为什么有的细胞消化以后容易相互聚集
个人认为是消化程度的问题。如果胰酶处理过度，细胞就会吹不散，形成絮状。原因是胰酶作用于细胞膜蛋白，过度处理引起细胞膜破裂，破裂细胞的DNA粘连在一起。---------最近培养PC12的时候也遇到细胞聚集的问题，我查了一些资料，有些细胞就是这样的，容易聚集成团，消化之后一定要吹匀。消化时用低浓度的胰酶有利于形成单细胞悬液。......阅读全文
细胞消化知识
无论是原代细胞还是细胞系或癌细胞，细胞长满瓶后，需要对细胞进行传代或将细胞收集起来用作其他实验。贴壁生长的细胞必须要做的一步便是消化过程，下面便对细胞消化、中和、洗涤等过程做个简单介绍。1、绝大部分细胞消化的时候是只需用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留胰酶附着在细胞表面在37度一般不到2min足够
细胞消化基础问答
细胞培养实验中不可或缺的除了培养基，胰酶也是非常重要的一个角色，虽然细胞培养试验基本技术大同小异，每种细胞的培养条件各不相同，但是，在细胞传代过程中都少不了这个步骤—胰酶消化。细胞消化使用胰酶时需要了解哪些问题？一、 细胞培养过程中为什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽
细胞传代实验_消化法
实验方法原理用胰蛋白酶消化细胞，用于贴壁细胞传代培养。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶酒精PBS仪器、耗材超净工作台酒精灯酒精棉球培养箱显微镜吸管离心管离心机实验步骤一、传代前准备 1. 预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 2. 用75%酒精
细胞消化经验总结！
一、酶消化法1、胰酶。这是用得多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活性。保存
细胞消化的小技巧（二）
细胞消化小技巧不一定要一次把所有细胞都要消化下来！晃动培养盘并在显微镜下用肉眼观察，只要70~80%细胞都收缩了或超过适合消化时间，就该终止消化反应，如果细胞量够即可进行后续传代或实验步骤；如果细胞量不够，则可视情况用不含钙、镁离子的平衡盐溶液清洗仍贴壁的细胞，再进行一次消化反应。▲ 消化不下来的细
细胞消化的经验总结
一、酶消化法1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25% 的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活
细胞消化胰酶的配制
适用于，无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl
细胞消化的小技巧（一）
每个做细胞实验的人，不管去哪“浪”，心里都会有个牵挂：我的细胞过两天要传代！大部分组织细胞离体培养时，会以贴壁的形式生长（除了取自血、脾或骨髓的细胞）;完全培养基中的血清，含有许多带阳性电荷的促细胞附着因子（层黏连蛋白 Laminine、纤维链接蛋白 Fibronectin 等胞外基质），能帮助细胞
如何温和地消化细胞减少损失？
细胞的生命极其脆弱消化一定程度上是对它们的一种折磨所以做好细胞消化善待你的细胞们一些细节要注意在使用胰酶（Trypsins）细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差，做流式时的CD Marker 也可能会下降。细胞消化心得对大
细胞传代培养（消化法）
细胞传代培养（消化法）一. 传代前准备： 预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。3.正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染。4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。5.准备
细胞消化成团怎么回事
细胞消化成团个人认为是和消化酶有关，消化酶是否保存不当（主要为温度）并且时间过长失去了消化活性（可以做酶活测定），或者酶的浓度配的不合适，在允许范围（防止消化过度损伤细胞）内适当加大酶液量。以上是某f发表的一些浅见解。关于第二个有大量细胞脱落，我想是没有做好及时的细胞传代，细胞汇合80%（理想）就应
细胞培养的成功因素之一——细胞消化
1. 绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗
96孔板细胞最少种多少细胞，如何消化
96孔板细胞最少种多少细胞，如何消化先用PBS洗，把培养基洗干净。用0.1%的胰酶放在37度CO2 培养箱消化几分钟。之后把板子拿出来轻轻拍下，细胞就消化下来了。然后你在板子里加含有10%血清的培养基中和胰酶，之后吹打几次细胞，这样细胞就吹散成单细胞了。如果你想直接染色，你可以现在板子里先放一片盖玻
细胞培养的成功因素之一细胞消化
1. 绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗
用胰酶消化贴壁细胞一般消化多长时间
因细胞而异如成纤维细胞很好消化（一分钟），而上皮细胞对胰酶很赖受，要很长时间。心肌细胞只要0.25的酶，2-3分钟即可，不用放入培养箱
原代细胞中各种组织消化方法汇总
细胞培养名称：新生大鼠皮质星形胶质细胞培养组织来源：种属：大鼠年 龄：新生1天-2天取材部位： 皮质选用的酶：0.125%胰酶消化时间：37度15min注意事项：胰酶平时用1.5ml EP管分装冻存，用时解冻，37预温1min，以保持胰酶好的活性，消化时每隔5min轻轻摇动消化组织。细胞培养名称：成
细胞的消化车间是什么层膜
溶酶体单层膜。细胞是生物结构和功能最基本的单位，所有的活的生物体，是有时被称为“建筑砌块的生活”。细胞的消化车间是溶酶体单层膜。溶酶体（lysosome）为细胞浆内由单层脂蛋白膜包绕的内含一系列酸性水解酶的小体。是细胞内具有单层膜囊状结构的细胞器，溶酶体内含有许多种水解酶类，能够分解很多种物质，溶酶
细胞生长对消化系统的作用
细胞生长对消化系统的作用：加强胃肠功能，促进消化酶的分解，增进食欲，治疗慢性胃炎。
细胞人工纯化的酶消化法介绍
酶消化法是比较常用的纯化方法，不仅对贴壁细胞可行，能利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同，使两者分开，达到纯化的目的，对贴壁细胞与半贴壁及粘附细胞间的分离纯化也是十分有效的。 (1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化 两者在胰蛋白酶的作用下，由于成纤维细胞先脱壁，而上皮细胞要消化相当长
细胞纯化酶消化法的方法介绍
酶消化法是比较常用的纯化方法，不仅对贴壁细胞可行，能利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同，使两者分开，达到纯化的目的，对贴壁细胞与半贴壁及粘附细胞间的分离纯化也是十分有效的。
细胞的消化系统指的细胞器是什么
溶酶体。溶酶体为细胞浆内由单层脂蛋白膜包绕的内含一系列酸性水解酶的小体，是细胞内具有单层膜囊状结构的细胞器，溶酶体内含有许多种水解酶类，能够分解很多种物质，溶酶体被比喻为细胞内的“酶仓库”“消化系统”。
细胞传代消化时所用胰酶的浓度
细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切：用眼科剪把
初代细胞培养实验——消化培养法
初代培养或原代培养，可以用于：（1）从供体获取组织后的首次培养；（2）组织和细胞刚刚离体，生物性状尚未发生很大的变化，具有二倍体遗传性状，在供体来源充分、生物条件稳定的情况下（年龄、性别），在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法，能把组织块分散成细胞团或单个细胞，便于细
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以：（1）获得神经胶质细胞；（2）用于神经胶质细胞电生理特性，如膜电位、去极化等；（3）用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物，它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子，并能分泌多种神
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以：（1）获得神经胶质细胞；（2）用于神经胶质细胞电生理特性，如膜电位、去极化等；（3）用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物，它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子，并能分泌多种神
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切：用眼科剪把
H1650细胞怎么算是消化好了呢
H1650 人非小细胞肺癌细胞什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙状移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，就应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好
肿瘤细胞原代培养实验——酶消化法
实验方法原理本法是利用成纤维细胞对胶原酶较为敏感的特点，通过消化进行选择。可用0.5mg/ml的胶原酶消化处理，边消化边在倒置显微镜下窥视，当发现成纤维细胞被除掉后，即终止消化；用Hanks洗涤处理一次后，更换新培养液，继续培养，可获纯净肿瘤细胞。如成纤维细胞未被除净，可再次重复。实验材料组织试剂、
细胞原代培养实验——胰酶消化法
细胞原代培养可以：（1）为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段；（2）为传代培养创造条件；（3）服务于临床实践，用于药物筛选等。实验方法原理将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、