PCR污染及解决对策
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中，扩增的DNA产量是呈指数上升的，经过n个循环的扩增，一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/ml，取0.1ml即为109拷贝，而1mg人基因组DNA才含1.4´106拷贝的单拷贝基因片段，因此使得PCR扩增反应具有强大的扩增能力，提高了检测的敏感性。此外，利用PCR反应，还能够对感染因子实施定量分析，实时监测其在宿主体内的动态变化，有利于指导临床诊疗。正是由于PCR反应具有强大的扩增效率，也导致其易污染的缺点，极微量的污染便可导致假阳性结果。PCR反应中，主要存在三个污染源：1.标本间的交叉污染；2.实验室克隆质粒的污染；3.PCR扩增产物的污染。其中以第三个污染源最主要，通过下面一个例子便可认识到PCR产物污染的......阅读全文
PCR污染及解决对策
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中，扩增的DNA产量是呈指数上升的，经过n个循环的扩增，一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/
PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污
PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生. 一、污染原因 1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样
PCR的污染与对策
一、污染原因 （一）标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染. （二）P
PCR实验污染与对策
PCR反应的zui大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。一、污染原因1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪
PCR技术（四）：PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由
浅谈PCR方法中常见的污染问题及对策
浅谈RT-PCR实验方法中常见污染问题及对策 河南出入境检验检疫局技术中心 李轲 反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）是一种体外核酸扩增技术，它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定，所以
PCR常见问题及对策
PCR常见问题及对策（一）没有得到扩增产物（1）酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。（2）模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。（3）变性温度是否准确：PCR
浅谈RTPCR实验方法中常见污染问题及对策
李轲反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是一种体外核酸扩增技术，它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定，所以近年来RT-PCR技术被广泛应用于人和动物的多种传染病早期诊断。 笔者一直
浅谈RTPCR实验方法中常见污染问题及对策
李轲反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）是一种体外核酸扩增技术，它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定，所以近年来RT-PCR技术被广泛应用于人和动物的多种传染病早期诊断。笔者一直从事实
实验室如何检测及解决PCR污染的方法
生物实验，大多数实验检测都是微观的，基于细胞，分子，蛋白水平，而这些微观样本对外界环境的影响敏感，比如温度、ph值、酶解、损伤等，在我们尽力呵护样本的生存环境的同时，污染也是需要注意的头等大事，要坚决避免环境中的“杂质”的乱入，包括样本污染，试剂仪器交叉污染、产物气溶胶污染等对实验结果的影响。“易查
实验室如何检测及解决PCR污染的方法
生物实验，大多数实验检测都是微观的，基于细胞，分子，蛋白水平，而这些微观样本对外界环境的影响敏感，比如温度、ph值、酶解、损伤等，在我们尽力呵护样本的生存环境的同时，污染也是需要注意的头等大事，要坚决避免环境中的“杂质”的乱入，包括样本污染，试剂仪器交叉污染、产物气溶胶污染等对实验结果的影响。“易查
如何检测及解决PCR实验室污染的方法
【导读】 面对众多的污染源，比如样本交叉污染、试剂仪器交叉污染、克隆质粒污染、PCR扩增产物污染、还有极容易忽视的气溶胶污染，气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系，在空气与液体面摩擦时，比如在操作时比较剧烈地摇动反应管，开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶
『PCR实验污染』的解决办法！
PCR污染是每个实验室都多多少少会遇到的问题。原因在于，PCR是非常灵敏的一项检测，100个拷贝之内的靶序列就足以产生阳性扩增，从而容易出现DNA污染导致的假阳性。那么，怎样远离PCR的污染呢？ 图 PCR污染之一瞥 首先，要辨别PCR污染的来源。设立阴阳性对照，有利于检测反应体系各成分的污
PCR拖尾及假阳性的原因及对策
拖尾 现象：产物在凝胶上呈Smear状态。 原因： 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策： 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP
水库水质检测污染分析及对策
一、概述水库是大型的水利枢纽工程，修建水库最主要的作用是防洪防汛抗旱，还有供水、灌溉、旅游等其他作用，其中供水也是水库至关重要的作用之一。如果要达到供水标准，就必须符合国家《地表水环境质量标准》中三类标准，如果要达到可供饮用就要达到二类标准。我国有湖北三峡、广西龙滩、青海龙羊峡等758 座大型水库，
解决PCR实验室污染的方法
（1）开窗通风：如在短时间内要消除实验室污染，开窗通风促进实验室内空气流通，使停留在室内的核酸排放到室外。 （2）紫外灯照射：将实验室内好生物安全柜内物品平铺，打开离心机内盖，然后将紫外等打开照射12-24小时，通风12小时以上。 （3）消毒液降解核酸：及时用1%-2%的次氯酸钠擦拭操作
PCR污染及防止污染的方法
污染原因 （一）标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。 （二）PCR试剂的污染:主
大气污染防治面临的挑战及对策
近年，随着我国经济快速发展，城市建设不断扩大，环境污染问题日益严峻，其中最为突出的一项就是大气污染。大气污染主要体现在空气中的浮尘颗粒较大、污染物超标，尤其是在高密度人口的经济及社会活动中，大量细颗粒物的排放超过大气循环能力和承载度而形成雾霾，其不仅造成了大气污染，更直接影响了人们的身体健康。为
大气污染防治面临的挑战及对策
随着时代的进步发展，我国在不断加强城市文明建设的进程中取得了显著成效，但与此同时随之而来的是日益严峻的环境污染问题，当各类环境污染成为民生之患、民心之痛，环境治理就应运而生。对此，我国对大气污染治理力度在不断加大，制定了相关的大气污染预防措施，取得了一定的成效，但是还需进一步加强大气污染的防治工
分离度下降解决对策
1.色谱柱被污染;2.固定相被破坏(柱流失);3. 进样失败，检查泄露;4.检查温度的适应性，检查衬管;5.样品浓度过高，稀释，减少进样量，用高分流比。
PCR仪PCR注意事项及解决方案
1、PCR 污染PCR 技术的敏感性极高，极微量的污染即可导致假阳性的产生，因此，了解 PCR 污染的原因，采取相应的措施预防和消除 PCR 污染就十分重要。PCR 污染主要是随机污染，包括 PCR 反应前污染及反应后污染。（1）PCR 反应前污染主要是样品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的
自动抛光机可能出现的问题及解决对策
虽然自动抛光机更方便、更快、更高効，但也不可避免地会出现一些问题。本文将重点介绍自动抛光机中可能出现的问题并给出解决方案。 抛光轮使用中的问题: 不用说，抛光轮在整个抛光过程中的重要性，无论表面是什么样的处理，都必需用它来完成。打磨、剥皮、去毛刺、磨砂抛光、镜面抛光等。除了它的重要性，还有许
lenze减速机漏油的原因分析及解决对策
lenze减速机漏油的原因分析及解决对策资料 LENZE伦茨减速机针对磨损问题，传统解决办法是补焊或刷镀后机加工修复，但两者均存在一定弊端：补焊高温产生的热应力无法完全消除，易造成材质损伤，导致部件出现弯曲或断裂；而电刷镀受涂层厚度限制，容易剥落，且以上两种方法都是用金属修复金属，无法改变
PCR简介及污染的处理
PCR技术简介 前言 一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式
PCR常见问题分析与对策
1.PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 2.假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白
便携式气体检测仪故障及解决对策
便携式气体检测仪故障及解决对策 检测不准确 解决对策： 1、确认现场的气体浓度是否准确，有时候理论值和实际值之间的差值很大，最好通过通入标准气体来验证仪器的准确性，或送第三方计量机构检测。 2、若传感器使用的时间较长，测量值可能会有一些误差，需要先和厂家确认传感器是否
PCR条带微弱原因及解决方法
CDNA：0.5微升primer：1微升dNTP：2微升10*buffer：2微升TAG酶：0.25微升D.W.：14.25微升PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+)1、预变性（Initialdenaturation）．模板DNA完全变
PCR常见问题及解决方案
PCR常见问题及解决方案 1没有扩展条带 可能的原因及对应的解决方案如下： 酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR
PCR条带微弱原因及解决方法
CDNA：0.5微升primer：1微升dNTP：2微升10*buffer：2微升TAG酶：0.25微升D.W.：14.25微升PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+)1、预变性（Initialdenaturation）．模板DNA完全变