细胞消化基础问答
细胞培养实验中不可或缺的除了培养基，胰酶也是非常重要的一个角色，虽然细胞培养试验基本技术大同小异，每种细胞的培养条件各不相同，但是，在细胞传代过程中都少不了这个步骤—胰酶消化。细胞消化使用胰酶时需要了解哪些问题？一、 细胞培养过程中为什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽链，通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上与培养皿壁结合处蛋白降解，从而使两者分离。这时，细胞由于自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力可成为球形。 图1.胰酶酶切位点二、 使用胎牛血清培养细胞，在使用胰酶消化时发现血清可以终止此过程，这是何原因？血清终止的原理其实是竞争抑制，就是用过量的牛血清中含有的蛋白和胰酶结合，使胰酶失去消化细胞蛋白的机会。三、 为什么使用了胰蛋白酶消化，细胞还是成团的，这可能是什么原因导致的？① 消化时间不够 ② 吹打力度不够 ③ 胰酶消化液浓......阅读全文
细胞消化基础问答
细胞培养实验中不可或缺的除了培养基，胰酶也是非常重要的一个角色，虽然细胞培养试验基本技术大同小异，每种细胞的培养条件各不相同，但是，在细胞传代过程中都少不了这个步骤—胰酶消化。细胞消化使用胰酶时需要了解哪些问题？一、 细胞培养过程中为什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽
细胞培养基础问答
细胞培养实验中用量最多的就是细胞培养基，虽然细胞培养试验基本技术大同小异，但是每种细胞的培养条件却相差甚远。若偏离某种细胞所需的培养条件，则会导致细胞表达不同的表型因此，在实验前，需要熟悉自己所使用的细胞系，并在实验中严格遵守所有产品的操作说明。 在实验过程中，作为实验小白，我们应该如何应对相关问题
FBS基础问答
血清是一种纯天然培养基，含有细胞生长繁殖所需的多种营养成分，如蛋白质、多肽等，多用于细胞培养、生物制品及诊断试剂的生产。血清的主要成分是蛋白质，如：白蛋白，球蛋白，纤维粘连素（促进细胞附着）、α2巨球蛋白（抑制胰蛋白酶的作用），激素，胰岛素（可促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，促细胞分裂），类胰岛素生长因
电热套基础问答
1.提问：烧瓶能接触电热套壁吗,会不会有受热不均的问题?回答：可以，我们经常在电热套里加热蒸馏!不过温度不超过180度。应该会有加热不均匀的问题，毕竟不是水浴。2.提问：平底烧瓶是否可用电热套长时间加热?(通常都用圆底烧瓶进行加热，因为其受热均匀、耐压高。但我看到几篇“分析烟丝挥发性成分”的文章里，
石油产品基础知识问答
1、什么是油品的馏程 馏程是指以油品在规定条件下蒸馏所得到的以初馏点到终馏点表示蒸发特征的温度范围。主要用来判定油品轻、重馏分组成的多少，控制产品质量和使用性能等。 2、什么是辛烷值 代表点燃式发动机燃料抗爆性的一个约定数值。在规定条件下的标准发动机试验中，通过和标准燃料进行比较来测
电热套基础小知识问答
提问：烧瓶能接触电热套壁吗,会不会有受热不均的问题?回答：可以，我们经常在电热套里加热蒸馏!不过温度不超过180度。应该会有加热不均匀的问题，毕竟不是水浴。提问：平底烧瓶是否可用电热套长时间加热?(通常都用圆底烧瓶进行加热，因为其受热均匀、耐压高。但我看到几篇“分析烟丝挥发性成分”的文章里，将烟丝和
QPCR的基础知识问答
问：什么是QPCR？答：QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？答：聚合酶链式反应（Polymerase C
骨质疏松症知识问答：基础篇
骨质疏松症是一种常见的老年性疾病。随着人口老龄化趋势的不断加剧，其发病率也在同步增长。目前我国60岁以上人群中骨质疏松症的发病率约为40％～50％，全国骨质疏松症病人超过1亿，男女之比为3:7，其中，80%为老年患者。 虽然人们对“骨质疏松”这个名词耳熟能详，但对它的认识往往是“一知半解”，甚
示波器基础知识一百个问答
示波器基础知识百问 1． 对一个已设计完成的产品，如何用示波器经行检测分析其可靠性？ 答： 示波器早已成为检测电子线路最有效的工具之一，通过观察线路关键节点的电压电流波形可以直观地检查线路工作是否正常，验证设计是否恰当。这对提高可靠性极有帮助。当然对波形的正确分析判断有赖于工程师自身的经验。
细胞培养常见问答
细胞培养常见问答 1、加到培养基中的血清 必须灭活吗？ 答：不是必须的，看做什么实验了。 2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗？ 答：如果用于培养大多数的肿瘤细胞，血清一般是不需要灭活的，这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞，如内皮细胞，
细胞消化知识
无论是原代细胞还是细胞系或癌细胞，细胞长满瓶后，需要对细胞进行传代或将细胞收集起来用作其他实验。贴壁生长的细胞必须要做的一步便是消化过程，下面便对细胞消化、中和、洗涤等过程做个简单介绍。1、绝大部分细胞消化的时候是只需用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留胰酶附着在细胞表面在37度一般不到2min足够
细胞传代实验_消化法
实验方法原理用胰蛋白酶消化细胞，用于贴壁细胞传代培养。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶酒精PBS仪器、耗材超净工作台酒精灯酒精棉球培养箱显微镜吸管离心管离心机实验步骤一、传代前准备 1. 预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 2. 用75%酒精
细胞消化经验总结！
一、酶消化法1、胰酶。这是用得多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活性。保存
纳米激光粒度仪（动态散射光DLS）基础知识问答
随着纳米技术的繁荣发展，基于DLS技术的纳米激光粒度仪也日益普及，掌握其基本特性及基础知识，相信会对关注纳米粉体材料的粉体圈内人士有所帮助。本文将以问答的形式，向读者介绍一些纳米激光粒度仪的基本常识。1、纳米激光粒度仪的测量原理是什么？由于分子热运动，悬浮介质（多数情况下是水或者有机溶剂）的分子不断
流式细胞术常见问题问答
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的？FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度， FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用，用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择？同型对照（Isotype Control）：使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免
流式细胞术常见问题问答
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的？ FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度， FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用，用于去除粘连细胞。 2、流式同型对照怎样选择？ 同型对照（Isotype Control）：使用与一抗相同
饲料中添加外源性消化酶的理论基础
幼龄动物：幼龄畜禽消化系统发育不完善，消化酶，胃酸和消化液分泌不足，不能充分分解大分子营养物质，单胃动物（猪）和家禽（鸡、鸭）不能消化非淀粉多糖。成年动物应激状态下：动物处于应激状态时，消化道内源酶分泌量降低，需要外源酶辅助作用予以补充。老龄动物（如老龄蛋鸡、种鸡等），消化机能降低，也需补充酶源，使
饲料中添加外源性消化酶的理论基础
幼龄动物：幼龄畜禽消化系统发育不完善，消化酶，胃酸和消化液分泌不足，不能充分分解大分子营养物质，单胃动物（猪）和家禽（鸡、鸭）不能消化非淀粉多糖。成年动物应激状态下：动物处于应激状态时，消化道内源酶分泌量降低，需要外源酶辅助作用予以补充。老龄动物（如老龄蛋鸡、种鸡等），消化机能降低，也需补充酶源，使
细胞消化胰酶的配制
适用于，无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100ml PBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl
细胞消化的经验总结
一、酶消化法1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25% 的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活
细胞消化的小技巧（二）
细胞消化小技巧不一定要一次把所有细胞都要消化下来！晃动培养盘并在显微镜下用肉眼观察，只要70~80%细胞都收缩了或超过适合消化时间，就该终止消化反应，如果细胞量够即可进行后续传代或实验步骤；如果细胞量不够，则可视情况用不含钙、镁离子的平衡盐溶液清洗仍贴壁的细胞，再进行一次消化反应。▲ 消化不下来的细
细胞消化的小技巧（一）
每个做细胞实验的人，不管去哪“浪”，心里都会有个牵挂：我的细胞过两天要传代！大部分组织细胞离体培养时，会以贴壁的形式生长（除了取自血、脾或骨髓的细胞）;完全培养基中的血清，含有许多带阳性电荷的促细胞附着因子（层黏连蛋白 Laminine、纤维链接蛋白 Fibronectin 等胞外基质），能帮助细胞
细胞化学基础碱基
碱基，在化学中本是“碱性基团”的简称。有机物中大部分的碱性基团都含有氮原子，称为含氮碱基，氨基（-NH2）是最简单的含氮碱基。碱基，在生物化学中又称核碱基、含氮碱基，是形成核苷的含氮化合物，核苷又是核苷酸的组分。碱基、核苷和核苷酸等单体构成了核酸的基本构件。核碱基间可以形成碱基对，且彼此堆叠，所以，
细胞化学基础锌指
锌指是一种常出现在DNA结合蛋白质中的一种结构基元。锌螯合在氨基酸链中形成锌的指状结构。锌是某些酶的活性辅助因子，也是某些蛋白质，包括RNA聚合酶的转录因子，如TFIIIA(transcription factor III，Asubtype)、类固醇受体等能结合脱氧核糖核酸(DNA)的蛋白质亦含有锌
细胞化学基础α螺旋
α-螺旋（α-helix）是蛋白质二级结构的主要形式之一。指多肽链主链围绕中心轴呈有规律的螺旋式上升，每3.6 个氨基酸残基螺旋上升一圈，向上平移0.54nm，故螺距为0.54nm，两个氨基酸残基之间的距离为0.15nm。螺旋的方向为右手螺旋。氨基酸侧链R基团伸向螺旋外侧，每个肽键的肽键的羰基氧和第
细胞化学基础核酶
科学家在研究RNA的转录后加工时发现某些RNA有催化活性，可以催化RNA的剪接，这些由活细胞合成、起催化作用的RNA称为核酶。许多核酶的底物也是RNA，甚至就是其自身，其催化反应也具有专一性。已经阐明的天然核酶有锤头状核酶、发夹状核酶、I型内含子、Ⅱ型内含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基转移
细胞化学基础β转角
β-转角是一种常见的蛋白质二级结构，它通常出现在球状蛋白表面，因此含有极性和带电荷的氨基酸残基。
细胞化学基础腺苷
腺苷，是指由腺嘌呤的N-9与D-核糖的C-1通过β糖苷键连接而成的化合物，化学式为C10H13N5O4，其磷酸酯为腺苷酸。腺苷是一种遍布人体细胞的内源性核苷，可直接进入心肌经磷酸化生成腺苷酸，参与心肌能量代谢，同时还参与扩张冠脉血管，增加血流量。腺苷对心血管系统和肌体的许多其它系统及组织均有生理作用
细胞化学基础嘌呤
嘌呤（Purine），分子式C5H4N4，是一种杂环芳香有机化合物，是新陈代谢过程中的一种代谢物。
细胞消化成团怎么回事
细胞消化成团个人认为是和消化酶有关，消化酶是否保存不当（主要为温度）并且时间过长失去了消化活性（可以做酶活测定），或者酶的浓度配的不合适，在允许范围（防止消化过度损伤细胞）内适当加大酶液量。以上是某f发表的一些浅见解。关于第二个有大量细胞脱落，我想是没有做好及时的细胞传代，细胞汇合80%（理想）就应