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数字PCR缘何是PCR的未来?群雄逐鹿,几分天下?

新冠疫情之下,“测核酸”已成为全民热词,PCR作为测核酸的官宣仪器也火爆热卖,这里指的是荧光定量PCR(qPCR)。大家知道,有时的“漏检”是因为病毒的copy数太低;而若想减少甚至消除“漏检”,可用另一种更灵敏更精准的数字PCR(digital PCR,dPCR)技术。dPCR和qPCR到底有何区别?为什么说dPCR的效果更好?它能解决哪些问题?国内外有哪些dPCR的玩家?本文将揭秘dPCR的前世今生,并对市场上dPCR的代表性产品逐一展示,希望能为您下次入囊前做点儿准备。PCR定量发展简史 PCR即聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),它以DNA双链复制原理为基础,对特定核酸样本进行体外扩增,能够将微量的核酸样本迅速拷贝至几百万倍。自1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR以来的三十多年,PCR经历了三代技术的发展。第一代传统PCR技术,采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进......阅读全文

crystal数字PCR如何实现的核酸绝对定量?

crystal数字PCR技术是一种核酸分子的绝对定量技术,原理是将PCR反应体系分配到大量微小的反应器中,在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ,进行"单分子模板"PCR 扩增。扩增结束后,通过阳性反应单元(通过终点荧光信号判断)的数目和统计学方法计

基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测

基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测EvaGreen®是一种无致突变性、无细胞毒性的DNA结合染料,NaicaTM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统可兼容EvaGreen®染料进行的数字PCR实验分析。反应体系中游离的的EvaGreen®染料不发出荧光信号,但

荧光定量pcr仪定量方法之-绝对定量

  在做qPCR实验时,我们经常会问:“你是做绝对定量还是相对定量呢?”,而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数,但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线,常用于确定病毒滴度。   使用标准曲线进行绝对定量   绝对定量是通

荧光定量PCR的绝对定量的特点

什么是荧光定量PCR的绝对定量?从字面上来理解,绝对定量就是“绝对的”,就是想知道某一份样本里靶标DNA到底有多少拷贝,不因任何其他样本的情况而发生改变。绝对定量的输出结果一定是与拷贝数相关的,如copies/ml blood, copies/μg Total RNA等。Blood和Total RN

BioDigital.青数字PCR:实现更高通量的核酸绝对定量

  ——上海小海龟科技有限公司总裁吴东平博士专访  分析测试百科网讯 2021年3月28日,第十八届中国国际检验医学暨输血仪器试剂博览会(简称“CACLP”)在“山城”重庆悦来国际博览中心召开。在本次展会上,上海小海龟科技有限公司(简称小海龟科技)为观众带来了全自动化数字PCR解决方案。分析测试百科

荧光定量PCR“相对定量”与“绝对定量”的区别

  相对定量    相对定量,顾名思义,它的结果是一个相对的值,没有单位。与谁相对呢?就是传说中的“内参基因”,又名“持家基因”,即housekeeping gene。    那为什么在相对定量里一定需要它呢?    打个比方:假如你要研究某个基因,提取完样品的RNA然后逆转录再做PCR,发现结果是

PCR反应绝对定量和相对定量的差别?

绝对定量目的是测定目的基因在样本中的分子数目,即通常所说的拷贝数,应用于taqman探针法检测。相对定量的目的是测定目的基因在两个或多个样本中的含量的相对比例,而不需要知道它们在每个样本中的拷贝数,应用于sybr green染料法检测。

绝对荧光定量PCR的数据分析

现在最常用的两种分析实时定量PCR实验数据的方法是绝对定量和相对定量。绝对定量通过标准曲线计算起始模板的拷贝数;相对定量方法则是比较经过处理的样品和未经处理的样品目标转录本之间的表达差异。2-△△CT方法是实时定量PCR实验中分析基因表达相对变化的一种简便方法,即相对定量的一种简便方法。本文介绍了该

绝对荧光定量PCR的数据分析

现在最常用的两种分析实时定量PCR实验数据的方法是绝对定量和相对定量。绝对定量通过标准曲线计算起始模板的拷贝数;相对定量方法则是比较经过处理的样品和未经处理的样品目标转录本之间的表达差异。2-△△CT方法是实时定量PCR实验中分析基因表达相对变化的一种简便方法,即相对定量的一种简便方法。本文介绍了该

PCR扩增中CT值、绝对定量和相对定量之间的关系

荧光定量pcr的体系配置和普通PCR没什么区别,因为qPCR的关键在于荧光物质的加入,扩增的过程中会产生大量携带荧光信号的PCR产物。所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分:检测器、光路系统、热循环模块。每个循环结束后,荧光定量PCR仪通过光学系统记录荧光信号的增加。最后,定量PCR软件计算出数