蓝瘦,香菇是因为细胞死了一批又一批,毕业遥遥无期啊!那么如何打一场漂亮的细胞保卫战呢?下面就跟随小编一起来学起来吧
临床基因扩增检验实验室标本扩增区的污染防治
下述工作在本区内进行:DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。不能
环境污染防治措施有哪些
一,减少污染气体的排放,如工厂上脱硫工艺,减少粉尘排放等等;二,采取集中供热等措施,节约能源的同时,减少污染物的排放;三,多植树造林,改善下垫面,减少风吹尘;四,鼓励多乘坐公共交通工具,减少能源浪费的同时减少温室气体等的排放;五,区域协同控制,大气污染不是一个城市的问题,在特定的天气条件下污染物会输
PCR实验室的污染来源
1、样本间交叉污染:收集样本的容器被污染或样本密封不严外溢;不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖;移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌;不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散,相互交叉污染。2、实验试剂污染:主要是在 PCR 组分试剂加样过程中,由于移液器、容器、阴性对照
临床基因扩增检验实验室标本扩增产物分析区的污染防治
下述操作在本区内进行:扩增片段的测定。 核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法,即PCR-ELIS
细胞支原体污染原因、来源及预防措施3
测试步骤用间接步骤,将待测细胞悬浮液或细胞培养液接种于指示细胞培养液中(indicator cell,例如Vero cell or 3T6 cell),然后培养指示细胞再作萤光染色。正负反应对照组亦可以接种于indicator cell内作为对照。·待测细胞亦可作直接测试,但需为吸附型细胞,培养后直
细胞支原体污染原因、来源及预防措施1
细胞株若受到细菌、真菌、支原体、或是特定病毒等之污染时,会严重的影响实验的结果。而细菌、真菌等之微生物污染时,较易自培养基等的外观变化察觉。但是若受到支原体之污染时,细胞之外观较无明显变化,但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化。各国细胞库支原体污染的统计表,如下:国家
临床基因扩增检验实验室标本制备区的污染防治
下述操作在该区进行:临床标本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。要正确使用加样器。由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。可通过在本区内设立正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入
山西四措施防治大气污染
11月6日,记者从山西省经信委获悉,由该部门负责制定的落实大气污染物防治行动计划实施方案已经出炉。方案明确提出,山西将以整顿违规项目、淘汰落后产能、搬迁污染企业、替代燃煤能源等四项措施为突破口,以化工、水泥、有色金属冶炼等重点行业为抓手,力争到2017年使全省空气质量明显好转,扭转当前因产业结构
收集,贮存过程中采取的污染防治措施有哪些
1、运输时应取密、遮盖、捆扎、喷淋等措施防止扬散。2、对运输危险废物的设施和设备应当加强管理和维护,保证其正常运行和使用。3、人能混合运输性质不相容而又未经安全性处置的危险废物。4、转移危险废物时,必须按照规定填危险废物转移联单,并向危险废物移出地和接受地的县级以上地方人民政府环境保护行政主管部门报
PCR基因扩增仪的日常维护保养措施
1、样品池的清洗 先打开盖子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液体,用棉签吸干剩余液体,设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行,让残余液体挥发去除,一般5——10min即可。2、热盖的清洗 对于荧光定量基因扩增仪,当有荧光污染出现
大气污染防治工作十条措施-把好防治污染信贷关
国务院常务会议近日确定了大气污染防治工作十条措施,规定对未能通过能评、环评的项目不得提供贷款支持,并要求加大对大气污染防治的信贷支持。笔者认为,银行等金融机构有责任贯彻相关要求,积极践行绿色信贷,为建设“美丽中国”做出自己的努力。 一要牢固树立绿色信贷意识。银行等金融机构应正确处理当前利益
PCR污染及防止污染的方法
污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。 (二)PCR试剂的污染:主
水污染的污染物来源介绍
污染物主要有:(1)未经处理而排放的工业废水;(2)未经处理而排放的生活污水;(3)大量使用化肥、农药、除草剂而造成的农田污水;(4)堆放在河边的工业废弃物和生活垃圾;(5)森林砍伐,水土流失;(6)因过度开采,产生矿山污水。
PCR实验中的污染预防及处理
一.污染的预防 进行PCR 操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR 污染或杜绝污染的出现。 (一)划分操作区:目前,普通PCR 尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,P
水污染防治措施耗氧有机物和富营养物质的污染防治
我国十大水系水质普遍受到耗氧有机物的不同程度污染。COD Mn、、BOD5、氨氮、挥发酚、矿物油等主要指标超标严重。湖泊水库和近岸海域总氮、总磷浓度超标。在特定的气象条件下暴发“水华”(湖泊)和“赤潮”(海洋)。我国从“八五”开始就把防治水中耗氧有机物污染和防治湖泊富营养化作为重点,“九五”和“十五
工业废水污染防治技术措施
1、产品完善:调节产品结构优化产品配方组成;2、废物产生源控制:能源、原材料和生产工艺优化,工艺设备改造和革新3、废物综合利用:回收、再利用;4、改进生产管理:岗位责任制,员工培训制度,考核制度)、末端处理(处理程度确定--处理技术与工艺流程优化--达标排放)。
廊坊利用智能管理平台-优化污染防治措施
●空气质量智能管理(PALM)平台实现七大功能:空气质量与污染源的智能监控、高时空解析度污染源排放清单、实时源解析及污染源头追踪、重污染天气的预警预报,重污染天气的应急响应与决策,基于大数据挖掘技术的空气质量评估、污染防治措施优化方案及效果评估与反馈 河北省廊坊市政府日前与海创智库(千人计划)
噪声污染这方面有什么防治措施
我国针对噪声污染制定了一系列的防治措施。下面是具体的措施:1. 执行噪声限制值:我国出台了一系列的噪声限制值标准,要求各种设施和活动都要遵守这些标准,以减少噪声污染。2. 加强城市规划:城市规划要合理设置噪声源和居民区之间的距离,通过城市规划的方式减少噪声污染。3. 提高车辆和设备的噪声控制水平:对
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃
临床基因扩增检验实验室试剂贮存和准备区的污染防治
贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区,不能经过产物分析区。在打开含有反应混合液的离心管或试管前,应将其快速离心数秒。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。当贮存试剂溶液经检查可用后,应将其分装贮存备用,避免由于经常打开反应管吸液而造成污染。含反应混合液的离心
PCR实验中的污染预防及处理(一)
一.污染的预防 进行PCR 操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR 污染或杜绝污染的出现。 (一)划分操作区:目前,普通PCR 尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行
PCR实验中的污染预防及处理(二)
(二)环境污染:在排除试剂污染的可能性外,更换试剂后,若不久又发现试剂被污染了,如果预防措施比较严密,则考虑可能为环境污染。 环境污染中常见的污染源主要有: 1. 模板提取时真空抽干装置; 2. 凝胶电泳加样器; 3. 电泳装置;
PCR实验中的污染预防及处理(三)
1. 原理:在PCR 产物或引物中用dU 代替dT。这种dU 化的PCR 产物与UNG 一起孵育,因UDG 可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键,可除去dU 而阻止TaqDNA 聚合酶的延伸,从而失去被再扩增的能力。UNG 对不含dU 的模板无任何影响。UNG 可从单或双
PCR污染的主要污染源介绍
(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。 (二)PCR试剂的污染:主要是由于
PCR污染及解决对策
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法,在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中,扩增的DNA产量是呈指数上升的,经过n个循环的扩增,一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/